EGCG對人乳腺癌MDA-MB-435細胞株細胞增殖的抑制及機制.pdf

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1、《中國癌癥雜志》2004年第14卷第1期CHINAONCOLOGY2004Vol.14No.19EGCG對人乳腺癌MDA-MB-435細胞株細胞增殖的抑制及機制*李鶴成,陸勁松,侯意楓,邵志敏,沈鎮(zhèn)宙(復旦大學附屬腫瘤醫(yī)院乳腺外科,上海200032)[摘要]目的:研究綠茶提取物表沒食子兒茶素-3-沒食子酸酯(epigallocatechin-3gallste,EGCG)對人乳腺癌細胞株細胞周期的影響及機制。方法:利用細胞增殖測定試劑盒(CellProliferationAssaykit)來制作細胞生長曲線;流式細胞儀分析EGCG作用于人乳腺癌MDA-MB-435細胞株

2、前后細胞周期的變化;RT-PCR及Western印跡法研waf1/cip1究腫瘤細胞株加藥干預前后細胞周期抑制因子p21的mRNA及蛋白表達的變化。結(jié)果:EGCG可明顯抑制乳腺癌細胞MDA-MB-435細胞的增殖活性,40μg/mlEGCG干預后,MDA-MB435細胞主要阻滯于G0/G1期,在24小時阻滯最為明顯。在48及72小時也有阻滯。對照組G0/G1期的比例49.92%,40μg/mlEGCG干預24、48及72小時后G0/G1期的比例分別為71.56%、67.20%和61.59%。EGCG40μg/ml處理腫瘤細胞株細胞后24小時可檢測p21mRNA和蛋白表

3、達提高。結(jié)論:綠茶有效成分可抑制乳腺癌細胞的增殖,這可能與其誘導p21表達從而抑制細胞周期的時相轉(zhuǎn)換有關(guān),這表明綠茶可能在乳腺癌的治療上具有一定的前景。[關(guān)鍵詞]表沒食子兒茶素-3-沒食子酸;細胞周期;乳腺癌;p21;培養(yǎng)的腫瘤細胞+中圖分類號:R73-361文獻標識碼:A文章編號:1007-3639(2004)01-0009-03Inhibitioneffectsofepigallocatechin-3-gallste(EGCG)oncellcycleofhumanbreastcancercellsMDA-MB-435anditsmechanismLIHe-chen

4、g,LUJing-song,HOUYi-feng,etal(DepartmentofBreastSurgery,CancerHospital,FudanUniversity,Shanghai200032,China)[Abstract]Purpose:TostudytheeffectofEGCG(extractsfromgreentea)oncellcycleinhumanbreastcancercelllineanditsmechanism.Methods:Cellproliferationassaykitwasusedtoproducethedose-respon

5、securve.FlowcytometricassaywasusedtoevaluatethecellcyclechangesonMDA-MB435cellswithandwithoutEGCG.TheexpressionofproteinwasdetectedbyWesternblot.Results:EGCGcouldinhibittheproliferationofthebreastcancercellsMDA-MB-435,40waf1/cip1μg/mlEGCGinducedG0/G1phasearrestandtheentrancetoSphase.Bot

6、hmRNAandproteinlevelofp21wereupregulatedinMDA-MB435cellswhentreatedby40μg/mlEGCG.Conclusions:Greenteacaninhibitthegrowthofhumanbreastcancercells,perhapsbymeansofp21andthereforeinhibitingtheprogressionofthecellcycle.[Keywords]EGCG;cellcycle;breastcancer;p21;cuturedtumorcellsWAF1/Cip1綠茶是人

7、類最常飲用的健康飲料之一,為探討(EGCG)購自Sigma公司。P21多克隆抗體綠茶對乳腺癌細胞的作用及其可能機制,我們研究購于美國SantaCruz公司。了綠茶主要成分表沒食子兒茶素-3-沒食子酸酯二細胞培養(yǎng)人乳腺癌細胞株MDA-MB435(EGCG)對人乳腺癌細胞株MDA-MB-435細胞的購自ATCC公司,采用DMEM培養(yǎng)基(含5%小牛增殖的影響及其與細胞周期時相及細胞周期蛋白依血清,100U/ml青霉素,100μg/ml鏈霉素),在waf1/cip1賴型激酶抑制劑p21表達的關(guān)系。37℃5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)進行培養(yǎng)。三增殖曲線繪制利用細胞增殖測

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