tripurereagent抽提指南

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1、◆TRIpureReagent抽提指南◆目錄號RP02◆使用手冊◆實驗室使用，僅用于體外◆TRIpureReagent抽提指南◆目錄號RP02◆使用手冊◆實驗室使用，僅用于體外◆TRIpureReagent抽提指南◆目錄號RP02◆使用手冊◆實驗室使用，僅用于體外北京金百特生物技術(shù)有限公司◆大量全血基因組DNA提取試劑盒◆目錄號D014◆使用手冊◆實驗室使用，僅用于體外-1-大量全血基因組DNA提取試劑盒目錄號：D014目錄編號包裝單位D014-1616次×10mlD014-3232次×10mlD014-9696次×10mlv適用范圍：適用

2、于快速提取各種動物全血基因組DNAv試劑盒組成、儲存、穩(wěn)定性：試劑盒組成保存16次×10ml32次×10ml96次×10ml10x紅細胞裂解液室溫50ml100ml300ml細胞核裂解液室溫180ml180×2ml250ml×4蛋白沉淀液室溫55ml110ml330mlDNA溶解液室溫15ml30ml90ml本試劑盒在室溫儲存18個月不影響使用效果?！窘鸢偬厣铩考夹g(shù)支持：15011185085www.gene-better.cn-7-儲存事項:1.環(huán)境溫度低時細胞核裂解液中某些去污劑成份會析出出現(xiàn)渾濁或者沉淀，可在37℃水浴加熱幾分鐘，即

3、可恢復澄清，不要劇烈搖晃，以免形成過量的泡沫。2.蛋白沉淀液可能出現(xiàn)析出和沉淀，可以在37℃水浴幾分鐘幫助重新溶解，如果不能完全溶解，也不影響使用效果，直接取用上層溶液即可。3.避免試劑長時間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化、pH值變化，各溶液使用后應及時蓋緊蓋子。v產(chǎn)品介紹：本試劑盒根據(jù)全血特點采用幾個快速步驟提取基因組DNA。首先紅細胞裂解液裂解去除不含DNA的紅細胞，細胞核裂解液裂解白細胞釋放出基因組DNA，然后蛋白沉淀液選擇性沉淀去除蛋白，最后純凈的基因組DNA通過異丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。v產(chǎn)品特點：1.從十幾個配方中優(yōu)選出的紅

4、細胞裂解液配方，裂解快速完全。2.不需要使用有毒的苯酚等試劑。3.快速，簡捷，單個樣品操作一般可在1小時內(nèi)完成。4.【金百特生物】技術(shù)支持：15011185085www.gene-better.cn-7-結(jié)果穩(wěn)定，產(chǎn)量高（典型的產(chǎn)量10ml全血可提取出150-500μg），OD260/OD280典型的比值達1.7～1.9，長度可達50kb-150kb，可直接用于構(gòu)建文庫、PCR、Southern-blot和各種酶切反應。v注意事項1.所有的離心步驟均在室溫完成，使用轉(zhuǎn)速可以達到2,500xg，并配備容納50ml心管轉(zhuǎn)頭的傳統(tǒng)臺式離心機。2.

5、用戶需自備異丙醇和70％乙醇。3.典型的產(chǎn)量10ml全血可提取出150-500μg基因組DNA（不同樣品尤其疾病樣品中中白細胞數(shù)量差異可能非常大，因此產(chǎn)量的個體差異也可能非常大）。4.本試劑盒為溶液型，可以很容易的按照比例擴大或者縮小每次處理的全血量（20μl-10ml），請聯(lián)系我們索取其它處理量的操作手冊。5.本試劑盒可運用于多種抗凝劑的全血，如EDTA、檸檬酸、肝素抗凝血。其中由于肝素抗凝血的白細胞沉淀團很難打散重懸，影響裂解效果，建議選用非肝素的抗凝劑收集血液標本。6.為了最佳效果，最好使用新鮮血液標本或者4℃存放小于3天的標本，不要

6、使用反復凍融超過3次的標本，否則會嚴重降低產(chǎn)量?！窘鸢偬厣铩考夹g(shù)支持：15011185085www.gene-better.cn-7-v操作步驟：（實驗前請先閱讀注意事項）1.吸取30ml1x紅細胞裂解液到一個50ml離心管。使用前應該用去離子水將10x紅細胞裂解液稀釋10倍到1x。2.將抗凝全血（使用前回復到室溫）顛倒混勻后，吸取10ml加到上步裝有紅細胞裂解液離心管中，顛倒6-8次，并倒置輕彈管壁，確保充分混勻。3.室溫放置10分鐘（期間應該顛倒輕彈混勻數(shù)次幫助裂解紅細胞）。4.2,500xg離心2分鐘，倒棄紅色上清，并小心的盡可能多

7、的吸棄上清（注意不要吸到管底的細胞團），留下完整的管底白細胞團和大約100μl的殘留上清。離心后在管底應該見到白色的白細胞團，也可能有一些紅細胞殘片和白細胞團在一起，但是如果看到的是大部分的紅色細胞團，說明紅細胞裂解很不充分，應該再加入適量紅細胞裂解液重懸細胞團后重復步驟3，4。5.渦旋振蕩直到白細胞團充分重懸、分散。白細胞的重懸分散對下一步裂解非常重要，白細胞未打散就加入裂解液，會導致白細胞不能充分裂解，形成肉眼可見團塊。6.加入10ml細胞核裂解液到重懸的白細胞，上下吹打裂解白細胞，或者劇烈渦旋10秒幫助裂解白細胞。7.可選步驟:在裂解

8、物中加入RNaseA（10mg/ml）至終濃度30μg/ml，顛倒25次混勻，37℃溫育15分鐘去除殘留RNA，然后冷卻回室溫。8.加入3.33ml蛋白沉淀液后，在渦旋振蕩器上高