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《免疫磁珠法分離并鑒定前列腺癌類干細胞》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、免疫磁珠法分離并鑒定前列腺癌類干細胞[基金項目]教育部新教師基金項目（No.200804871051），湖北省衛(wèi)生廳青年人才基金（QJX2010－5）[第一作者]秦亮，電話：13476248595，E-mail:ql_198572@163.com（稿件相關(guān)事宜煩請與第一作者聯(lián)系）[通信作者]廖暉，E-mail:liaohui@tjh.tjmu.edu.cn秦亮，陳安民，郭風勁，卞峰，杜宇，姚斌，廖暉（430030湖北武漢，華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院附屬同濟醫(yī)院骨科）[摘要]目的利用免疫磁珠法分選并鑒定人前列腺癌類干細胞。方法利用免疫磁
2、珠法從人前列腺癌細胞株P(guān)C-3中分選出CD133+/CD44+細胞，通過免疫組化、流式細胞術(shù)、CCK8法、平板克隆形成實驗以及體外裸鼠移植瘤實驗鑒定其表面標志物表達情況及其腫瘤干細胞特性。結(jié)果經(jīng)免疫磁珠分選所得CD133+/CD44+細胞數(shù)比例為0.50%；免疫組化結(jié)果顯示其CD44/CD133/integinα2β1均呈高表達；流式細胞分析顯示其CD44/CD133雙陽性率達52.28%，其同時表達integinα2β1陽性的細胞比例為59.16%；其細胞增殖率和克隆形成率高于PC-3細胞；以低密度（1×103）皮下注射時，其裸
3、鼠體內(nèi)成瘤率明顯高于PC-3細胞。結(jié)論利用免疫磁珠分選法可以從人前列腺癌細胞株P(guān)C-3中高效的分選出具有腫瘤干細胞生物學(xué)特性的前列腺癌類干細胞。[關(guān)鍵詞]腫瘤干細胞；前列腺癌；免疫磁珠分選Theisolationandidentificationoftheprostatecancerstemcellsbymagneticactivecellsorting.QinLiang,ChenAn-min,GuoFengjing,BianFeng,DuYu,YaoBin,LiaoHui.(DepartmentofOrthopedics,Ton
4、gjiHospital,TongjiMedicalCollege,HuazhongUniversityofScienceandTechnology,Wuhan430030,China)[ABSTRACT]ObjectiveToisolate,cultureandidentifytheprostatecancerstemcells(CSCs)bymagneticactivecellsorting(MACS).MethodsCD133+/CD44+cellswereselectedfromPC-3humanprostaticcarci
5、nomacellslinesbyMACS,andtheywereidentifiedasprostatecancerstem-likecellsbyimmunohistochemistry,flow-cytometricanalysis,CCK8,colony-formingassayandtumorigenicityassayinvivo.ResultsCD133+/CD44+cellsselectedfromPC-3celllinesbyMACSshowedthattheproportionofCD133+/CD44+cell
6、swas52.28%,andtheproportionofinteginα2β1+cellswas59.16%byflow-cytometricanalysis;theselectedcells'proliferatingpotentialandclony-formingratewerehigherthanPC-3celllinesinvitro;andtheirtumorigenicityrateweresignificantlyhigherthanPC-3celllinesinvivowhenseededatalowdensi
7、ty(1×103).ConclusionMACSwasasimpleandeffectivemethodtogainprostaticcarcinomastemcellsfromPC-3humanprostaticcarcinomacelllines.[Keywords]Cancerstemcells;Prostatecancer;MagneticactivecellsortingCorrespondingauthor:LiaoHui,E-mail:liaohui@tjh.tjmu.edu.cn隨著前列腺癌發(fā)病率的逐年增高，且多以
8、骨轉(zhuǎn)移為首發(fā)癥狀，故有關(guān)前列腺癌骨轉(zhuǎn)移方面的研究成為近來國內(nèi)外研究的熱點。近年來有研究表明，惡性腫瘤可能起源于腫瘤干細胞（cancerstemcell,CSCs），具有自我更新、無限增殖、多向分化潛能等干細胞特性[1,2]。Ponti及Singh等
