金霉素降解菌株特性及代謝產(chǎn)物研究

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1、中圖分類號:UDC分類號:金霉素降解菌株特性及代謝產(chǎn)物研究作者姓名張惠艷學(xué)院名稱生命學(xué)院指導(dǎo)教師李艷菊副教授答辯委員會主席張建麗教授申請學(xué)位理學(xué)碩士學(xué)科專業(yè)生物學(xué)學(xué)位授予單位北京理工大學(xué)論文答辯日期2015年1月StudyofDegradationCharacteristicsofMicroorganismStrainsandMainDegradationproductsforChlortetracyclineCandidateName:HuiyanZhangSchoolorDepartment:SchoolofLifeScience

2、FacultyMentor:Assoc.Prof.YanjuLiChair,ThesisCommittee:Prof.JianliZhangDegreeApplied:MasterofScienceMajor:BiologyDegreeby:BeijingInstituteofTechnologyTheDateofDefence:January,2015研究成果聲明本人鄭重聲明:所提交的學(xué)位論文是我本人在指導(dǎo)教師的指導(dǎo)下進行的研究工作獲得的研究成果。盡我所知,文中除特別標(biāo)注和致謝的地方外,學(xué)位論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成

3、果,也不包含為獲得北京理工大學(xué)或其它教育機構(gòu)的學(xué)位或證書所使用過的材料。與我一同工作的合作者對此研究工作所做的任何貢獻均已在學(xué)位論文中作了明確的說明并表示了謝意。特此申明。簽名:日期:北京理工大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要金霉素屬于四環(huán)素類抗生素,廣泛應(yīng)用于畜禽疾病的預(yù)防和治療中。金霉素自然條件下降解較慢,在環(huán)境中易誘導(dǎo)耐藥菌的產(chǎn)生,對環(huán)境安全和人類健康構(gòu)成威脅。目前,金霉素殘留問題已引起了國內(nèi)外普遍關(guān)注。金霉素生物降解具有環(huán)保、低耗、高效等優(yōu)點,具有廣闊的市場發(fā)展前景,而目前國內(nèi)外對于生物降解方面研究報道很少。為此,本研究將選擇自主篩選的3株

4、降解金霉素菌株,對其降解特性以及金霉素生物降解產(chǎn)物等進行了研究,為金霉素的生物降解和金霉素廢棄物的處理提供科學(xué)依據(jù)。1、對金霉素測定方法進行研究,得到藥渣經(jīng)EDTA-Mcllvaine緩沖液輔助超生波提取后采用梯度洗脫,金霉素與其它物質(zhì)能夠完全分離。在1.0-1500.0mg/L濃度范圍內(nèi),金霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線R2為0.9991,檢出限為3.00ug/kg,加標(biāo)回收率介于94%-102%之間,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.02%-7.63%。2、菌株降解特性研究表明,菌株LJ245在100mgL的金霉素環(huán)境中生長和降解效率最優(yōu)。LJ302菌株在300m

5、g/L的金霉素中生長和降解效率最優(yōu)。菌株LJ245和LJ302在pH為6.00,溫度為28-30℃,碳、氮源分別為蔗糖和蛋白胨,麥芽糖和蛋白胨時,其生長最優(yōu)。菌株LJ245和LJ302選擇葡萄糖和氯化銨,甘油和硝酸鉀分別作為碳、氮源,金霉素降解率最高。蒼白桿菌SW-5耐受金霉素范圍為200-600mg/L,在pH為6.00,溫度為37℃,以葡萄糖和甘油作為碳源,KNO3等無機氮作為氮源時,菌株SW-5的生長最好。3、通過對不同水環(huán)境中金霉素及其同分異構(gòu)體間的變化特征研究發(fā)現(xiàn),在相同溫度條件下,pH在3.0-11.0范圍內(nèi),隨著pH值增

6、加,金霉素半衰期呈明顯縮短趨勢,酸性條件多轉(zhuǎn)為差向金霉素,堿性條件下多轉(zhuǎn)為異金霉素;在相同pH條件下,溫度在20℃-121℃范圍內(nèi),隨著溫度升高,金霉素半衰期呈現(xiàn)降低趨勢,金霉素同分異構(gòu)體變化呈總體下降趨勢。4、選擇大腸桿菌和藤黃微球菌作為指示菌,對金霉素、差向金霉素、異金霉素、四環(huán)素及差向四環(huán)素5種物質(zhì)的生物毒性比較研究顯示,金霉素、差向金霉素和四環(huán)素對大腸桿菌的毒性最大。金霉素對藤黃微球菌毒性最強,其次為差向金霉素和四環(huán)素,由此可知金霉素與其同分異構(gòu)體對微生物的毒性不同。I北京理工大學(xué)碩士學(xué)位論文5、生物降解藥渣中金霉素生成脫氯脫

7、水金霉素(m/z=427)、脫氯脫水脫甲基脫二甲胺金霉素(m/z=369)同時得到m/z=274的物質(zhì),推測為一種開環(huán)物質(zhì)。關(guān)鍵詞:金霉素;生物降解;特性;降解產(chǎn)物;高效液相色譜;藥渣II北京理工大學(xué)碩士學(xué)位論文AbstractChlortetracycline(CTC),belongingtotetracycline(TC)antibiotic,waswidelyusedinthepreventionandtreatmentofdiseasesoflivestockandpoultry.DuetoSlowdegradation,CT

8、Ceasilyinduceddrugresistancebacteriaintheenvironment,sotheCTCresidueproblemhasalreadycausedwidespreadconcerns.

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