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《川芎配方顆粒高效液相色譜指紋圖譜研究論文》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、川芎配方顆粒高效液相色譜指紋圖譜研究論文韓麗，黃媛莉，楊明，謝秀瓊【摘要】目的建立川芎配方顆粒高效液相色譜（HPLC）指紋圖譜。方法應(yīng)用KromasilKR-100-5C18柱，0.5％磷酸水溶液和甲醇進(jìn)行梯度洗脫，流速為1.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為240nm，柱溫為20℃。結(jié)果得到分離度、重復(fù)性均較好的川芎配方顆粒HPLC指紋圖譜.freelethodforthefingerprintofChuanxiongDispensingGranulesbyHPLC.MethodsSeparationedonaKromasilKR-100-5C18column,.fre
2、elobilephaseconsistingof0.5%phosphoricacid-ethanolandl/min.TheUVdetection,columntemperatureonpeaks.ConclusionAccordingtothefoundationofHPLCfingerprint,chuanxiongHort.的干燥根莖經(jīng)加工制成的配方顆粒，主要含生物堿類(lèi)、有機(jī)酸類(lèi)和揮發(fā)油類(lèi)成分。功能活血行氣、祛風(fēng)止痛，用于治療月經(jīng)不調(diào)、經(jīng)閉痛經(jīng)、癥瘕腹痛、胸脅刺痛、跌撲腫痛、頭痛、風(fēng)濕痹痛［1］。目前，對(duì)川芎藥材的指紋圖譜多有報(bào)道［2～5］，但對(duì)其配方顆粒指
3、紋圖譜以及與飲片指紋圖譜的比較研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本文采用高效液相色譜法對(duì)川芎配方顆粒進(jìn)行了研究，得到分離度、重復(fù)性均較好的指紋圖譜，利用高效液相色譜技術(shù)對(duì)其主要色譜峰進(jìn)行了初步歸屬，同時(shí)對(duì)10批川芎配方顆粒指紋圖譜進(jìn)行了相似度評(píng)價(jià)，并與川芎飲片指紋圖譜進(jìn)行比較研究，為川芎配方顆粒全面質(zhì)量控制提供依據(jù)。1儀器與試藥pochuanxiongHort.的干燥根莖經(jīng)加工制成的配方顆粒，四川綠色藥業(yè)科技發(fā)展股份有限公司提供）；川芎飲片3批（上述10批川芎配方顆粒的投料飲片，四川綠色藥業(yè)科技發(fā)展股份有限公司提供）；阿魏酸對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所提供）。2方法2.1供試品溶
4、液的制備取本品粉末0.5g，加甲醇20ml，水浴回流提取1h，濾過(guò)，揮去部分溶劑，轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶中，甲醇定容，用0.45μm微孔濾膜濾過(guò)，即得。2.2參照物溶液的制備精密稱取阿魏酸對(duì)照品適量，加甲醇制成每毫升含0.5mg的溶液，即得。2.3色譜條件及測(cè)定方法色譜柱為KromasilKR-100-5C18（4.6mm×250mm，5μm）；流動(dòng)相為0.5％磷酸水溶液（A）和甲醇（B），梯度洗脫為0～3min（85%A），3～55min（85%A～10%A），55～60min（10%A）；流速1.0ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)240nm；柱溫20℃；記錄時(shí)間為60mi
5、n；采樣頻率為每秒采一個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)；泵模式5ml/min；進(jìn)樣量10μl。2.4方法學(xué)考察2.4.1空白實(shí)驗(yàn)吸取甲醇10μl，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，結(jié)果表明空白溶劑無(wú)干擾。2.4.2參照物實(shí)驗(yàn)吸取阿魏酸參照物溶液10μl，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，其主峰的保留時(shí)間用于確定川芎配方顆粒中阿魏酸的峰位。2.4.3儀器精密度實(shí)驗(yàn)取同一供試品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次。同時(shí)取峰面積大于總峰面積的3.0%的色譜峰保留時(shí)間峰面積進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，其保留時(shí)間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD均低于1%，儀器精密度良好。2.4.4穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取同一供試品溶液，分別在0，1，2，4，8，12，24，4
6、8h進(jìn)行檢測(cè)。同時(shí)取峰面積大于總峰面積的3.0%的色譜峰保留時(shí)間峰面積進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，其保留時(shí)間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD均低于1%，表明樣品48h內(nèi)穩(wěn)定性良好。2.4.5重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取同一批號(hào)供試品，按“2.1”項(xiàng)下方法分別制備供試品溶液6份，進(jìn)樣檢測(cè)。同時(shí)取峰面積大于總峰面積的3.0%的色譜峰保留時(shí)間峰面積進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，其保留時(shí)間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD均低于1%，重復(fù)性良好。3結(jié)果3.1峰的辨認(rèn)和分區(qū)指紋圖譜建立的原則應(yīng)從色譜峰的整體性出發(fā)，找出能構(gòu)成指紋特征的色譜峰的峰號(hào)、峰位、峰數(shù)。經(jīng)比較所有測(cè)定和記錄的色譜圖，在觀察眾多供試品色譜圖后，確定川芎配方顆粒的11個(gè)峰作為特征組成
7、其指紋圖譜，見(jiàn)圖1。為了便于辨認(rèn)和分析比較，將整個(gè)色譜圖分成A，B，C，D4個(gè)區(qū)。A區(qū)包括1～7號(hào)峰（保留時(shí)間范圍0～20min），為極性較大的水溶性成分；B區(qū)包括8～11號(hào)峰（保留時(shí)間范圍20～40min），為生物堿和有機(jī)酸等中等極性的成分；C區(qū)（保留時(shí)間范圍40～50min）是川芎揮發(fā)油特征區(qū)；D區(qū)（保留時(shí)間范圍50～60min）為極性較小的成分。實(shí)際上1～4號(hào)峰不是絕對(duì)意義上的4個(gè)峰，而是一組分離不完全的峰，這一組峰在每一個(gè)供試品色譜圖中都出現(xiàn)，但分離欠佳，故可將其作為一個(gè)整體進(jìn)行辨認(rèn)。圖1川芎配方顆粒指紋圖譜特征峰（略）3.2川芎配方顆粒指紋圖譜的建立取川
8、芎配方顆粒
