紫丁香葉中總皂苷提取工藝的研究

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1、紫丁香葉中總皂苷提取工藝的研究郝婷婷，嚴(yán)銘銘，郭婷婷，邵帥，張連學(xué)【摘要】　　目的優(yōu)選紫丁香葉中總皂苷的提取工藝。方法采用香草醛－冰醋酸－高氯酸顯色法，用紫外分光光度計(jì)測(cè)定不同提取方法下所得紫丁香葉藥材中總皂苷的含量，選出紫丁香葉總皂苷的提取工藝。進(jìn)而設(shè)定正交實(shí)驗(yàn)，來(lái)優(yōu)選最佳提取工藝。結(jié)果總皂苷的最佳提取工藝為70%乙醇回流提取2次，1h/次，加醇量為每次13倍量。結(jié)論此工藝安全、成本低，得到的總皂苷含量高，可作為提取紫丁香葉生產(chǎn)工藝參考?！娟P(guān)鍵詞】紫丁香葉總皂苷正交設(shè)計(jì)提取工藝　　Abstract:ObjectiveToo

2、ptimizeextractionprocessoftotalsaponinsfromSyringaleaves.Methods5%Vanillin-AceticAcidGlacial-PerchloricAcidcolormetricanalysismethodandUVeasurethecontentoftotalsaponinsfromSyringaleavesbydifferentextractionsolutions.Theorthogonalexperimentesofextraction.ConclusionT

3、hisoptimalprocessissimple,stableandefficient.ItissuitableforpharmaceuticalproductionofSyringeleaves.　　Keyethods　　紫丁香葉為木樨科Oleaceae丁香屬Syringa紫丁香SyringaoblataL.的干燥葉〔1〕。味辛，性溫，入胃、肝、膽三經(jīng)，有清熱燥濕、解毒、消炎的作用。紫丁香葉中主要含有皂苷、黃酮〔2〕、有機(jī)酸、苯丙素、環(huán)烯醚萜等多種有效成分。嫩葉可當(dāng)茶飲解暑，鮮葉提取液對(duì)弗氏痢疾桿菌有較強(qiáng)的抑菌效果。紫丁

4、香葉制成的片劑，用于治療急性黃疸型肝炎，取得良好效果〔3〕。在民間，用紫丁香葉煎劑來(lái)治療暴火眼和防治痢疾非常普遍〔4〕。調(diào)查顯示紫丁香葉有很好的應(yīng)用前景和經(jīng)濟(jì)效益，但目前，《中國(guó)藥典》（2005年版）并未收錄紫丁香葉，對(duì)紫丁香葉總皂苷類化合物化學(xué)成分、藥理作用等方面的研究并不深入。鑒于此，本實(shí)驗(yàn)以齊墩果酸為指標(biāo)，通過(guò)紫外分光光度法對(duì)不同提取紫丁香葉總皂苷的方法進(jìn)行了比較和考察，優(yōu)選出紫丁香葉總皂苷最佳提取方法和工藝，為紫丁香葉中有效部位總皂苷的進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ)?！　?儀器與材料　　日本島津紫外分光光度計(jì)UV-2401PC（

5、北京）；電子天平MettlerCE240(上海)；試劑均為分析純；齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)品（供含量測(cè)定用）購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所；紫丁香葉為200609采摘的新鮮葉(由長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)鄧明魯教授鑒定)，干燥備用?！　?方法與結(jié)果　　2.1紫丁香葉總皂苷的不同提取方法　　2.1.1水煎法　　取干燥的紫丁香葉100g，加水文火煎煮3次。第1次12倍量水煎2h，后2次加10倍量水，煎1.5h，合并3次提取液，過(guò)濾，濃縮，80℃減壓干燥，稱重。同法做3次平行實(shí)驗(yàn)，計(jì)算平均得膏率。得膏率(%)=干膏重/生藥量×100%?！　?.1.2醇提法

6、　　　傳統(tǒng)的提取總皂苷的方法為乙醇提取，因此本實(shí)驗(yàn)選用70%乙醇回流提取。取干燥的紫丁香葉100g，用70%乙醇回流提取3次，1.5h/次，加醇量分別為12，10，8倍量。合并提取液，過(guò)濾，濃縮80℃，減壓干燥，稱重。同做3次平行實(shí)驗(yàn)，計(jì)算平均得膏率?！　?.1.3超聲波法　　取兩份干燥的紫丁香葉100g，分別加10倍量水和70%乙醇超聲3次，30～40min/次，合并提取液，過(guò)濾，濃縮，減壓干燥，稱重。同法做3次平行實(shí)驗(yàn)，計(jì)算平均得膏率?！　?.2紫丁香葉總皂苷含量測(cè)定方法　　2.2.1對(duì)照品溶液的制備　　以齊墩果酸作為標(biāo)

7、準(zhǔn)品，精密稱取干燥至恒重的齊墩果酸對(duì)照品11.04mg置于25ml容量瓶中，加甲醇5ml超聲處理5min，用甲醇定容至刻度，搖勻得濃度為0.44mg/ml的對(duì)照品儲(chǔ)備液?！　?.2.2測(cè)定波長(zhǎng)的選擇　　精密吸取齊墩果酸對(duì)照品溶液0.05ml及供試品溶液1ml于10ml具塞試管中，水浴揮干溶劑，精密加入新配制的5%香草醛－冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，加塞，搖勻，于60～65℃水浴中加熱15min，取出，流水冷卻至室溫后，精密加入醋酸乙酯5ml，搖勻，以相同試劑為空白，在450～900nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描。齊墩果酸對(duì)照

8、品在553nm處有最大吸收，樣品溶液在546nm處有最大吸收（見(jiàn)圖1），但在550nm處也有強(qiáng)吸收，故選擇550nm為測(cè)定波長(zhǎng)?！　?.2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密吸取齊墩果酸對(duì)照品溶液(mg/ml)0.05，0.10，0.20，0.30，0.40，0.50ml分別加入6支具塞試管中，即各試管