大豆肌醇磷脂制備優(yōu)化條件的研究

大豆肌醇磷脂制備優(yōu)化條件的研究

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1、2006年第31卷第6期中國油脂87+文章編號:1003-7969(2006)06-0087-03中圖分類號:TQ64596文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A大豆肌醇磷脂制備優(yōu)化條件的研究吳平,安紅,何錫鳳,喬成立(齊齊哈爾大學(xué)化工學(xué)院,161000黑龍省齊齊哈爾市建華區(qū)文化大街30號)摘要:利用乙醇-正己烷雙溶劑體系對大豆磷脂中肌醇磷脂進(jìn)行分離。對分離條件進(jìn)行了優(yōu)化研究,在乙醇濃度為55%、無水乙酸鈉的量為0.05g,正己烷用量為20mL,乙醇用量為30mL,10.0

2、0g大豆混合磷脂中肌醇磷脂的含量可以從26.00%提高到73.89%。并對雙溶劑體系的分離度進(jìn)行測定,在此條件下,分離度可達(dá)18.1。關(guān)鍵詞:大豆磷脂;肌醇磷脂;分離度;優(yōu)化磷脂(PL)是細(xì)胞膜的組成物質(zhì),參與細(xì)胞的新1.2.1乙酸鈉乙醇溶液的配制稱取一定量的無陳代謝。大豆磷脂本身是一種混合物,其主要成分水乙酸鈉溶于30mL不同濃度的乙醇中,配制成乙有磷脂酰膽堿(PC),磷脂酰乙醇胺(PE),磷脂酰絲酸鈉乙醇溶液。氨酸(PS),以及肌醇磷脂(PI)等。各單組分磷脂1.2.2PI的分離準(zhǔn)確稱取10

3、.00g大豆混合磷具有各自特殊的功能。富含PC大豆磷脂可以用于脂(PI含量為26.00%)溶于一定量的正己烷中,倒治療高脂血癥和動脈硬化。PI是細(xì)胞的信息分子,入分液漏斗中,加入乙酸鈉乙醇溶液,在室溫下振經(jīng)磷脂酶C(PLC)水解得到的肌醇三磷脂(IP3)和蕩,使其充分接觸,靜置至溶液分層,分出乙醇相,然1,2-二酰基甘油(DAG)能激發(fā)蛋白質(zhì)激酶C后再加入一定量的乙酸鈉乙醇溶液進(jìn)行二次萃取,[1,2](PKC),引發(fā)細(xì)胞反應(yīng),如收縮、分泌和代謝等。將乙醇萃取液合并。分別除去兩相中的溶劑并干研究磷脂類信息化學(xué)

4、分子及其過程機(jī)理是新興燥,取干燥后的產(chǎn)品適量溶于適量氯仿中,用HPLC學(xué)科,特別是這類分子在機(jī)體中存量甚少,而且生物測試其組分?;瘜W(xué)穩(wěn)定性又很差,認(rèn)識其作用規(guī)律極其重要。大[3,4]1.2.3HPLC測定方法色譜柱為30.0cm豆磷脂中PI含量豐富,因此探索PI的分離方法及4.6mm,填料為5m的LichrosorbSi60柱。柱溫:制備高純度的PI有重要意義。利用乙醇和正己烷室溫;流動相:A氯仿,B甲醇/水/30%氨水=84/雙溶劑體系分離大豆PI,可以提高大豆磷脂中PI的15.5/0.5(V/V

5、/V);梯度淋洗,梯度程序:0~12含量,我們經(jīng)過試驗研究,優(yōu)化雙溶劑體系分離大豆min,溶劑A從95%變化至70%,然后一直到12PI的分離條件。min,保持不變。12~13min,溶劑A從70%變化至1材料與方法95%;流速為1.0mL/min。檢測器為蒸發(fā)光散射檢1.1儀器、試劑5測器。檢測器用吹掃氣(空氣)的壓力2.210Pa,Varian高效液相色譜儀,Sedex55型蒸發(fā)光散溫度為50。射檢測器。2結(jié)果與討論大豆混合磷脂(齊齊哈爾三泰精細(xì)化工有限責(zé)任2.1分離條件的選擇公司,粉狀);P

6、I標(biāo)樣購自美國Sigma公司;乙醇、正己溶劑分離技術(shù)是根據(jù)混合磷脂中各組分在溶劑烷、氯仿為分析純;甲醇為色譜純;水為二次蒸餾水。中溶解性差異進(jìn)行分離。利用乙醇-正己烷體系可1.2操作步驟以得到高PI含量的大豆磷脂。分離過程中影響因素主要有乙醇濃度、溶劑比(V乙醇V正己烷)、乙醇中可收稿日期:2006-03-09;修回日期:2006-04-11[5,6][7]溶性鹽的含量等。陳志強(qiáng)等人對乙醇濃度對基金項目:黑龍江省教育廳骨干教師創(chuàng)新能力資助計劃項目(項目號:1054G065)分離結(jié)果的影響進(jìn)行了研究,

7、并建立大豆磷脂在乙作者簡介:吳平(1971-),男,助理研究員;主要從事醇和正己烷體系分離度的概念。大豆磷脂分離及工業(yè)化的研究工作。用乙醇為溶劑進(jìn)行萃取,PI和PE在乙醇和正88中國油脂2006年第31卷第6期己烷中的分配系數(shù)分別為:表2溶劑比對分離效果的影響[PI]乙醇W乙醇(PI%)乙醇/V乙醇己烷相中PI乙醇相中PI=V己烷V乙醇分離度[PI]己烷W己烷(PI%)己烷/V己烷含量(%)含量(%)1133.8060.043.78[PE]乙醇W乙醇(PE%)乙

8、醇/V乙醇=11.530.6368.506.60[PE]己烷W己烷(PE%)己烷/V己烷1231.6159.053.89PI與PE的分離度即PI與PE在兩相中的分配1329.4152.721.96系數(shù)比(即溶劑的選擇性)。1427.5748.292.041527.0146.551.99[PI]乙醇/[PI]己烷PI與PE的分離度=[PE]乙醇/[PE]己烷由表2可以看出,溶劑比對PI含量變化影響不

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