行業(yè)標準:GBT 28079-2011 水稻稻粒黑粉病菌檢疫鑒定方法.pdf

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1、ICS65.020.01B16a園中華人民共和國國家標準GB/T28079--2011水稻稻粒黑粉病菌檢疫鑒定方法DetectionandidentificationofT/lletiahorridaTak.2011—12—30發(fā)布2012-06-01實施宰瞀鸛紫瓣訾糌瞥翼發(fā)布中國國家標準化管理委員會“?刖置GB/T28079—2011本標準按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本標準由全國植物檢疫標準化技術委員會(SAC/TC271)提出并歸13。本標準起草單位:中國檢驗檢疫科學研究院、中華人民共和國天津出入境檢驗檢疫局。本標準

2、主要起草人:吳品珊、羅家風、杜洪忠、嚴進。1范圍水稻稻粒黑粉病菌檢疫鑒定方法GB/T28079--2011本標準規(guī)定了水稻稻粒黑粉病菌形態(tài)學鑒定的方法。本標準適用于水稻Oryzasativa、大米、稻殼中水稻稻粒黑粉病菌的檢疫和鑒定。2水稻稻粒黑粉病菌基本信息中文名:水稻稻粒黑粒病菌學名:nlletiahorridaTak.。異名:Tilletiabarclayana(Bref.)Saee.&P.Syd.;Neovossiahorrida(Takah.)Padwiek&A.Khan;NeovossiabarclayanaBref.。病害

3、英文名:blacksmutofrice,ricekernelsmut。屬真菌界Fungi,擔子菌門Basidiomyceta,黑粉菌綱Usfilaginomycetes,外擔菌亞綱Exobasidio—myeetidae,腥黑粉菌目Tilletiales,腥黑粉菌科Tilletiaceae,腥黑粉菌屬Tilletza。病菌的形態(tài)特征與我國進境植物檢疫性有害生物小麥印度腥黑穗病菌Tilletiaindica以及黑麥草腥黑穗病菌Tilletiawalkeri近似。水稻稻粒黑粉病菌的其他信息參見附錄A。3方法原理根據稻粒黑粉病菌孢子的形態(tài)特征

4、和對寄生造成的癥狀特征為判斷稻粒黑粉病菌的依據。4儀器4.1生物顯微鏡。4.2體視顯微鏡。4.3往復式振蕩器。4.4低速離心機。5試劑5.1吐溫一20(Tween-20)。5.2席爾氏浮載劑(參見附錄B)。6檢測6.1肉眼觀察將水稻稻粒、大米或夾雜在其他貨物中的水稻稻粒置于滅菌的白色瓷盤中,根據下列特征檢查菌癭IcB/v28079--2011和病粒:病粒外表污綠色或污黃色,有時似健粒,飽滿或略秕,松軟,隱約可見內部的黑色物,破裂后即可散出;有時病粒開裂,散出黑粉;有的病粒呈暗綠色或焦黃色;也有的病粒局部隱暗,米粒部分破壞,胚完好。對疑似

5、病粒,挑取黑粉制片。6.2洗滌檢驗稱取50g樣品,倒人250mL滅菌的三角瓶內,加滅菌水100mL、吐溫一201滴~2滴,鋁箔紙封口,將三角瓶在振蕩器上振蕩洗滌5min。將洗滌懸浮液注入10mL~20mL滅菌的刻度離心管內,1000r/min離心3min,倒掉上清液,再加剩余洗滌懸浮液,重復離心,直至所有洗滌懸浮液離心完畢,留沉淀物。在沉淀物中加入席爾氏浮載劑,視沉淀物的量,定容至1mL~3mL,吸取5pL~20pL沉淀物懸浮液制片。7鑒定在油鏡(100×)下隨機觀察測量30個成熟的黑粉菌冬孢子,記錄冬孢子大小、表面突起形狀、突起高度。

6、同樣條件下觀察不孕細胞形態(tài)特征,測量相關特征數(shù)值。8稻粒黑粉病菌形態(tài)特征8.1冬孢子冬孢子球形或近球形,淺褐色至深褐色,直徑17pm~36/zm,平均24Pm~28pm。冬孢子側面觀表面有疣突,頂彎曲、尖銳,成熟的孢子頂端平截或鈍,被透明的膠質鞘包圍,高1.5pm~4.0pm;正面觀疣突均勻分布,排列緊密,呈多角型。8.2不孕細胞不孕細胞球形,近球形,透明,孢壁光滑,大d、(22tzm--36pm)×(14}tm--24/zm),壁厚1.5pm~5.0“m。8.3水稻稻粒黑粉病菌與近似種的比較見附錄c和參見附錄D。9結果判定如樣本的形態(tài)

7、特征與第8章描述吻合,可判定為水稻稻粒黑粉病菌TilletiahorridaTak.。否則不視為水稻稻粒黑粉病菌。10樣品保存檢疫鑒定后保存樣品,以備復驗、談判和仲裁。由鑒定人標識確認、樣品管理員登記,置于干燥、防蟲、防鼠處保存,保存期為一年,有特殊需求保存期可適當延長。保存期滿,需經滅菌后方可處理。A.1寄主范圍附錄A(資料性附錄)水稻稻粒黑粉病菌其他信息GB/T28079--20”主要寄主水稻(Oryzasativa),次要寄主有臂形草屬(BrachiariaGriseb.)、馬唐屬(DigitariaHaller)、黍屬(Pani

8、cumL.)和狼尾草(Pennisetumglaucum)。A.2分布歐洲:希臘,意大利,俄羅斯。亞洲:孟加拉,柬埔寨,中國(安徽、甘肅、廣東、廣西、貴州、河北河南、湖北、湖南、江蘇、江西、吉林、遼寧、四川

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