基于卟啉的新型電致化學發(fā)光生物傳感器及其核酸蛋白分析應用研究

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1、分類號密級ＵＤＣＥ＾之乂務；類｜糸寺建’ＭＡＮＪＩＮＧＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＳＣＩＥＮＣＥ＆ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ碩去學位論文基于叩琳的新型電致化學發(fā)光生物傳感器及其核酸蛋白分析應用研究（題名和副題名）季旭波作者姓名（）指＃名鄧盛元期教授學位類別工學巧去學科名稱生統(tǒng)工研究方向生斯傳惠、孩致分折、蛋白質分析■滄巧較如間２０１６年３月注１：注明《國際十進分類法ＵＤＣ》的類號。碩±學位論文基于ＢＮ林的新型電致化學發(fā)光生物傳感器及其核酸蜜白分析

2、應用研究作者：季旭波指導教師：鄧盛元副教授南京理工大學２０１６年０３月ＭａｓｔｅｒＤｅｒｅｅＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎｇｈｒ－ＲｅｓｅａｒｃｈｏｎＮｏｖｅｌＰｏｒｉｎＢａｓｅｄｐｙＥｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔＢｉｏｓｅｎｓｏｒｓａｎｄＡｌｉｃａｔｉｏｎｓｉｎＤＮＡ＆ＰｒｏｔｅｉｎＡｓｓａｙｐｐＢｙＸｕｂｏＪｉＳｕｅｒｖｉｓｅｄｂＡｓｓｏｃｉａｔｅＰｒｏｅｓｓｏｒＳｈｅｎｕａｎＤｅｎｐｙｆｇｙｇＮａｎｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｏｆＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｔ

3、ｅｃｈｎｏｌｏｊｇｙｇｙＭａｒｃｈ２０１６，聲明本學位論文是我在導師的指導下取得的研巧成果，盡我所知，在本學位論文中，除了加Ｗ標注和致謝的部分外，不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或公布過的研究成果，也不包含我為獲得任何教育機構的學位或學歷而使用過的一材料。與我同工作的同事對本學位論文做出的貢獻均己在論文中作了明確的說明。研巧生簽名；季化瓜；ｗ俾巧《日學位論文使用授權聲明南京理工大學有權保存本學位論文的電子和紙質文檔，可?。藿栝喕蛏希崳娋W(wǎng)公布本學位論文的部分或全部內(nèi)容，可［＾向有關部口或機構送交并授權其保存。、

4、借閱或上網(wǎng)公布本學位論文的部分或全部內(nèi)容對于保密論文，按保密的有關規(guī)定和程序處理。研究生簽名；畫加心＞乂年＾月／名日基于？碩±學位論文ｎ［啡的新型電致化學發(fā)光生物傳感器及其核酸蛋白分析應用研究摘要電致化學發(fā)光（ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅＥＣＬ技術具有較好的可控性、選擇性、重，）現(xiàn)性及較高的檢測靈敏度，主要應用于臨床、農(nóng)業(yè)、環(huán)境和生物檢測等領域。核酸是遺傳信息的攜帶者，在生命發(fā)展過程中具有重要意義。核酸適配體是能夠特異性結合某些小分子或蛋白的具有特殊結構的核酸。核酸適配體在參與構建生物傳感體

5、系用于檢測某些特定蛋白或小分子的過程中發(fā)揮著重要的作用。撲晰（ｐｏｒｐｈｙｒｉｎ及金屬）化嘟恤ｅｔａｌｌｏｐｏｒｐｈｙｒｉｎ）因具有高度共觀的雜環(huán)結構而具備良好的光電效應、電子傳輸和分離能力及電致化學發(fā)光活性。本論文主要研究基于撲嘟的電致化學發(fā)光生物傳感器并研究其在核酸、蛋白質檢測方面的應用。一１．基于＊牌超分子納米團簇電致化學發(fā)光的種通用的ＤＮＡ傳感巧略本實驗ＷＨ７Ｎ９病毒Ｈ７亞型的引物序列為檢測對象，用自行設計的發(fā)卡結構ＤＮＡ持異性捕獲目標ＤＮＡ，發(fā)卡結構打開后暴露的末端修飾基團為傳感體系構建提供可能。根據(jù)金屬

6、臥嘛可參與軸向配位的特點，利用富勒帰苯胺瞇嗤復合物富集ＺｎＴＰＰ合成了一－ＺｎＴＰＰ復合物種臥琳超分子納米團簇Ｃｅｏ，并作為電致化學發(fā)光的信號分子。我們利用環(huán)糊精分子的中空桶狀結構及其常作為物質包絡主體的特性，將電致化學發(fā)光體組裝并固定在ｃＤＮＡ末端，構建了基于電致化學發(fā)光的通用ＤＮＡ傳感策略。經(jīng)電致化學發(fā)光分析檢測，本實驗發(fā)現(xiàn)，構建的電致化學發(fā)光生物傳感體系能夠很好地檢測到目標ＤＮＡ，檢測下限可達ｌ．ＯｐＭ。該體系使用通用、簡易的信號標記、放大手段和ＤＮＡ檢測策略，對核酸的靈敏度髙、重現(xiàn)性好、檢測下限低、線性范圍寬、穩(wěn)定性

7、良好，具有廣闊的應用前景。２．Ｗ洛菌巧和血紅素共觸發(fā)的適配體功能化量子點的特異性電致化學發(fā)光檢測平臺一本工作基于血紅素／Ｇ四鏈體復合物設計并構建了種窩效快速的電致化學發(fā)光平臺用于檢測溶茜酶蛋白。利用吸附在殼聚糖上的納米金來固定末端為琉基的發(fā)卡結構核酸適配體，該發(fā)卡結構ＤＮＡ由溶菌酶適配體和Ｇ四鏈體序列組成。在血紅素和溶菌酶同時存在的情況下－，發(fā)卡結構可打開并生成血紅素／Ｇ四鏈體和溶菌酶適配體復合物，前者可通過消耗電致化學發(fā)光內(nèi)源性共反應劑〇２巧滅量子點ＥＣＬ效應。送種電致化學ｉ２０ｍｌ／￣ｍＡ發(fā)光檢測策略顯示出

8、了較好的線性響應區(qū)間，且檢測范圍可達ｐｇ５帖ｌ關鍵詞：電致化學發(fā)光，生物傳愈Ｇ四鏈體，核酸適配體，撲嘛，量子點ＩＡ