一株降膽固醇乳酸菌的篩選及其降解條件的研究

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1、生物工程糧油食品科技第22卷2014年第2期一株降膽固醇乳酸菌的篩選及其降解條件的研究田亞紅,王麗萍,徐傳遠(河北聯(lián)合大學生命科學學院,河北唐山063000)摘要:從酸奶中篩選得到高效降解膽固醇的乳酸菌株La-3,并對其膽固醇降解能力進行研究。通過單因素和正交實驗,得到膽固醇降解最佳條件為培養(yǎng)時間72h、膽固醇濃度1.5mg/mL、接種量4%,膽固醇降解率達到51.2%。關鍵詞:乳酸菌;膽固醇;篩選;降解中圖分類號:Q93-335文獻標識碼:A文章編號:1007-7561(2014)02-0104-03Screenofastrain

2、ofcholesterol-degradinglactobacillusanditsdegradationconditionsTIANYa-h(huán)ong,WANGLi-ping,XUChuan-yuan(CollegeofLifeScience,HebeiUnitedUniversity,TangshanHebei063000)Abstract:Astrainofefficientcholesterol-degradinglactobacillusLa-3wasscreenedfromyoghourt,anditscholesterol

3、-degradingabilitywasstudied.Theoptimumconditionfordegradationofcholesterolwereobtainedbysinglefactorandorthogonaltest,thatwas,culturefor72h,cholesterolconcentration1.5mg/mL,inoculumsize4%,andthecholesterol-degradationratewas51.2%.Keywords:lactobacillus;cholesterol;scre

4、en;degradation隨著人們生活水平的不斷提高,人們的膳食1.2培養(yǎng)基營養(yǎng)也日益增加,但隨之而來的負面影響卻是動1.2.1MRS液體培養(yǎng)基脈粥樣硬化、冠心病、高血壓等心腦血管疾病的發(fā)葡萄糖20g,酵母浸膏5g,牛肉浸膏5g,蛋白[1-2]病率不斷提高。這些疾病已經嚴重威脅到人胨10g,乙酸鈉5g,檸檬酸三銨2.0g,磷酸氫二鉀類的健康,血清中高膽固醇含量是引起眾多心血2.0mL,吐溫801mL,MnSO4·H2O0.25g,MgSO4·管疾病的重要因素之一,而食物膽固醇與血液中7H2O0.6g,水1000mL。膽固醇含量成正

5、相關,因此降低食品和人體血清1.2.2MRS固體培養(yǎng)基中的膽固醇含量是目前科學研究工作的熱點之1000mLMRS液體培養(yǎng)基中加入碳酸鈣5g、一。大量臨床實驗表明,服用乳酸菌及其制品具瓊脂10g。有減少人體血清膽固醇含量、降低心腦血管發(fā)?。?]1.2.3高膽固醇培養(yǎng)基(MRS-CHOL)[3-7]率的功效。1000mLMRS液體培養(yǎng)基,膽固醇1.0g;超聲本文旨在從食用酸奶中篩選乳酸菌,并在不同培波細胞粉碎機500W振蕩乳化20min,調pH至7.0。養(yǎng)條件下對其進行膽固醇降解特性的研究,從而篩選1.3主要儀器出安全的、具有較強降解膽

6、固醇能力的乳酸菌株,為恒溫搖床(HQ45):中科院武漢科學儀器廠;高開發(fā)具有降低膽固醇功能的發(fā)酵食品提供一定的理速離心機(LG15-W):北京醫(yī)用離心機廠;電熱恒論依據。溫培養(yǎng)箱(DNP-9082):上海精宏實驗設備有限公1材料與方法司;722N可見分光光度計:上海光譜儀器有限公司;1.1乳酸菌超聲波細胞粉碎機(L96-IIL):上海皓莊儀器有限從市售盒裝酸奶中分離得到。公司。1.4方法1.4.1菌株的篩選收稿日期:2013-07-29作者簡介:田亞紅,1979年出生,女,河北無極人,講師.將少量酸奶按梯度稀釋分離法涂布于MRS固1

7、04糧油食品科技第22卷2014年第2期生物工程體培養(yǎng)基平板中,37℃恒溫培養(yǎng)72h,,挑取融鈣圈直徑最大的菌落La-3株,反復純化至純種,觀察并記錄其菌落形態(tài),經革蘭氏染色和鏡檢后,觀察其菌[9]體形態(tài)。1.4.2膽固醇降解率的測定膽固醇標準曲線的繪制:硫酸鐵銨顯色劑分光[10]光度法。[11-12]發(fā)酵液總膽固醇的測定:取培養(yǎng)液0.2mL,加入無水乙醇4.8mL,靜置10min,3000r/min離心5min。準確稱取上清液2mL,加入2mL硫酸圖2培養(yǎng)時間對菌株降解膽固醇的影響2.3.2膽固醇濃度對菌株降解膽固醇的影響鐵銨顯色

8、劑溶液,同時做空白對照,在波長560nm將篩選到的乳酸菌株La-3分別接種到膽固醇處測定吸光度。按測得的值,從標準曲線查得相應濃度為0.5mg/mL、1.0mg/mL、1.5mg/mL、2.0的膽固醇含量。以膽固醇降解率表示菌株對膽固

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