當(dāng)歸對(duì)血虛小鼠抗疲勞作用的研究

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1、當(dāng)歸對(duì)血虛小鼠抗疲勞作用的研究龔夢(mèng)鵑，劉新民，王立為【摘要】　　目的　研究當(dāng)歸對(duì)血虛小鼠的抗疲勞作用。方法通過環(huán)磷酰胺造小鼠血虛模型，給予當(dāng)歸水煎液2周后，對(duì)血虛小鼠體重、外周血象、游泳時(shí)間、運(yùn)動(dòng)后血乳酸（LAC）和尿素氮（BUN）的影響。結(jié)果當(dāng)歸水煎液能明顯增加血虛小鼠體重、升高紅細(xì)胞總數(shù)（RBC）、白細(xì)胞總數(shù)（ethodsAftertheblood-deficientmicemodelide，micemingtestandthechangesofbodymingtime，lacticacid,ureanitrogenotethelevelsofRBC,ed

2、icalAB公司產(chǎn)品；瑞典stockholmUV757CRT紫外可見分光光度計(jì)，上海精密科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品。　　1.3動(dòng)物KM種小鼠，雌雄各半，體重（22±2）g，由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：SCXK(京)2004-0001?！　?方法小鼠自然飼養(yǎng)3～4d，隨機(jī)分成5組：正常對(duì)照組、血虛模型組、當(dāng)歸水煎液低劑量組1.5g/kg（按生藥量計(jì)）、當(dāng)歸水煎液中劑量組3g/kg、當(dāng)歸水煎液高劑量組6g/kg，每組12只。給藥組按給藥劑量連續(xù)灌胃14d，1次/d，對(duì)照組和模型組則灌胃給予相等體積的生理鹽水。除正常對(duì)照組外，其余4組小鼠于第5d開始給藥1h后

3、，分別經(jīng)腹腔注射環(huán)磷酰胺100mg/kg，連續(xù)注射3d〔1〕。正常對(duì)照組同時(shí)注射等量的生理鹽水。　　2.1外周血象測(cè)定　　于末次給藥后30min，眼眶取血，測(cè)定小鼠紅細(xì)胞總數(shù)（RBC）、白細(xì)胞總數(shù)（in后，鼠尾根部負(fù)荷6%體重的鉛絲，置于游泳箱中游泳（水深35cm,水溫25℃），記錄小鼠自游泳開始至死亡的時(shí)間。以小鼠10s內(nèi)無法再浮出水面為依據(jù)，來判斷動(dòng)物死亡〔2，3〕。　　2.3血乳酸（LAC）的測(cè)定　　末次給藥30min后小鼠尾部負(fù)重（體重4%）,然后將其放入水深35cm,水溫(30±0.5)℃游泳箱中游泳10min。休息15min后，用毛細(xì)玻璃管眼球采血

4、20μl，用全血乳酸測(cè)定試劑盒進(jìn)行血乳酸測(cè)定?！　?.4血尿素氮（BUN）的測(cè)定　　末次給藥30min后,將小鼠放入水深35cm,水溫(30.0±0.5)℃游泳箱中不負(fù)重游泳90min，休息60min后，拔眼球采血0.5ml(不加抗凝劑)，依照血清尿氮素試劑盒說明書操作。于520nm下，30min內(nèi)測(cè)定各管吸收度，換算為血尿素氮含量，依照試劑盒說明書操作測(cè)定BUN含量?！　?結(jié)果　　3.1體征與體重造模小鼠非常行動(dòng)遲緩，眼睛暗淡無光、血色暗紅。正常對(duì)照組和給藥組小鼠活動(dòng)靈活,皮毛光澤,鼠尾粉紅?！　‘?dāng)歸水煎液對(duì)血虛小鼠體重的影響表1所示，給藥7d后，各組間體重

5、仍無差異。但第14天，與正常組比較，模型組小鼠體重明顯下降(P0.001)；與模型組比較，低，中，高劑量組動(dòng)物的體重均有顯著性增加（P0.05，P0.01）。表1當(dāng)歸水煎液對(duì)血虛小鼠體重的影響(略)　　3.2當(dāng)歸水煎液對(duì)血虛小鼠RBC，in，休息15min后LAC的影響如表4所示，與正常組對(duì)比，血虛小鼠在游泳后LAC顯著性增加(P0.01)。與模型組比較，當(dāng)歸水煎液高劑量組能明顯降低血虛小鼠運(yùn)動(dòng)后的LAC(P0.05)。表4當(dāng)歸水煎液對(duì)血虛小鼠LAC的影響(略)　　3.5當(dāng)歸水煎液對(duì)血虛小鼠BUN的影響　　BUN與機(jī)體機(jī)能、疲勞程度以及負(fù)荷量的大小呈密切正相關(guān)

6、，因此可作評(píng)定運(yùn)動(dòng)量的指標(biāo)〔4〕。當(dāng)歸水煎液對(duì)小鼠不負(fù)重游泳90min，休息60min后BUN的影響如表5所示，與正常組對(duì)比，血虛小鼠在游泳后BUN顯著性增加(P0.01)。與模型組比較，當(dāng)歸水煎液高劑量組能明顯降低運(yùn)動(dòng)后的BUN(P0.05)。表5當(dāng)歸水煎液對(duì)血虛小鼠BUN的影響(略)　　4討論中醫(yī)認(rèn)為，經(jīng)脈失于濡養(yǎng)，心血不足為血虛。當(dāng)歸具有補(bǔ)血活血之功效。本研究證明當(dāng)歸水煎液能明顯改善環(huán)磷酰胺所致血虛小鼠的體征，并使小鼠體重增加，同時(shí)明顯升高血虛小鼠RBC，Hb，WBC水平，即具有補(bǔ)血作用。血虛是慢性疲勞綜合征的病機(jī)之一。中華人民共和國保健食品檢驗(yàn)和評(píng)價(jià)技

7、術(shù)規(guī)范（試行）2004版中緩解體力疲勞功能檢測(cè)方法中指出：負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性，且血乳酸、血尿素氮、肝糖原/肌糖元三項(xiàng)生化指標(biāo)中任兩項(xiàng)指標(biāo)陽性，可判定該受試樣品具有緩解體力疲勞功能的作用。運(yùn)動(dòng)耐力的提高是抗疲勞能力加強(qiáng)的表現(xiàn)，游泳時(shí)間的長(zhǎng)短可以反映動(dòng)物運(yùn)動(dòng)疲勞的程度〔5〕。在肌肉劇烈收縮時(shí)，因供氧不足單靠有氧氧化不能滿足能量的要求，必須加速糖酵解的供能過程。在無氧情況下，肌肉在通過糖酵解反應(yīng)得到能量的同時(shí)，也產(chǎn)生了大量的乳酸，乳酸解離生成的氫離子占肌肉中酸性物質(zhì)解離的85%以上。乳酸的增加使肌肉中氫離子濃度上升，pH下降，進(jìn)而引起一系列生化變化，是導(dǎo)致疲勞的重

8、要原因〔6〕，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，6g/（