大鼠局灶性腦缺血腦組織的比較蛋白質(zhì)組學研究

大鼠局灶性腦缺血腦組織的比較蛋白質(zhì)組學研究

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1、大鼠局灶性腦缺血腦組織的比較蛋白質(zhì)組學研究王繼生1,邱宗蔭**綿陽市科委資助課題(編號:06S042-7)作者簡介:王繼生(1974~),男,藥理學博士,研究方向:新藥開發(fā)的藥理學研究及蛋白質(zhì)組學,Email:wjs327@sina.com2,夏永鵬2,李惠芝2(1綿陽市第三人民醫(yī)院綿陽621000;2重慶醫(yī)科大學藥學院重慶400016)[摘要]目的建立局灶性腦缺血模型,從蛋白質(zhì)整體水平探討腦缺血/再灌注的保護作用機制。方法雄性、健康大鼠SD,隨機分為正常組、腦缺血模型組參照Koizumi法并加以改進,建立MCAO大鼠腦缺血2h再灌注24h的

2、模型;裂解液提取總蛋白質(zhì),以雙向電泳技術進行蛋白質(zhì)分離,考馬斯亮藍染色,獲得雙向電泳圖譜,利用專門的軟件篩選出差異蛋白質(zhì),用MALDI-TOF-MS獲得肽指紋圖譜,MS-Fit數(shù)據(jù)庫進行搜索,獲得有關的蛋白質(zhì)信息。結果:局灶性腦缺血模型組與正常組腦組織的比較蛋白質(zhì)組學研究。與模型組比較,從正常組篩選到23個差異表達蛋白斑點,其中13個低表達,10個高表達,鑒定其中6個蛋白質(zhì),發(fā)現(xiàn)白細胞三烯A-4水解酶、促甲狀腺激素釋放激素降解胞外酶等與腦缺血相關的蛋白質(zhì)。結論:從蛋白質(zhì)組學角度發(fā)現(xiàn)了一些與腦缺血相關的蛋白,有助于今后進一步研究腦缺血性損傷的保

3、護機制。[關鍵詞]腦缺血蛋白質(zhì)組學ACOMPARATIVEPROTEOMESTUDYONFOCALCEREBRALISCHEMICTISSUEOFRATBRAINWangJi-Sheng1,QiuZong-Yin2,XiaYong-Peng2,LiHui-Zhi2(1.Thethirdhospitalofmianyang,mianyang621000;2DepartmentofPharmacy,ChongQingUniversityofMedicalScience.ChongQing400016)[ABSTRACT]Objective:Toe

4、stablishamodeloffocalcerebralischemictissueofratbrainandexploretheprotectivemechanismoffocalcerebralischemiareperfusioninwholelevelofproteins.Method:MaleandhealthySDrats,wereclassifiedthemintonormal,Modelatrandom.EstablishedtheMCAOmodelwithsuturemethodbyreperfusion24hafteri

5、schemic2haccordingtoKoizumi,smethod,extractedtotalproteinswithLysisbuffer,separatedproteinsbytwo-dimensionalelectrophoresis(2-DE),stainedproteinsbyCoomassiebrilliantblue,gotthepatterns,foundoutdifferentialproteins,andobtainedPMSbyMALDI-TOF-MS,gainedrelatedtheinformationofpr

6、oteinsbyMS-Fitdatabase.Result:.Acomparativeproteomestudyofmodelandnormalgroup.Comparedwithmodelgroup,thenormalgroupgained23differentialproteinspots,13spotsexpressedlowly,and10spotshigh,identified6proteinspots,foundouttherelativecerebralischemicproteinssuchasLeukotrieneA-4hy

7、drolase,Thyrotropin-releasinghormone-degradingectoenzymeetc.Conclusion:Establishinga2-DEtechnologywasappliedtoproteinanalysisofbraintissue,andfoundouttherelativeproteinsoffromproteomeaspect.Thiswouldprofitfromtheprotectivemechanismofcerebralischemictissue.[KEYWORDS]:cerebra

8、lischemic;Proteomics;腦血管病是危害人類生命與健康的常見病和多發(fā)病,以其高發(fā)病率、高復發(fā)率、高致殘率、高死亡率嚴重危害人類的健康。腦血管病中尤以

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