實(shí)驗(yàn)二福醫(yī)大紅細(xì)胞計(jì)數(shù)

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1、實(shí)驗(yàn)二改良牛鮑計(jì)數(shù)板使用、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)目的要求：1.掌握改良牛鮑計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)和使用方法2.掌握手工顯微鏡紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法。（一）改良牛鮑氏計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)和使用方法臨指導(dǎo)P71.改良牛鮑氏計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)（見圖）2.改良牛鮑氏計(jì)數(shù)板的使用方法1)準(zhǔn)備計(jì)數(shù)板：用綢布擦拭，“推壓”法加蓋玻片2)稀釋的血液：準(zhǔn)確吸取稀釋液和血液，立即混勻。3)充池：充池前充分混勻稀釋液，充池要一次性完成，充液不能過多、過少、有氣泡、斷續(xù)充液、充池后移動(dòng)蓋玻片。4)靜置2-3min，待細(xì)胞下沉。5)顯微鏡計(jì)數(shù)：小心移動(dòng)；手和顯微鏡鏡頭不能碰到蓋玻片。6

2、)計(jì)數(shù)原則：逐格計(jì)數(shù)；按一定方向進(jìn)行計(jì)數(shù)；對(duì)壓線細(xì)胞遵循“數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右”的原則。（一）改良牛鮑氏計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)和使用方法1.保證所用器材清潔，勿用手觸膜。2.)充池：充池前充分混勻稀釋液，一次性完成，充液不能過多、過少、有氣泡、斷續(xù)充液。3.充池后移動(dòng)蓋玻片。4.計(jì)數(shù)池使用后用蒸餾水沖，紗布輕試，切不可用粗糙織物擦試，以免磨損刻度。3.改良牛鮑氏計(jì)數(shù)板使用注意事項(xiàng)（二）紅細(xì)胞計(jì)數(shù)P141．原理用紅細(xì)胞等滲稀釋液(2.0ml)將血液(10μl)稀釋一定倍數(shù)，滴入計(jì)數(shù)池，于高倍鏡下計(jì)數(shù)一定范圍內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)，再換算成

3、每升血液中的紅細(xì)胞數(shù)。2.紅細(xì)胞稀釋液（1）Hayem（赫姆氏液）即傳統(tǒng)的紅細(xì)胞稀釋液▲成分及作用：氯化鈉：調(diào)節(jié)滲透壓至等滲硫酸鈉：提高比密，防止細(xì)胞粘連氯化高汞：防腐劑▲缺點(diǎn)：遇高球蛋白血癥患者，球蛋白沉淀使紅細(xì)胞容易凝結(jié)。（二）紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（二）紅細(xì)胞計(jì)數(shù)--2.紅細(xì)胞稀釋液（2）甲醛枸櫞酸鹽▲成分及作用：枸櫞酸鈉：抗凝、保持等滲甲醛：防腐、固定紅細(xì)胞▲優(yōu)點(diǎn)：配制簡單、紅細(xì)胞不凝集，可保持紅細(xì)胞正常的圓盤狀數(shù)小時(shí)，目前應(yīng)用廣泛。(3)不含甲醛的枸櫞酸鹽：▲成分及作用：31.3g/L的枸櫞酸鈉?！鴥?yōu)點(diǎn)：遇自身凝集素增高

4、者，可使凝集的紅細(xì)胞分散并照常計(jì)數(shù)。（4）急診時(shí)可用生理鹽水或含1%甲醛的生理鹽水作為紅細(xì)胞稀釋液。（二）紅細(xì)胞計(jì)數(shù)--2.紅細(xì)胞稀釋液3.操作步驟（1）準(zhǔn)備稀釋液：加紅細(xì)胞稀釋液(赫姆氏液)2.0ml于試管中。（2）采血：10μl至稀釋液中，立即混勻。（3）準(zhǔn)備計(jì)數(shù)板、混勻稀釋液、充池、靜置2-3min。（4）顯微鏡計(jì)數(shù)：高倍鏡下計(jì)數(shù)中間大方格內(nèi)四角及中央的5個(gè)中方格內(nèi)的紅細(xì)胞總數(shù)。（二）紅細(xì)胞計(jì)數(shù)4．計(jì)算紅細(xì)胞數(shù)/L=N×25/5×10×106×200=N×1010=N/100×1012參考值：成年男性：4.0—5

5、.5*1012/L；成年女性：3.5—5.0*1012/L；初生兒:6.0—7.0*1012/L（二）紅細(xì)胞計(jì)數(shù)5．注意事項(xiàng)：（1）同白細(xì)胞計(jì)數(shù)（2）紅細(xì)胞在計(jì)數(shù)池中若分布不均，每個(gè)中方格之間相差超過20個(gè)以上時(shí)要重新充池計(jì)數(shù)。正常數(shù)值范圍內(nèi)，2次紅細(xì)胞計(jì)數(shù)相差不得超過5%。（二）紅細(xì)胞計(jì)數(shù)