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《不同品種甘薯莖尖脫毒快繁技術優(yōu)化研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、不同品種甘薯莖尖脫毒快繁技術優(yōu)化研究王常蕓，李曉亮，辛國勝，王建玲，王冬梅（煙臺市農(nóng)業(yè)科學研究院，山東煙臺265500）摘要：為了建立更為有效的甘薯莖尖離體脫毒培養(yǎng)及快速繁殖技術體系，選用不同品種的甘薯對外源激素濃度、初次繼代轉(zhuǎn)培時間、自來水替代蒸餾水、白糖替代蔗糖等方面進行了試驗研究。研究結果表明：以添加外源激素6-BA0.5~1.0mg/L和NAA0.05~0.2mg/L的MS培養(yǎng)基為最佳誘導分化培養(yǎng)基；莖尖接種后13~20天進行初次繼代轉(zhuǎn)培為最佳時間，成苗率最高達74.3%；繼代快繁過程中用
2、白糖替代蔗糖、自來水替代蒸餾水，成苗率可達到90%；脫毒苗在生產(chǎn)試驗中優(yōu)勢明顯，增產(chǎn)幅度為5.2%~68.6%。.jyqkail：[email protected]。收稿日期：2015-01-11，修回日期：2015-03-12。0引言甘薯是中國四大主要糧食作物，也是飼料和輕工業(yè)的重要原料[1-3]。但甘薯是無性繁殖作物，在種植過程中極易感染病毒[4]，從而導致種性退化，抗性降低，直接影響了甘薯的品質(zhì)及產(chǎn)量，嚴重阻礙了甘薯的生產(chǎn)和利用[5-6]。據(jù)估計，中國每年因甘薯病毒病造成的損失高達
3、40億元[7-8]。迄今為止，國內(nèi)外尚無高效的化學防治藥物[9-10]。因此，目前采用甘薯莖尖脫毒，是防治病毒病、減輕危害的最有效途徑[11-13]。1960年Nielsen首次獲得甘薯無病毒植株，國內(nèi)20世紀80年代甘薯莖尖組織培養(yǎng)研究獲得成功[14]。1989年辛淑英[15]用MS+Kt2mg/L+IAA0.5mg/L，培養(yǎng)7~14天，轉(zhuǎn)移到不加激素的MS培養(yǎng)基上培養(yǎng)成苗。1990年陳應東等[16]利用MS+6-BA1mg/L+NAA0.01mg/L+GA31mg/L和MS+6-BA2mg/L
4、，培養(yǎng)6~16天，轉(zhuǎn)移到不加激素的MS培養(yǎng)基上培養(yǎng)成苗率達73.9%和94.4%。1998年趙玖華等[17]用培養(yǎng)基MS+NAA0.2mg/L+6-BA0.5mg/L使甘薯莖尖分生組織成苗率達76.5%。唐麗等[18]用MS+6-BA1.0~1.5mg/L，30天和60天后各更換一次MS培養(yǎng)基，90天誘導分化率在50%~60%，芽苗生長正常。文彤明等[19]利用‘高系14號’品種不經(jīng)愈傷組織誘導成功培養(yǎng)出甘薯脫毒苗，成苗率為30%~50%。上述研究報道主要集中在激素種類及濃度對甘薯莖尖分生組織成苗
5、及愈傷組織誘導培養(yǎng)基方面，但針對不同品種的優(yōu)化培養(yǎng)方法、增產(chǎn)效果及降低成本方面的研究尚鮮見報道，為此，筆者從甘薯不同品種需要的外源激素、繼代時間、水源、糖源以及脫毒增產(chǎn)效果等方面進行系列研究探討。以期為建立高效、實用的甘薯脫毒快繁技術體系提供參考。1材料與方法1.1試驗時間與地點試驗于2010年4月—2013年11月在煙臺市農(nóng)業(yè)科學研究院組培實驗室、溫室及試驗田中進行。1.2試驗材料選用本院甘薯所品種資源圃的‘徐18’、‘北京553’、‘遺字138’及本院選育推廣的‘煙薯27’、‘煙薯16’、‘煙
6、薯21’、‘煙薯25’、‘煙薯24’、‘煙紫薯3號’等品種資源。1.3試驗方法1.3.1外植體的選擇、消毒與接種挑選長勢良好無病癥表現(xiàn)的甘薯植株，剪取莖頂端2~3cm長，除去大葉，然后消毒、接種，方法參見段玉云等[20]。1.3.2培養(yǎng)基與培養(yǎng)條件基本培養(yǎng)基選用MS[21-22]，外源激素采用6-BA和NAA[23]，誘導培養(yǎng)基激素濃度配比見表1。初次繼代和快繁繼代培養(yǎng)基為MS[24]。瓊脂濃度為0.5g/100g，糖源（白糖和蔗糖）為3g/100g，pH5.8，培養(yǎng)條件見尚佑芬等[21]。每4周
7、繼代快繁一次[25]。1.3.3脫毒檢測經(jīng)過莖尖組織培養(yǎng)獲得的苗，只有一部分完全脫除病毒，所以對培養(yǎng)出的試管苗要及時進行病毒檢測。檢測方法主要有目測法、指示植物嫁接法、血清學檢測技術和分子生物學檢測技術等[9]。1.3.4馴化移栽在本院日光溫室，移栽前要將試管苗搬到溫室打開瓶蓋煉苗，注意移栽時輕輕用水沖凈根蒂上的培養(yǎng)基。移栽方法參見曹秀敏[25]。1.3.5脫毒增產(chǎn)試驗利用小區(qū)多年多點對比試驗，對‘徐18’、‘北京553’、‘遺字138’、‘煙薯27’、‘煙薯16’、‘煙薯21’、‘煙薯25’、‘
8、煙薯24’、‘煙紫薯3號’等品種資源進行脫毒甘薯增產(chǎn)效果測定，小區(qū)面積一般為66.6~200m2，3次重復，隨機排列。1.4數(shù)據(jù)分析方法采用列表比較分析法和Excel2003。2結果與分析2.1外源激素對甘薯不同品種莖尖誘導分化效果將不同品種的甘薯莖尖分別接種于不同激素濃度配比的MS培養(yǎng)基上（表1），CK為不加任何激素的MS培養(yǎng)基，誘導分化結果見表2。在CK培養(yǎng)基上，幾乎沒有明顯變化，而在添加不同濃度6-BA和NAA配比的X1~Z3培養(yǎng)基上都能誘導甘薯莖尖分生組織萌發(fā)，但X1~Z3
