動物繁殖控制技術(shù)

動物繁殖控制技術(shù)

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1、第六節(jié)動物繁殖控制技術(shù)  一、誘發(fā)發(fā)情  二、同期發(fā)情  三、胚胎移植  胚胎移植:是指將一頭良種母畜配種后的早期胚胎取出,移植到同種的生理狀態(tài)相同的母畜體內(nèi),使之繼續(xù)發(fā)育成新個體,所以也稱作借腹懷胎。提供胚胎的個體為供體,接受胚胎的個體為受體。胚胎移植實際上是產(chǎn)生胚胎的供體和養(yǎng)育胚胎的受體分工合作共同繁殖后代的過程。胚胎移植產(chǎn)生的后代,遺傳物質(zhì)來自供體母畜和與之交配的公畜,而發(fā)育所需的營養(yǎng)物質(zhì)則從養(yǎng)母(受體)獲得,因此供體決定著它的遺傳特性(基因型),受體只影響它的體質(zhì)發(fā)育。(一)供、受體母畜的選擇  1.供體的選擇  1)具備遺傳優(yōu)勢,在育種上有價值:應(yīng)選擇生產(chǎn)性能高,經(jīng)濟(jì)價值大的母畜作為

2、供體?! ?)具有良好的繁殖能力:既往繁殖史正常,易配易孕,沒有遺傳缺陷,分娩順利正常無難產(chǎn)?! ?)健康無病:特別是無繁殖疾病和傳染性疾病?! ?)營養(yǎng)良好,體質(zhì)健壯?! ?.受體的選擇  受體母畜可選用非優(yōu)良品種的個體,但應(yīng)具有良好的繁殖性能和健康體況,可選擇與供體發(fā)情同期的母畜為受體,一般二者發(fā)情同步差不超過±24小時。(二)供體和受體的發(fā)情同期化  供、受體的同期化是胚胎移植的關(guān)鍵,只有當(dāng)供、受體的生殖器官處于相同的生理狀態(tài),移植的胚胎才能正常發(fā)育。若不同期,胚胎處于不同生理環(huán)境,受體母畜不能產(chǎn)生促黃體作用,不能分泌足量的孕酮,胚胎就不能附植。一般供受體同期化發(fā)情時間不得超過一天,同期

3、化越近成功率越高?! ‘?dāng)前比較理想的同期發(fā)情藥物是前列腺素及其類似物,其用量根據(jù)藥物的種類和用法而有不同,如子宮灌注的劑量要低于肌肉注射的劑量。在注射PGF2α后24小時,配合注射促進(jìn)卵泡發(fā)育的PMSG或FSH,可明顯提高同期發(fā)情效果。(三)供體母畜的超數(shù)排卵  1.超數(shù)排卵的概念  在母畜發(fā)情的適當(dāng)時間內(nèi)利用外源性激素,促進(jìn)卵巢機(jī)能,激發(fā)卵巢一次有較多卵泡發(fā)育成熟并排卵?! 。ㄋ模┡咛ゲ杉 〔膳呤侵附柚ぞ呃脹_胚液將胚胎由生殖道(輸卵管或子宮角)中沖出,并收集在器皿中。胚胎采集有手術(shù)法和非手術(shù)法兩種方法,手術(shù)法適用于各種動物,非手術(shù)法僅適用于牛、馬等大動物,且只能在胚胎進(jìn)入子宮后進(jìn)行。1

4、.胚胎采集前的準(zhǔn)備  (1)沖胚液、培養(yǎng)液的配制  為了保證胚胎在離體條件下不受損傷,沖胚液必須符合一定的滲透壓和PH值?,F(xiàn)在多采用杜氏磷酸緩沖液(PBS)、布林斯特氏液、合成輸卵管液(SOF)以及199培養(yǎng)液(TCM199)等,它們除含各種鹽類外,還含有多種有機(jī)成分,不但可用于沖洗、采胚,還可用于體外培養(yǎng)、冷凍保存和解凍胚胎等。  沖胚液和培養(yǎng)液在使用前都要加入血清白蛋白,含量一般為0.3-1%,也可用犢牛血清代替,犢牛血清需加熱(56℃水浴30分鐘)滅活,使血清中的補(bǔ)體失去活性,以利胚胎存活。沖胚血清含量一般為3%(1-5%),培養(yǎng)血清含量為20%(1-50%)?! 。?)采胚時間的確定 

5、 采胚時間的確定應(yīng)根據(jù)配種時間、發(fā)生排卵的大致時間、胚胎的運行速度、胚胎的發(fā)育階段、畜種、胚胎所處部位、采胚方法等因素來確定。1.采胚方法 ?。?)手術(shù)法采胚:在沿腹部中線作一切口,找出輸卵管和子宮角,引出切口外,用注射器吸取沖洗液注入輸卵管或子宮角內(nèi)。從另一方向插入塑料細(xì)管或針頭,用表皿接取沖洗液,胚胎即隨沖洗液一起流出。兩側(cè)應(yīng)分別沖洗。由于子宮角與輸卵管峽部接合處結(jié)構(gòu)上的不同,一般牛羊是將沖洗液從子宮角注入,由輸卵管的傘接取。豬馬相反。(2)非手術(shù)法采胚:非手術(shù)法是利用三路導(dǎo)管的采胚器瘵沖洗液通過中管注入子宮角內(nèi),然后通過內(nèi)管導(dǎo)出沖洗液,外管前端連接一氣囊,當(dāng)將采胚器插入子宮角后,充氣使氣

6、囊脹大,堵住子宮頸內(nèi)口,以免沖洗液經(jīng)子宮頸流出。也可用二路導(dǎo)管采胚器,沖洗液的注入和導(dǎo)出是通過同一導(dǎo)管。非手術(shù)法采胚每側(cè)子宮角用沖洗液100-500ml。(五)胚胎的檢查和鑒定  檢查胚胎應(yīng)在20-25℃的無菌操作室內(nèi)進(jìn)行,可采用以下兩種方法:一是靜置法——把盛沖胚液的容器靜置20-30分鐘,因胚胎比重大,會下沉到容器底部,然后將上面的液體棄去,將下面的幾十毫升沖胚胎液倒入平皿,在立體顯微鏡下進(jìn)行檢查。二是用帶有網(wǎng)格(直徑小于胚胎直徑)的過濾器放入沖胚液中,由上而下吸出沖胚液,最后只檢查下面的幾十毫升沖胚液即可。檢出的胚胎用吸胚器移入含有20%犢頭血清PBS培養(yǎng)液中進(jìn)行鑒定。(七)胚胎的移植1

7、.手術(shù)法移植:在進(jìn)行采胚和檢查的同時或之后,立即在受體腹部作一切口,找到排卵一側(cè)的卵巢,用注射器或移植器將胚胎注入同側(cè)的子宮角或輸卵管內(nèi)。?2.非手術(shù)法移植:適用于牛馬等大動物。移植前將可移植的胚胎吸入0.25ml塑料細(xì)管內(nèi),隔著細(xì)管在實體顯微鏡下檢查,確定胚胎已吸入細(xì)管內(nèi),然后將細(xì)管裝入移植器中移植。如果向一頭受體移植兩個或兩個以上胚胎時,應(yīng)按胚胎數(shù)均等地分別注入到兩個子宮角或輸卵管內(nèi)。

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