GB-T18085-2000植物檢疫小麥矮化腥黑穗病菌檢疫鑒定方法.pdf

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1、ICS65.020B16暑黔中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T18085-2000植物檢疫小麥矮化腥黑穗病菌檢疫鑒定方法Plantquarantine-MethodsforinspectionandidentificationofTilletiacontroversaKiihn2000一04一26發(fā)布2000一10一01實(shí)施國(guó)家質(zhì)量技術(shù)貨督局發(fā)布Gs/T18085-2000前言小麥矮化腥黑穗病菌(TilletiacontroversaKohn)是我國(guó)進(jìn)境植物檢疫危險(xiǎn)性病害。為了防止該植物病原菌隨小麥、大麥、黑麥和其他寄主植物種子傳入我國(guó)，在進(jìn)境植物檢疫時(shí)，需

2、正確掌握小麥矮化腥黑穗病菌的檢疫和鑒定方法。本標(biāo)準(zhǔn)在制定過程中，總結(jié)了多年植物檢疫的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，吸收了國(guó)際和國(guó)內(nèi)的最新研究成果，根據(jù)小麥矮化腥黑穗病菌的形態(tài)學(xué)特征、自發(fā)熒光顯微學(xué)特征和萌發(fā)生理學(xué)特征，確定了檢疫和鑒定小麥矮化腥黑穗病菌的各項(xiàng)技術(shù)要求。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A是標(biāo)準(zhǔn)的附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由農(nóng)業(yè)部提出。本標(biāo)準(zhǔn)負(fù)責(zé)起草單位:中華人民共和國(guó)大連出入境檢驗(yàn)檢疫局。本標(biāo)準(zhǔn)參加起草單位:中華人民共和國(guó)國(guó)家出入境檢驗(yàn)檢疫局、中華人民共和國(guó)上海出人境檢驗(yàn)檢疫局。本標(biāo)準(zhǔn)起草人:彭金火、章正、周國(guó)梁、毛志農(nóng)、黃冠勝。中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)植物檢疫GB/T18085-2000小麥矮

3、化腥黑穗病菌檢疫鑒定方法Plantquarantine-MethodsforinspectionandidentificationofTilletiacontroversaKIhn范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了進(jìn)境植物檢疫中小麥矮化腥黑穗病菌的檢疫和鑒定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于進(jìn)口小麥、大麥和黑麥中小麥矮化腥黑穗病菌的檢疫和鑒定。定義本標(biāo)準(zhǔn)采用下列定義。樣品sample:.{1原始樣品originalsample在現(xiàn)場(chǎng)各點(diǎn)扦取的樣品。每份原始樣品的質(zhì)量應(yīng)不少于50go.2復(fù)合樣品compositesample未經(jīng)充分混勻的原始樣品的總和。每份復(fù)合樣品的質(zhì)量應(yīng)不少于1500g

4、,.3平均樣品averagesample復(fù)合樣品經(jīng)充分混合均勻后的樣品。.4試驗(yàn)樣品testsample從平均樣品中稱取的、用于洗滌離心的樣品。每份試驗(yàn)樣品的質(zhì)量為50g,.5保存樣品keepsample取走試驗(yàn)祥品后用來保存以備復(fù)檢和仲裁的剩余平均樣品。保存樣品的質(zhì)量應(yīng)不少于1000go2.門Z網(wǎng)脊高度值reticulumheight冬抱子外胞壁的垂直高度值，在光學(xué)顯微鏡下表現(xiàn)為冬抱子外胞壁的刺狀或齒狀突起的垂直高度值a2.C口臨界網(wǎng)脊高度指數(shù)值thresholdofreticulumheight用來確定單個(gè)冬抱子屬性的網(wǎng)脊高度值，其數(shù)值為。.95um

5、,原理小麥矮化腥黑穗病菌是危害麥類作物的一種擔(dān)子菌，屬擔(dān)子菌亞門(Basidiomycotina)，冬抱菌綱(Teliomycetes)，黑粉菌目(Ustilaginales),腥黑粉菌科(Tilletiaceae),腥黑粉菌屬(Tilletia)。病原菌在麥類作物苗期形成系統(tǒng)侵染。被侵染作物結(jié)實(shí)時(shí)，籽粒被病菌的繁殖體—冬抱子侵占，成為菌奧。該病原菌的冬抱子形態(tài)學(xué)特征、自發(fā)熒光顯微學(xué)特征和萌發(fā)生理學(xué)特征與其他腥黑粉病菌不同，是鑒定該病原菌的依據(jù)。3門冬抱子形態(tài)特征國(guó)家質(zhì)f技術(shù)監(jiān)督局2000一04一26批準(zhǔn)2000門0一01實(shí)施tGa/T18085-200

6、03.1.，冬抱子小麥矮化腥黑穗病菌的冬抱子星球形、橢圓形或不規(guī)則形，具網(wǎng)狀飾紋和無色到淡色的膠質(zhì)鞘，直徑(含膠質(zhì)鞘)為16.80jAm--32.19t}m，通常為18pm--24pm;冬抱子萌發(fā)適宜溫度為2‘C-8C，萌發(fā)時(shí)形成先菌絲(擔(dān)子)，在其頂端產(chǎn)生初生小抱子(擔(dān)抱子)，初生小抱子經(jīng)“H”形交配后產(chǎn)生新月形次生小飽子。3.1.2網(wǎng)脊高度值該特征是小麥矮化腥黑穗病菌和其近似種—小麥網(wǎng)腥黑穗病菌(TilletiacariesTul.)冬抱子最重要的區(qū)別特征，前者的網(wǎng)脊高度值(平均值士標(biāo)準(zhǔn)差)為1.43Fam士。.14JAM，后者為。.53pm士0.1

7、9tcm.3.1.3臨界網(wǎng)脊高度指數(shù)值當(dāng)某個(gè)冬抱子的網(wǎng)脊高度值大于。.95lcm時(shí)，視為小麥矮化腥黑穗病菌冬抱子，小于或等于0.95Km時(shí)，視為小麥網(wǎng)腥黑穗病菌冬抱子。32冬抱子自發(fā)熒光顯微學(xué)特征在激發(fā)濾光片485nm、屏障濾光片520nm的激發(fā)下，小麥矮化腥黑穗病菌冬抱子在3min內(nèi)可產(chǎn)生自發(fā)熒光，其近似種小麥網(wǎng)腥黑稿病菌則不具備該能力。3.3冬抱子萌發(fā)小麥矮化腥黑穗病菌冬抱子在5℃萌發(fā)、17℃不能萌發(fā)，而小麥網(wǎng)腥黑穗病菌冬泡子在5℃和170C均可萌發(fā)。4儀器設(shè)備4.1萬能顯微鏡:具落射汞燈裝置、攝像轉(zhuǎn)換器及監(jiān)視器。4.2濾光片組:450^490nm激

8、發(fā)，520nm屏障。4.3目鏡和鏡臺(tái)測(cè)微尺。4.4往復(fù)式震蕩器。45低速離心機(jī)。