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1、穿心蓮內(nèi)酯對不同分化胃癌細(xì)胞株的體外增殖的影響論文董建華葉再元李曙光陶厚權(quán)楊瓊【摘要】[目的]明確穿心蓮內(nèi)酯對不同分化胃癌細(xì)胞株的體外增殖的影響。[方法]以不同濃度的穿心蓮內(nèi)酯處理低分化(MKN45)、中分化(SGC7901)和高分化(MKN28)胃腺癌細(xì)胞株,分別溫育24h、48h、72h;采用噻唑藍(lán)比色法檢測各和穿心蓮內(nèi)酯對癌細(xì)胞的藥物半數(shù)抑制濃度(IC50),比較穿心蓮內(nèi)酯對不同分化胃癌細(xì)胞株的體外增殖抑制作用的異同。[結(jié)果]穿心蓮內(nèi)酯對胃癌細(xì)胞株MKN45、SGC7901、MKN28的體外增殖均具有顯著的抑制作用,并
2、且呈劑量效應(yīng)和時(shí)間效應(yīng)關(guān)系。低分化的MKN45細(xì)胞株對穿心蓮內(nèi)酯的敏感性明顯高于高分化的MKN28細(xì)胞株和中分化的SGC7901細(xì)胞株。[結(jié)論]穿心蓮內(nèi)酯對不同分化程度的胃腺癌細(xì)胞株體外增殖抑制作用不同?!娟P(guān)鍵詞】穿心蓮內(nèi)酯;分化程度;胃癌細(xì)胞株;敏感性;MTT法Abstract:[Objective]TodeterminethesensitivityofAndrographolideingastriccancercelllinesinvariousdegreesofdifferentiation.[Methods]Thre
3、egastriccancercelllinesincludingMKN45(1ooderatedegreedifferentiation)andMKN28(highdegreedifferentiation)inedbyMTTtest;putethedatatoarriveatinhibitionratio(IR)and50%inhibitingconcentration(IC50),makethesensitivitydisparityclearbyparethedata.[Results]Andrographolideh
4、adsignificantinhibitioneffectsontheproliferationofMKN45.freele—dependentanddose—dependentoresensitivitytochemotherapythanoderatelydifferentiatedSGC7901.[Conclusion]TheeffectofAndrographolideongastriccancercellsinvariousdegreesofdifferentiationethod穿心蓮內(nèi)酯(Andrographo
5、lide)是爵床科植物穿心蓮(Andrographispaniculata(Burm.f.)中提取到的二帖內(nèi)酯類化合物,分子式是C20H30O5,是中藥穿心蓮的重要有效成分之一。具有抗菌、抗炎、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)、治療腦血管疾病、保肝利膽等作用,并具有低毒性、價(jià)格便宜的特點(diǎn)。以往研究表明,穿心蓮內(nèi)酯對乳腺癌MCF7細(xì)胞、食管癌Ec9706細(xì)胞、結(jié)腸癌HCT8和HCTl16細(xì)胞、前列腺癌PC3等腫瘤細(xì)胞,均有體外抗腫瘤作用。穿心蓮內(nèi)酯能抑制多種腫瘤細(xì)胞系的增殖[1]。但對胃癌細(xì)胞的作用未見報(bào)道。本研究通過體外細(xì)胞培養(yǎng)采用
6、MTT法明確穿心蓮內(nèi)酯對高分化胃癌細(xì)胞株MKN28、中分化胃癌SGC7901、低化胃癌細(xì)胞株MKN45的體外增殖的影響,以期揭示穿心蓮內(nèi)酯對不同分化胃癌細(xì)胞的作用,為臨床治療胃癌用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1實(shí)驗(yàn)材料1.1主要實(shí)驗(yàn)藥品穿心蓮內(nèi)酯(中國藥品生物制品檢定所用二甲基亞砜(DMSO)溶解,配制成100mg/ml的溶液,-20℃保存?zhèn)溆茫?,RPMI1640培養(yǎng)液(美國Gibco公司加入青霉素和鏈霉素,使其濃度分別為100U/ml和100μg/ml),胎牛血清(北京鼎國生物技術(shù)公司56℃滅活30min,-20℃保存?zhèn)溆茫?.1
7、MPBS液,胰酶(美國Gibco公司),DMSO(無錫海碩生物有限公司),噻唑藍(lán)(MTT,美國Genvieg/ml)。1.2主要實(shí)驗(yàn)儀器96孔培養(yǎng)板(德國Greiner公司),超凈工作臺(蘇州蘇凈集團(tuán)安泰公司),二氧化碳孵育箱(德國Thermo公司),自動(dòng)酶標(biāo)儀(瑞士Tecan公司)。1.3試驗(yàn)用細(xì)胞人高分化胃癌細(xì)胞株MKN28、中分化胃癌株SGC7901、低化胃癌細(xì)胞株MKN45,均由自上海交通大學(xué)消化外科實(shí)驗(yàn)中心惠贈(zèng)。2實(shí)驗(yàn)方法2.1細(xì)胞培養(yǎng)將3種細(xì)胞用含有10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液,于37℃、5%CO2的培
8、養(yǎng)箱中培養(yǎng),每2~3d傳代1次,取對數(shù)生長期細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。2.2實(shí)驗(yàn)分組實(shí)驗(yàn)分為穿心蓮內(nèi)酯實(shí)驗(yàn)組、5氟脲嘧啶(5FU)對照組、陰性對照組、DMSO對照組和空白對照組。其中穿心蓮內(nèi)酯實(shí)驗(yàn)組包括7.5μg/ml、15μg/ml、30μg/ml、60μg/ml、120μg/ml共5個(gè)濃度組,