淺析影響胎牛血清質(zhì)量的幾大因素.doc

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1、淺析影響胎牛血清質(zhì)量的幾大因素淺析影響胎牛血清質(zhì)量的幾人因索關(guān)鍵詞:胎牛血清內(nèi)毒素2011-07-1500:00來源:互聯(lián)網(wǎng)點(diǎn)擊次數(shù):5421市場上的胎牛血清種類繁多,魚龍混雜,很多科研T作者,特別是剛接觸細(xì)胞培養(yǎng)的人,難以分辨血清質(zhì)量的優(yōu)劣。木人根據(jù)十多年來血清生產(chǎn)銷售的經(jīng)驗(yàn),總結(jié)如下:一、外觀拿到血清,最先接觸的是血清外觀,對于缺少細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)的人來說,外觀的判斷尤為重要1、顏色根據(jù)血紅蛋門含暈的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,我國的細(xì)胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/dl,實(shí)際上,血紅蛋門含暈的高低對血清并無直接彫響,這個指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)岀采血過程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度,良好

2、的操作能降低血清的溶血。國產(chǎn)血清的采血點(diǎn)很分散,人多是由屠戶采血后馬上離心收集,所以很少會有溶血,表現(xiàn)出明亮的蠟黃色,當(dāng)然,國產(chǎn)血清也很少有標(biāo)準(zhǔn)意義上的胎牛血清。進(jìn)口胎牛血清或多或少總有點(diǎn)溶血,因?yàn)檎嬲奶ヅQ迥δ懿?,紅細(xì)胞容易破裂。總的來說,國產(chǎn)的血清呈現(xiàn)出蠟黃。進(jìn)口的血清,質(zhì)量最好的呈現(xiàn)出談黃、微紅色,如Gibco16000,差點(diǎn)的呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。當(dāng)然,熱滅活血清或保存不當(dāng)?shù)难?,由于血紅蛋白的破壞氧化,會呈現(xiàn)出喑紅,甚至咖啡色。2、沉淀很多血清客戶,會發(fā)現(xiàn)進(jìn)口血清育沉淀,從而懷疑血清的質(zhì)暈問題,這是沒有根據(jù)的。血清小的沉淀是由纖維蛋門的凝聚產(chǎn)生,對血清質(zhì)量沒有任

3、何彫響,沉淀的產(chǎn)生原因很多,和廠家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。國產(chǎn)的血清,人多來自北方,由于價格低廉,保存壞境都不好,從采血、冷凍、運(yùn)輸?shù)缴a(chǎn)會經(jīng)過多次凍融,每次凍融過程,就會析出部分纖維蛋「I沉淀,這樣,血清成品過濾后看起來反而史加的“干凈”,很少有沉淀產(chǎn)生。進(jìn)口的胎牛血清,過濾分裝前很少會反復(fù)凍融,生產(chǎn)后的成品也是清澈的,但隨著時間的推移,血清屮的人量纖維蛋門會析出形成沉淀。當(dāng)然,進(jìn)口的新生牛血清,-?般牛齡都在2周左右,血清小的各種蛋門含量明顯偏高,生產(chǎn)后血清可能會渾濁,其至有人量沉淀。當(dāng)然,購買冋來的血清都是冰凍狀態(tài),使川時需要融化,融化過程最好在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進(jìn)行,否

4、則沉淀相對較多,雖然沉淀并不肓接影響血清的質(zhì)量,但對細(xì)胞的顯微觀察有一定的阻礙。3、澄清度進(jìn)口胎牛血清由于蛋門和脂類等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡,而國產(chǎn)血清,因?yàn)榻^大多數(shù)是新生牛血清,相對而言史加粘稠,顏色略深,這對于初步接觸血清的人很難判斷,但把兩考進(jìn)行對比,可容易分辨。二、主要技術(shù)指標(biāo)日前國內(nèi)血清的質(zhì)暈標(biāo)準(zhǔn)是2005版的《屮華人民共和國藥典》,主要指標(biāo)有以下幾占?1、內(nèi)毒索標(biāo)準(zhǔn)為不高于SEU/mlo內(nèi)毒索是細(xì)菌破碎后細(xì)胞壁的成分,因此內(nèi)毒素含量的高低可表現(xiàn)出采血到生產(chǎn)一系列過程屮的無菌操作情況。日前,國產(chǎn)血清基木都能達(dá)到這一要求,很多進(jìn)口胎牛血清內(nèi)毒素含量反而史高,如Gib

5、co26140,只要求不高于50EU/ml,高出我國標(biāo)準(zhǔn)10倍,即使是16000,也要10EU/ml,jfll.清質(zhì)量也未見影響??梢?,內(nèi)毒素含量偏高不影響質(zhì)量,除非含量極高,預(yù)示著已經(jīng)污染。2、總蛋白含量胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,說明采血的牛齡偏人,不是胎牛,數(shù)值偏低,表明血清可能摻水了。3、血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值?越高,反之,數(shù)值越低。4、pH國產(chǎn)血清,人多高于7.5,進(jìn)口胎牛血清,人多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關(guān),這也能用來初步鑒別血清的來源。5、微生物包括細(xì)菌、霧菌、支原體、噬菌體、各類病原性病毒等。隨著國內(nèi)

6、血清廠家生產(chǎn)條件的改善提高,細(xì)菌、霉菌等“大型”微生物兒乎能100%控制,支原體經(jīng)過0.Im過濾,人多也能清除。人腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴(yán)重的,主要是生產(chǎn)環(huán)境過程屮帶入,又無法過濾,很難徹底清除,但對血清質(zhì)量彩響不人。病原性病毒,特別是BVDV,在國產(chǎn)血清小幾乎90%以上都存在,這類微生物是影響國產(chǎn)血清質(zhì)量的重要因索之一,而進(jìn)口胎牛血清中基本都控制的很好。6、免疫球蛋門國產(chǎn)血清的只是定性檢測,結(jié)果也很不準(zhǔn)確,進(jìn)口胎牛血清人多定量檢測。免疫球蛋門的數(shù)值能完全體現(xiàn)出采血的時的牛齡情況,國產(chǎn)血清,基木都是新生牛的,血清中容易產(chǎn)生IgM,IgG的含量也偏高,進(jìn)口胎牛血清,不含IgM,

7、IgG的含量也較低。7、其它不管是國產(chǎn)還是進(jìn)口血清,都是不測抗生素的(無四環(huán)素胎牛血清除外)。國外,抗生素的使川很嚴(yán)格,川量也很少,每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量極低;國內(nèi),抗生素的濫用已成了普遍現(xiàn)象,血清屮殘留很高,對細(xì)胞培養(yǎng)極為不利,這是國產(chǎn)血清質(zhì)量差的根本原因。三、血源Tlj場上的血清血源主要分為小國、北美、南美和澳洲。1、國產(chǎn)血清質(zhì)量差,這是公認(rèn)的,主要原因并不是生產(chǎn)廠家的責(zé)任,而是天然壞境差和抗生索的人景使用。國內(nèi)環(huán)境污染嚴(yán)重

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