利膽湯對大鼠利膽作用實(shí)驗(yàn)探究

利膽湯對大鼠利膽作用實(shí)驗(yàn)探究

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1、利膽湯對大鼠利膽作用實(shí)驗(yàn)探究  [摘要]目的觀察利膽湯對Wistar大鼠的利膽作用。方法Wistar大鼠50只,每組10只,隨機(jī)分為0.9%氯化鈉組、膽寧片組[0.54g/(kg·d)]、利膽湯低劑量組[6g/(kg·d)]、中劑量組[12g/(kg·d)]、高劑量組[24g/(kg·d)]。各組均采用灌胃給藥3d后,測量膽總管引流后1、2、3、4h各組的膽汁量,檢測膽汁中總膽汁酸、總膽固醇和總膽紅素的含量。結(jié)果利膽湯三個劑量組在不同時間段上的膽汁流量均比0.9%氯化鈉組明顯增加(P0.05)。結(jié)論利膽湯三個劑量組對Wistar大鼠都有明顯

2、的利膽作用,明顯增加膽汁中膽汁酸含量,降低膽固醇和膽紅素的含量,以高劑量組作用最為明顯,但三個劑量組間膽汁成分含量差異不明顯。[關(guān)鍵詞]利膽湯;利膽作用;總膽汁酸;總膽固醇;總膽紅素[中圖分類號]R285.5[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A[文章編號]1673-7210(2013)12(b)-0021-03膽結(jié)石是膽囊結(jié)石、膽總管結(jié)石、肝內(nèi)膽管結(jié)石的總稱,是外科臨床上的常見病、多發(fā)病,其發(fā)病率有逐年上升的趨勢。目前西醫(yī)治療多采用手術(shù)方法,但由于手術(shù)存在風(fēng)險和并發(fā)癥,8多數(shù)患者不愿接受或不能耐受手術(shù)治療,而西藥保守治療的副作用較大且價格貴。近年來,中藥治療膽

3、石癥取得較好的療效,具有副作用小、價格低廉等優(yōu)點(diǎn)。利膽湯是北京中醫(yī)藥大學(xué)附屬北京市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院臨床治療膽石癥的有效驗(yàn)方,經(jīng)多年臨床觀察證實(shí),對肝膽氣滯型和肝膽濕熱型膽囊結(jié)石均有較好的臨床療效[1]。本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步觀察利膽湯對Wistar大鼠的膽汁分泌量及膽汁中總膽汁酸(TBA)、總膽固醇(TC)和總膽紅素(TB)含量的影響,探討利膽湯的利膽作用,從轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)角度為臨床應(yīng)用利膽湯治療膽囊炎、膽石癥提供理論依據(jù)。1儀器與試藥1.1動物選用雄性Wistar大鼠50只,SPF級,體重(260±20)g,由維通利華實(shí)驗(yàn)動物中心提供。1.2試劑和藥品利膽

4、湯(組方:柴胡10g,茵陳10g,枳實(shí)10g,木香10g,金錢草10g,白芍15g,炙甘草10g,厚樸10g,大黃6g,烏藥10g,川芎10g)濃煎至生藥含量1.2、2.4、4.8g/mL,4℃保存?zhèn)溆?,以上中藥濃煎劑均由北京市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院藥劑科提供;膽寧片(規(guī)格:100#×0.368g)批號:20120618,由上海和黃藥業(yè)有限公司生產(chǎn);TBA試劑盒,批號:20110822;TB試劑盒,批號:20110822;TC試劑盒,批號:20110822,均由上海華氏亞太生物制藥有限公司提供。1.3儀器日立7180全自動生化分析儀。2方法與結(jié)果2

5、.1造模與給藥取Wistar大鼠50只,隨機(jī)分成5組,即0.9%氯化鈉組、膽寧片組[0.54g/(kg·d)]、利膽湯低劑量組[6g/(kg·d)]、中劑量組[12g/(kg·d)]、高劑量組[24g/(kg·d)],每組各10只。各組均采用灌胃給藥3d后,實(shí)驗(yàn)前12h禁食。實(shí)驗(yàn)時,大鼠用10%水合氯醛4mL/kg腹腔注射麻醉后,仰臥固定于動物手術(shù)板上,于上腹部正中約3cm切口,打開腹腔,在十二指腸降部腸系膜中找到白色透明韌性膽管,先分離出十二指腸乳頭端的膽管約2cm,再向肝臟方向插入直徑0.7mm密閉式靜脈留置針,結(jié)扎固定密閉式靜脈留置針

6、,拔出針芯,可見針管內(nèi)有淡黃色膽汁流出,用1.0mL離心管收集膽汁。待手術(shù)大鼠模型穩(wěn)定20min后,開始收集膽汁,每1小時收集1次,共收集4h,并記錄流量。2.2觀察指標(biāo)及測定2.2.1膽汁分泌量各組分別于0~1h、>1~2h,>2~3h,>3~4h共4個時間段收集膽汁,用注射器吸出全部膽汁,計量體積[5]。82.2.2膽汁生化測定采用化學(xué)氧化法測定膽汁中TB;采用酶比色法測定TC含量;采用酶循環(huán)法測定TBA含量。2.3統(tǒng)計學(xué)方法采用統(tǒng)計軟件SPSS17.0對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,計量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,組間比較用單因素方差分

7、析,采用t檢驗(yàn)。以P0.05)。表明利膽湯能增加膽汁中膽汁酸的含量,降低膽汁中膽固醇及膽紅素的含量。見表2。3討論膽結(jié)石主要包括膽固醇結(jié)石和膽色素結(jié)石,其形成機(jī)制與膽汁成分的變化密切相關(guān)[6]。結(jié)石的形成包括膽汁成分的析出、沉淀、成核及積聚增長等基本過程。膽固醇結(jié)石的主要成分為膽固醇、膽汁酸和卵磷脂等,其形成機(jī)制為:①膽汁中的膽固醇過飽和;②膽固醇在膽汁中成核呈結(jié)晶狀沉淀;③結(jié)晶體聚集和融合,8遍布于膽囊壁的黏液、凝膠里,導(dǎo)致膽囊排空受損從而有利于膽固醇結(jié)石形成。總的來說,各種原因?qū)е履懼煞指淖?,是形成膽固醇結(jié)石的根本原因,膽固醇過飽和是

8、膽固醇結(jié)石的必要條件。膽色素結(jié)石的主要成分為膽紅素、少量鈣鹽和有機(jī)物(細(xì)菌、蟲卵或上皮細(xì)胞)等,其形成機(jī)制,大多數(shù)人認(rèn)為是由于膽汁中不溶性膽紅素含量增加,鈣鹽過飽和,二者沉淀積聚

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