外源糖對蘋果果實山梨醇代謝相關(guān)酶活性的影響

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1、外源糖對蘋果果實山梨醇代謝相關(guān)酶活性的影響  摘要:以新紅星蘋果為試材,采用果實圓片孵育體系研究了外源糖對SDH和SOX活性的影響。結(jié)果表明:在整個發(fā)育過程中,蘋果果實的SDH活性與葡萄糖、果糖和蔗糖含量間不存在顯著的相關(guān)性;而SOX活性與葡萄糖和果糖含量間存在極顯著的相關(guān)性。外源山梨醇和蔗糖均可提高發(fā)育前期和發(fā)育后期蘋果果實的SDH和SOX活性,其中以山梨醇的誘導(dǎo)作用最為顯著。外源葡萄糖對SDH活性的增加具有顯著的促進(jìn)作用,但抑制SOX活性,而外源果糖對蘋果果實SDH和SOX活性的誘導(dǎo)效果與葡萄糖恰好相反。結(jié)果還表明,外

2、源糖對發(fā)育前期蘋果果實SDH和SOX的誘導(dǎo)作用均顯著高于對發(fā)育后期蘋果果實的誘導(dǎo)作用。由此推斷,蘋果果實中山梨醇代謝相關(guān)酶的活性變化受到可溶性糖的調(diào)控?! £P(guān)鍵詞:蘋果果實;外源糖;山梨醇脫氫酶;山梨醇氧化酶     EffectsofSolubleSugarsonRelatedEnzymeActivitiesofSorbitolMetabolisminDevelopingAppleFruit  YECheng-rong,LIUGeng-sen,ES緩沖液混合(用100mmolL-1甘露醇調(diào)節(jié)各反應(yīng)液的滲透勢),放入50m

3、L的三角瓶中,在搖床上振蕩反應(yīng)16h(25℃),測定SDH和SOX的活性。3次重復(fù)?! ?.2.3酶液的制備及酶活性測定稱取1g果肉于研缽內(nèi),加少量石英砂和5mL的50mmolL-1HEPES-NaOH(pH7.5),冰浴研磨勻漿,12000g,4℃離心20min。上清液用稀釋10倍的提取緩沖液透析15h。參照Yamaki等[5]的方法測定SDH和SOX的活性。    2結(jié)果與分析中國.L.  2.1發(fā)育過程中蘋果果實山梨醇代謝相關(guān)酶活性及可溶性糖含量變化  圖1表明,發(fā)育前期,蘋果果實的SDH和SOX活性均較低。從花后4

4、5d開始,SDH活性增加顯著,到花后75d,SDH活性達(dá)到最高,之后隨果實發(fā)育逐漸下降直至果實成熟。與SDH的活性變化相比,整個發(fā)育過程中SOX活性較低且變化較小。在發(fā)育前期,SOX與SDH活性差異不顯著。從花后45d開始,SOX活性緩慢上升,到花后120d達(dá)到最大值,但顯著低于SDH活性?! 膱D2可以看出,發(fā)育早期新紅星蘋果果實的果糖和蔗糖含量均較低,而葡萄糖含量在花后30d有一定增加。隨著果實的發(fā)育,從花后60d開始,果糖和葡萄糖含量迅速增加,其中以果糖的積累最為顯著。到果實發(fā)育后期,新紅星蘋果果實的果糖含量最高,葡

5、萄糖含量次之??v觀蘋果果實的整個發(fā)育過程,蔗糖含量僅在發(fā)育后期才有一定的增加,但最終含量仍較低,遠(yuǎn)低于果糖和葡萄糖的含量。  2.2發(fā)育過程中蘋果果實山梨醇代謝相關(guān)酶活性與可溶性糖含量間的相關(guān)性  在整個發(fā)育過程中,蘋果果實的SDH活性變化與葡萄糖、果糖和蔗糖含量間均不存在顯著的相關(guān)關(guān)系(表1)。而SOX活性與蘋果果實的葡萄糖和果糖含量間存在極顯著的正相關(guān)關(guān)系,相關(guān)系數(shù)分別為0.7891和0.9002。蘋果果實的SOX活性與蔗糖含量間的相關(guān)系數(shù)雖達(dá)到0.6346,但經(jīng)顯著性測驗表明,二者間并不存在顯著的正相關(guān)關(guān)系?! ?.

6、3外源糖對蘋果果實山梨醇脫氫酶活性的影響  圖3表明,分別用濃度為100mmolL-1的葡萄糖、果糖、山梨醇、蔗糖孵育果實圓片16h,可影響蘋果果實的SDH活性,但不同糖種類間存在差異。從圖3可以看出,山梨醇、葡萄糖和蔗糖可顯著提高發(fā)育前期蘋果果實的SDH活性,與對照相比,其活性分別增加了4.82,3.41,1.64倍;對于發(fā)育后期的蘋果果實,其活性僅增加了1.32,0.76,0.54倍。而外源果糖處理均抑制發(fā)育前期和發(fā)育后期蘋果果實的SDH活性,與對照相比,活性分別下降了0.56倍和0.49倍?! ?.4外源糖對蘋果果實

7、山梨醇氧化酶活性的影響  從圖4可以看出,與外源糖對SDH的誘導(dǎo)效果相類似,外源山梨醇和蔗糖也可顯著提高發(fā)育前期和發(fā)育后期蘋果果實的SOX活性。與對照相比,發(fā)育前期果實的SOX活性分別增加了4.79倍和1.70倍,而發(fā)育后期果實的SOX活性僅增加了1.38倍和0.44倍。圖4還表明,蘋果果實的SOX活性受到外源葡萄糖的抑制和果糖的促進(jìn)。與對照相比,外源果糖處理,發(fā)育前期和發(fā)育后期蘋果果實的SOX活性分別增加了3.38倍和1.37倍。而外源葡萄糖處理,發(fā)育前期和發(fā)育后期蘋果果實的SOX活性分別下降了0.59倍和0.52倍。 

8、   3討論    眾多研究結(jié)果表明,蘋果果實中糖的積累受到果實庫強、韌皮部卸載、跨膜運輸、碳水化合物代謝及相關(guān)酶活性等方面的調(diào)控[4,5,9]。山梨醇作為蘋果光合同化產(chǎn)物的主要輸出和運輸形式,在葉片中占可溶性總糖的80%,而在果實中僅占總糖的3%~8%,表明山梨醇可在果實內(nèi)被迅速轉(zhuǎn)化[4],山梨醇經(jīng)韌

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