精液稀釋液配制及精液稀釋.doc

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1、精液稀釋液配制及精液稀釋一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆障♂屌渲频幕境绦蚝筒僮鞣椒?。二、?shí)驗(yàn)材料主要用品:250ml三角瓶、250ml燒杯、100ml量筒、感量為0.1克的天平、玻璃漏斗、電爐、石棉網(wǎng)、玻璃棒、定性濾紙、消毒紙巾、硫酸紙、滅菌牛皮紙、橡皮筋、10ml一次性注射器、1ml注射器、5ml注射器、雞蛋、75%酒精棉球、葡萄糖、檸檬酸鈉、青霉素、鏈霉素三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1.玻璃用品的清洗與消毒:將所有玻璃用品用洗滌劑洗凈,用稀鹽酸浸泡并用自來(lái)水沖洗干凈后,用蒸餾水沖洗四遍,空干水分,用紙將瓶口包好,放入120℃干燥箱中干燥1h,放涼備用。2.天平的標(biāo)準(zhǔn):用

2、兩張圓形硫酸紙放在天平的左右托盤(pán)上,校準(zhǔn)天平。3.稱量藥品:稱取配方需要量的藥品,并放入大燒杯中4.溶液配制:用量筒量取雙蒸水100ml,加入燒杯中,用磁力攪拌器或玻璃棒攪拌使其溶解。5.用一層定性濾紙過(guò)濾溶液至三角瓶中6.在三角瓶上加牛皮紙蓋并橡皮筋固定,放在蓋有石棉網(wǎng)的電爐上加熱至沸騰,迅速將其取下,放涼。制成基礎(chǔ)液?;A(chǔ)液如果不馬上使用可放入在2~5℃冰箱中備用,保存時(shí)間不超過(guò)12h。7.取卵黃液:新鮮雞蛋用75%的酒精棉球消毒外殼,待其完全揮發(fā)后,將雞蛋磕開(kāi),分離蛋清、蛋黃和系帶,將蛋黃盛于雞蛋殼小頭的半個(gè)蛋殼內(nèi),并小心地將蛋黃倒在用四

3、層對(duì)折(8層)的消毒紙巾上。小心地使蛋黃在紙巾上滾動(dòng),使其表面的稀蛋清被紙巾吸附。先用針頭小心將卵黃膜挑一個(gè)小口,再用去掉針頭的10ml的一次性注射器,從小口慢慢吸取卵黃,盡量避免將氣泡吸入,同時(shí)應(yīng)避免吸入卵黃膜。吸入10ml后。再用同樣的方法吸取另一個(gè)雞蛋的卵黃。也可將卵黃移至紙巾的邊緣,用針頭挑一個(gè)小口,將卵黃液緩緩倒入量筒中,注意避免將卵黃膜倒入量筒中。羊精液稀釋液推薦配方:低溫(2~5℃)保存液冷凍保存液基礎(chǔ)液葡萄糖(一水)3.3g8.8檸檬酸鈉(二水)1.4g~雙蒸餾水100ml100ml低溫保存或第一液基礎(chǔ)液80ml80ml卵黃20

4、ml20ml第二液第一液47ml甘油3ml牛精液冷凍精液稀釋液推薦配方舉例:細(xì)管冷凍精液稀釋液配方11%乳糖或12%蔗糖73ml卵黃20ml甘油7ml青霉素10萬(wàn)單位鏈霉素10萬(wàn)單位8.卵黃液與基礎(chǔ)液的混合:取80ml放涼的基礎(chǔ)液,加入三角瓶中,然后將卵黃液注入或?qū)⒙腰S液從量筒中倒入三角瓶中,將量取的80ml基礎(chǔ)液反復(fù)沖洗量筒中的卵黃,使其全部溶解入基礎(chǔ)液中,然后將全部的基礎(chǔ)液倒入三角瓶中。搖勻。9.加入抗生素:分別用1ml注射器吸取基礎(chǔ)液1ml,分別注入80萬(wàn)單位和100萬(wàn)單位的青霉素和鏈霉素瓶中,使其徹底溶解。分別從青霉素瓶中吸取0.1~0

5、.12ml和鏈霉素瓶中吸取0.1ml,將其注入三角瓶中,并搖勻。另一種方法是,是稱取0.1克的青霉素和0.1克的鏈霉素加入三角瓶中,搖勻。用基礎(chǔ)液、卵黃液和抗生素混合制成第一液。10.第二液的制作:用量筒量取第一液47ml,加入另一只三角瓶中,用注射器吸取3ml消毒甘油,注入三角瓶中,搖勻。制成羊冷凍精液的第二液。四、作業(yè)簡(jiǎn)述基礎(chǔ)液、低溫保存稀釋液、冷凍保存稀釋液的制作方法。注:豬稀釋液配方:1、稀釋液配制稀釋液配方:12%蔗糖溶液?75ml?氨基乙酸????????0.5g??????????檸檬酸鈉???0.5g?Tris?????????

6、??0.2g??????????卵黃???????20ml雙重蒸餾水加至??100ml??????????甘油最終濃度?1%?????青鏈霉素??500-1000μg/ml甘油配制12%蔗糖溶液,并加入氨基乙酸,檸檬酸鈉和Tris后過(guò)濾煮沸15分鐘消毒,待涼后按比例加入卵黃、甘油、青鏈霉素,充分?jǐn)嚢杈鶆颉?、解凍稀釋液的配制解凍稀釋液配方:葡萄糖??5g????雙蒸水?????100ml?????????????檸檬酸鈉?0.5g??10%安鈉加??5ml配好后過(guò)濾煮沸消毒

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