不同離子對蛙離體心臟活動的影響.doc

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1、不同離子對蛙離體心臟活動的影響08科2摘要：本次實驗采用用蛙類斯氏離心心臟灌流法，采用1%、2%、4%三種不同濃度的鉀、鈉、鈣溶液分別進行灌流實驗。結(jié)果表明：高濃度的氯化鈉能夠使心臟收縮和舒張的幅度均減小，但心臟頻率基本山不變；KCl使蛙心活動減弱，甚至停在基線處。并且濃度越大，減弱越快，基線越往上移動；氯化鈣使蛙心收縮力和舒張增強，心率明顯加快，且濃度越大影響越明顯。關(guān)鍵字：蛙心灌流不同離子濃度心臟活動影響前言蛙心離體后，用理化因素類似于兩棲類動物血漿的任氏液灌注時，在一定時間內(nèi)，仍保持有節(jié)律的舒縮活動，

2、而改變灌流液的理化性質(zhì)后，心臟的節(jié)律性舒縮活動亦隨之改變，說明內(nèi)環(huán)境理化因素的相對恒定是維持正常心臟活動的必要條件。心臟的主要功能是興奮和收縮。興奮以離子為基礎(chǔ)，因此細胞外或血漿內(nèi)的離子濃度變化對心臟有重要影響，其中鉀鈉鈣最為重要。因而，我們設(shè)計不同濃度的鉀、鈉、鈣溶液對心臟進行灌流的實驗。初步研究這三種離子對心臟興奮性的影響，以期加深對心臟正常功能的了解和初步探討異常功能的形成原理。1、實驗材料和方法1.1【材料】1.1.1實驗動物：蛙1.1.2實驗器材：生物機能系統(tǒng)或BL-420生物信號采集系統(tǒng)，張力換

3、能器，探針，外科剪，小手剪，燒杯，滴管，蛙心套管，蛙心夾，鐵支架，試管夾，眼科鑷，絲線，雙凹夾，蛙板，蛙足釘?shù)取?.1.3實驗藥品：任氏液，氯化鈉（1%，2%，4%），氯化鈣（1%，2%，4%），氯化鉀（1%，2%，4%），生理鹽水等。1.2【方法】（1）取蟾蜍1只，使頭向下，將蛙針于枕骨大孔處向前插入顱腔左右搖動，破壞腦組織，再將針插入脊椎管，以破壞脊髓，動物全身軟癱。（2）仰位固定于蛙板上，先用普通剪刀將胸部皮膚剪開，再將胸部肌肉及軟骨剪去，用虹膜剪剪破心包膜暴露心肌。（3）于主動脈干以下繞一線，左右放

4、平，備結(jié)扎用。在主動脈右側(cè)分支下，再穿一線，盡量在遠心端扎緊，左手提線，右手以眼科剪于左主動脈上向心剪一Ｖ形切口，將盛有任氏液的蛙心套管，通過主動脈球轉(zhuǎn)向左后方，同時用鑷子輕提動脈球，向插管移動的反方向拉，即可使插管尖端順利進入心室，用主動脈干下的線結(jié)扎固定。（4）剪斷兩根動脈，輕輕提起蛙心套管，再在靜脈竇以下把其余血管一起結(jié)扎，在結(jié)扎下方剪斷血管使心臟與蛙體分離，立即以滴管吸去蛙心套內(nèi)血液，以任氏液反復(fù)沖洗數(shù)次，直到離體心臟無存血為止。最后套管內(nèi)任氏液限定1ml。（5）將蛙心套管固定于鐵柱上，用蛙心夾夾住

5、心尖，連于張力換能器，輸入生物機能系統(tǒng)進行信號采集、記錄和分析。（6）用下列藥物依次滴入套管內(nèi)，換藥前需用任氏液沖洗數(shù)次，并記錄一段曲線以作對照。原液成分　　20%氯化鈉(ml)32.5　　10%氯化鉀(ml)1.4　　10%氯化鈣(ml)1.2　　5%碳酸氫鈉(ml)4.0　　1%磷酸二氫鈉(ml)1.0　　葡萄糖(g)2(可不加)　　蒸餾水加至(ml)1000①1%氯化鈉②2%氯化鈉③4%氯化鈉④1%氯化鈣⑤2%氯化鈣⑥4%氯化鈣⑦1%氯化鉀⑧2%氯化鉀⑨4%氯化鉀2.結(jié)果分析2.1結(jié)果圖1.正常情況下

6、哇心搏曲線正常情況下的心搏曲線。圖2.滴加1%的氯化鈉后蛙心搏曲線滴加1%的氯化鈉后，蛙心搏曲線基本上沒什么變化。但基線下移。圖3.滴加2%的氯化鈉后蛙心搏曲線滴加1%的氯化鈉后，蛙心搏曲線基本上沒什么變化。但基線下移。圖4.滴加4%的氯化鈉后蛙心搏曲線4%的氯化鈉溶液對蛙心進行灌流時，心臟收縮和舒張的幅度均減小。圖5.滴加1%的氯化鉀后蛙心搏曲線滴加加1%KCl蛙心活動減弱，變化需要經(jīng)歷一段時間才發(fā)生，最后逐漸恢復(fù)。圖6.滴加2%的氯化鉀后蛙心搏曲線滴加加2%KCl蛙心活動減弱，甚至停在基線處。圖7.滴加

7、4%的氯化鉀后蛙心搏曲線滴加加2%KCl蛙心活動減弱，甚至停止，且基線下移。圖8.滴加1%的氯化鈣后蛙心搏曲線滴加1%的氯化鈣之后，蛙心收縮力和舒張出現(xiàn)輕微的增強。很不明顯。圖9.滴加2%的氯化鈣后蛙心搏曲線加2%氯化鈣蛙心收縮力明顯增強，心率明顯加快。圖10.滴加4%的氯化鈣后蛙心搏曲線加4%氯化鈣蛙心收縮力明顯增強，心率明顯加快。2.2分析2.2.1圖1為蛙心正常心搏曲線：心肌細胞與骨骼肌細胞類似，其動作電位也具周期性：0期的去極化、1期的快速復(fù)極化初期、2期的平臺期、3期的快速復(fù)極化末期和4期的靜息期

8、。心肌細胞興奮后，通過興奮-收縮偶聯(lián)機制使心肌細胞內(nèi)粗、細肌絲滑行，與骨骼肌收縮不同的是雖然兩者都中介與鈣離子，但心肌收縮需要胞外的鈣離子進入胞質(zhì)后觸發(fā)肌質(zhì)網(wǎng)膜的鈣離子通道打開而使大量的鈣離子進入胞質(zhì)從而產(chǎn)生收縮。2.2.2圖2、圖3和圖4為滴加不同濃度氯化鈉之后的心搏曲線：滴加1%和2%的氯化鈉心臟的收縮和舒張頻率不變化，心率不變化，但基線下移。而用4%的氯化鈉溶液對蛙心進行灌流時，心臟收縮和舒張的幅度均減小。