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《《膠原樣凝集素》PPT課件》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。
1、膠原樣凝集素COLLECTIN鄭州大學(xué)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)與微生物學(xué)教研室李付廣一、凝集素（LECTIN）的分類C-型凝集素:需要Ca2+維持活性的凝集素S-型凝集素:巰基依賴或β-半乳糖結(jié)合的凝集素二、膠原樣凝集素歷史上的重要發(fā)現(xiàn)1906conglutinin;firstanimallectintobeassociatedwiththeimmunesystem1989-1991mannan-bindinglectin1999collectinliver1(CL-L1)2001collectinplacenta
2、1(CL-P1)2003collectinkidney1(CL-K1)三、膠原樣凝集素的一般特性四、膠原樣凝集素的結(jié)構(gòu)（一）一級(jí)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)1.N端富含半胱氨酸區(qū)段：7-28氨基酸，其中1-3半胱氨酸2.膠原樣區(qū)：53-177氨基酸(-Gly-Xaa-Yaa-)n重復(fù)序列,Xaa、Yaa多為脯aa或羥脯aa3.頸區(qū)：24-28氨基酸，α-helicecoiled-coils4.糖識(shí)別區(qū)（CRDs）：與相應(yīng)的糖配體結(jié)合(二)三級(jí)結(jié)構(gòu)1.同源三聚體的形成(亞單位)相同的三條肽鏈形成類似郁金香花朵2.亞單位進(jìn)一步
3、聚集成寡聚體單體----CL-43,CL-L1四聚體----SP-D,Conglutinin,CL-46(十字形結(jié)構(gòu))六聚體----SP-A,MBL(一束郁金香花)(三)糖結(jié)合特異性膠原樣凝集素的凝集素樣活性存在于CRDs,由三個(gè)氨基酸基序決定:1.甘露糖結(jié)合基序:Glu-Pro-Asn2.半乳糖結(jié)合基序:Gln-Pro-Asp所有膠原凝樣集素(SP-A除外)均具有甘露糖特異基序Glu-Pro-Asn,SP-A第三位的氨基酸由Arg(狗)或Ala替換Asn.系統(tǒng)樹(五)結(jié)合微生物種類五、膠原樣凝集素在宿
4、主防御方面的生物學(xué)功能（一）凝集作用通過(guò)橋聯(lián)，可使病原微生物凝集成大塊，加強(qiáng)呼吸道黏膜纖毛清除作用，阻止病原吸附到細(xì)胞表面，抑制其定居和侵入，促進(jìn)吞噬作用。（二）補(bǔ)體激活作用1.MBL產(chǎn)生病原微生物感染早期刺激激活巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞TNF-,IL-1,IL-6急性期反應(yīng)肝細(xì)胞MBL,CRP2.MBL途徑(lectinpathway)MBL與病原微生物表面的mannose,fucose,GlcNAc結(jié)合啟動(dòng)的補(bǔ)體激活級(jí)聯(lián)反應(yīng)(三)調(diào)理作用1.collectin的受體見下表2.collectin直接作為調(diào)
5、理素3.激活補(bǔ)體成分C4b,C3b,iC3b4.吞噬作用的激活(四)抑制微生物的生長(zhǎng)SP-A,SP-D直接引起微生物細(xì)胞壁通透性增強(qiáng),導(dǎo)致微生物生長(zhǎng)抑制或死亡(五)調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)調(diào)節(jié)前炎癥因子的合成分泌(六)調(diào)節(jié)特異性免疫DCs抗原提呈,DCs成熟,T細(xì)胞增殖(七)調(diào)節(jié)過(guò)敏反應(yīng)SP-A,SP-D抑制IgE與過(guò)敏原結(jié)合,抑制過(guò)敏早期組織胺釋放,抑制晚期支氣管炎癥中淋巴細(xì)胞增殖(八)對(duì)細(xì)胞凋亡的影響SP-A抑制Ⅱ型肺泡細(xì)胞凋亡,SP-A、SP-D,、MBL刺激凋亡細(xì)胞清除HumanCL-L1的研究1999年O
6、htanik.等克隆和鑒定出一個(gè)編碼新的膠原凝集素基因，稱肝臟膠原凝集素1（collectinliver1，CL-L1），該基因定位于第八號(hào)染色體的長(zhǎng)臂上，其基因結(jié)構(gòu)由6個(gè)外顯子（EX1～EX6）和5個(gè)內(nèi)含子（IN1～I(xiàn)N5）組成，cDNA含有831bp插入片段，編碼277個(gè)氨基酸殘基。推測(cè)的氨基酸序列具有典型的膠原凝集素結(jié)構(gòu)：N端富含半胱氨酸區(qū)、膠原樣區(qū)、頸部和糖識(shí)別區(qū)。CL-L1與其他膠原凝集素相比，具有獨(dú)特之處，MBL、SP-A和SP-D基因定位于第10號(hào)染色體，而CL-L1基因定位于第8號(hào)染色體
7、，C末端具有4個(gè)重復(fù)的賴氨酸結(jié)構(gòu)，CRD和頸區(qū)由一個(gè)外顯子編碼，膠原樣區(qū)有5個(gè)外顯子編碼。膠原凝集素絕大多數(shù)為分泌型，存在于體液和分泌液中，只有CL-L1為可溶性胞漿內(nèi)蛋白，因此推測(cè)CL-L1可能具有獨(dú)特的功能。ComparisonofthreeconstructsConstructsMax.O.D.SolubilityIPTGinductionLeakage2GXY+NECK+CRD0.8no(PBS)yesyesNECK+CRD△kkkk1part(TBS),no(PBS)noyes2GXY+NEC
8、K+CRD△kkkk1nonoyesNeck+CRD△kkkkM123425kDa17kDaMmarker1beforeinductioninduction1hrinduction3hrsinduction5hrsGrowthofstandardE.coliexpressionculture(200ml)(1)Inoculate20mlofSOB(containingampicillin100?g/ml,chloramphenicol35?
