大鼠局灶性腦缺血腦組織的比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究

大鼠局灶性腦缺血腦組織的比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究

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1、大鼠局灶性腦缺血腦組織的比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究王繼生1,邱宗蔭**綿陽市科委資助課題(編號:06S042-7)作者簡介:王繼生(1974~),男,藥理學(xué)博士,研究方向:新藥開發(fā)的藥理學(xué)研究及蛋白質(zhì)組學(xué),Email:wjs327@sina.com2,夏永鵬2,李惠芝2(1綿陽市第三人民醫(yī)院綿陽621000;2重慶醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院重慶400016)[摘要]目的建立局灶性腦缺血模型,從蛋白質(zhì)整體水平探討腦缺血/再灌注的保護(hù)作用機(jī)制。方法雄性、健康大鼠SD,隨機(jī)分為正常組、腦缺血模型組參照Koizumi法并加以改進(jìn)

2、,建立MCAO大鼠腦缺血2h再灌注24h的模型;裂解液提取總蛋白質(zhì),以雙向電泳技術(shù)進(jìn)行蛋白質(zhì)分離,考馬斯亮藍(lán)染色,獲得雙向電泳圖譜,利用專門的軟件篩選出差異蛋白質(zhì),用MALDI-TOF-MS獲得肽指紋圖譜,MS-Fit數(shù)據(jù)庫進(jìn)行搜索,獲得有關(guān)的蛋白質(zhì)信息。結(jié)果:局灶性腦缺血模型組與正常組腦組織的比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究。與模型組比較,從正常組篩選到23個差異表達(dá)蛋白斑點(diǎn),其中13個低表達(dá),10個高表達(dá),鑒定其中6個蛋白質(zhì),發(fā)現(xiàn)白細(xì)胞三烯A-4水解酶、促甲狀腺激素釋放激素降解胞外酶等與腦缺血相關(guān)的蛋白質(zhì)。結(jié)論

3、:從蛋白質(zhì)組學(xué)角度發(fā)現(xiàn)了一些與腦缺血相關(guān)的蛋白,有助于今后進(jìn)一步研究腦缺血性損傷的保護(hù)機(jī)制。[關(guān)鍵詞]腦缺血蛋白質(zhì)組學(xué)ACOMPARATIVEPROTEOMESTUDYONFOCALCEREBRALISCHEMICTISSUEOFRATBRAINWangJi-Sheng1,QiuZong-Yin2,XiaYong-Peng2,LiHui-Zhi2(1.Thethirdhospitalofmianyang,mianyang621000;2DepartmentofPharmacy,ChongQingUni

4、versityofMedicalScience.ChongQing400016)[ABSTRACT]Objective:Toestablishamodeloffocalcerebralischemictissueofratbrainandexploretheprotectivemechanismoffocalcerebralischemiareperfusioninwholelevelofproteins.Method:MaleandhealthySDrats,wereclassifiedthemin

5、tonormal,Modelatrandom.EstablishedtheMCAOmodelwithsuturemethodbyreperfusion24hafterischemic2haccordingtoKoizumi,smethod,extractedtotalproteinswithLysisbuffer,separatedproteinsbytwo-dimensionalelectrophoresis(2-DE),stainedproteinsbyCoomassiebrilliantblue

6、,gotthepatterns,foundoutdifferentialproteins,andobtainedPMSbyMALDI-TOF-MS,gainedrelatedtheinformationofproteinsbyMS-Fitdatabase.Result:.Acomparativeproteomestudyofmodelandnormalgroup.Comparedwithmodelgroup,thenormalgroupgained23differentialproteinspots,

7、13spotsexpressedlowly,and10spotshigh,identified6proteinspots,foundouttherelativecerebralischemicproteinssuchasLeukotrieneA-4hydrolase,Thyrotropin-releasinghormone-degradingectoenzymeetc.Conclusion:Establishinga2-DEtechnologywasappliedtoproteinanalysisof

8、braintissue,andfoundouttherelativeproteinsoffromproteomeaspect.Thiswouldprofitfromtheprotectivemechanismofcerebralischemictissue.[KEYWORDS]:cerebralischemic;Proteomics;腦血管病是危害人類生命與健康的常見病和多發(fā)病,以其高發(fā)病率、高復(fù)發(fā)率、高致殘率、高死亡率嚴(yán)重危害人類的健康。腦血管病中尤以

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