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1、參芪注射液對(duì)H22荷瘤小鼠抑瘤作用的細(xì)胞免疫機(jī)制論文梅龍,董曉慧,段剛,茍偉【摘要】目的研究參芪注射液的體內(nèi)抑瘤效應(yīng)與荷瘤機(jī)體細(xì)胞免疫功能的關(guān)系,探討其抑瘤作用的細(xì)胞免疫學(xué)機(jī)制。方法建立小鼠H22肝癌實(shí)體瘤模型,分別給予高、中、低劑量參芪注射液,測(cè)定各組小鼠腫瘤生長(zhǎng)抑制率(IR)和腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù);采用MTT法測(cè)定各組小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖指數(shù);ELISA法檢測(cè)各組小鼠血清中白細(xì)胞介素2(IL2)和γ干擾素(IFNγ)水平。結(jié)果高、中劑量參芪注射液實(shí)驗(yàn)組小鼠H22實(shí)體瘤IR分別為60.72%和48.65%,與模型組比較有顯著性差異(P0.05);參芪注射液實(shí)驗(yàn)組小鼠脾臟淋巴細(xì)胞增值
2、指數(shù)、腹腔巨嗜細(xì)胞吞噬指數(shù)、血清IL2和IFNγ的含量都顯著高于模型組小鼠(P0.05)。結(jié)論參芪注射液通過提高荷瘤小鼠的細(xì)胞免疫功能,改善荷瘤小鼠的抗腫瘤免疫狀態(tài).freelmunemechanismofantitumorefficacyofShenqiinjectioninH22tumorbearingmiceABSTRACT:ObjectiveToinvestigatetherelationshipbetorefficacyofShenqiinjectionanditseffectonimmunologicfunctioninH22tumorbearingmodelmice,
3、andexplorethecellularimmunologicmechanismofShenqiinjectionininhibitingtumorgroorbearingmodelmiceintreatmentgroups.ThetumorgroacrophagephocytesstimulatedbyConAinvitroseparatedfromH22tumorbearingmice.MurineserumIL2andIFNγeansofELISAassay.ResultsIRentgroupsparedodelmice(60.72%,48.65%,P0.05).Thespl
4、eenlymphocytestimulationindex,theindexofphagocytosis,andthelevelofserumIL2andIFNγentgroupsparedodelgroups(P0.05).ConclusionShenqiinjectionmaydirectlykillthetumorcellsbyincreasingthecellularimmunologicfunctionorimprovingtheantitumorimmunologicfunctionintumorbearingmice.KEYTT),瑞士Fluka公司;刀豆蛋白(ConA
5、),美國(guó)Sigma公司;DJ5031酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀,華東電子集團(tuán)醫(yī)療裝備有限責(zé)任公司。1.3方法1.3.1動(dòng)物分組、造模、給藥將ICR小鼠隨機(jī)平均分為5組:H22肝癌實(shí)體瘤模型組,高、中、低劑量SQI實(shí)驗(yàn)組和正常對(duì)照組,每組10只小鼠,雌雄各半。模型組和3個(gè)SQI實(shí)驗(yàn)組小鼠腋下接種H22肝癌實(shí)體瘤細(xì)胞懸液(2×107/mL)0.2mL。24h后,高、中、低劑量SQI實(shí)驗(yàn)組小鼠分別腹腔注射給予參芪注射液12、6、3g生藥/kg。模型組和正常對(duì)照組小鼠腹腔給予氯化鈉注射液0.2mL。連續(xù)給藥10d。1.3.2抑瘤率的測(cè)定給藥10d后處死小鼠,剝瘤稱量,計(jì)算各組腫瘤生長(zhǎng)抑制率(抑瘤率,IR)。IR
6、=(模型組平均瘤重量實(shí)驗(yàn)組平均瘤重量)/模型組平均瘤重量×100%1.3.3腹腔巨噬細(xì)胞功能的測(cè)定小鼠分組、造模及給藥方法同上。給藥10d后,測(cè)定各組小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬百分率和吞噬指數(shù)1。1.3.4脾臟淋巴細(xì)胞增殖指數(shù)小鼠分組、造模及給藥方法同上。給藥10d后斷頸處死小鼠,摘取脾臟,MTT法測(cè)定各組小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化指數(shù)2。1.3.5血清IL2和IFNγ的含量測(cè)定小鼠分組、造模及給藥方法同上。給藥10d后,采血分離血清,嚴(yán)格按試劑盒說明書測(cè)定各組小鼠血清IL2和IFNγ的含量。1.3.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理使用SPSS10.0版統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,計(jì)量資料用±s表示,組間比較采用方差分析
7、(One.武漢:湖北科技出版社,2002:2935.2巴德年.當(dāng)代免疫學(xué)技術(shù)與應(yīng)用M.北京:北京醫(yī)科大學(xué)/中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社,1998:303315.3司履生.腫瘤免疫研究的回顧與展望J.西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2005,26(2):97100.4BassePH,.freelanRB.CancerimmunotherapyoreffectofADV/RSVHSVtk/ACVtherap