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1、ICS65．020．01B16a園中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB／T28079--2011水稻稻粒黑粉病菌檢疫鑒定方法DetectionandidentificationofT／lletiahorridaTak．2011—12—30發(fā)布2012-06-01實(shí)施宰瞀鸛紫瓣訾糌瞥翼發(fā)布中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)“?標(biāo)準(zhǔn)分享網(wǎng)www.bzfxw.com免費(fèi)下載刖置GB／T28079—2011本標(biāo)準(zhǔn)按照GB／T1．1—2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)(SAC／TC271)提出并歸13。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中
2、國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院、中華人民共和國(guó)天津出入境檢驗(yàn)檢疫局。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：吳品珊、羅家風(fēng)、杜洪忠、嚴(yán)進(jìn)。標(biāo)準(zhǔn)分享網(wǎng)www.bzfxw.com免費(fèi)下載1范圍水稻稻粒黑粉病菌檢疫鑒定方法GB／T28079--2011本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了水稻稻粒黑粉病菌形態(tài)學(xué)鑒定的方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于水稻Oryzasativa、大米、稻殼中水稻稻粒黑粉病菌的檢疫和鑒定。2水稻稻粒黑粉病菌基本信息中文名：水稻稻粒黑粒病菌學(xué)名：nlletiahorridaTak．。異名：Tilletiabarclayana(Bref．)Saee．&P．Syd．；Ne
3、ovossiahorrida(Takah．)Padwiek&A．Khan；NeovossiabarclayanaBref．。病害英文名：blacksmutofrice，ricekernelsmut。屬真菌界Fungi，擔(dān)子菌門Basidiomyceta，黑粉菌綱Usfilaginomycetes，外擔(dān)菌亞綱Exobasidio—myeetidae，腥黑粉菌目Tilletiales，腥黑粉菌科Tilletiaceae，腥黑粉菌屬Tilletza。病菌的形態(tài)特征與我國(guó)進(jìn)境植物檢疫性有害生物小麥印度腥黑穗病菌Tilleti
4、aindica以及黑麥草腥黑穗病菌Tilletiawalkeri近似。水稻稻粒黑粉病菌的其他信息參見(jiàn)附錄A。3方法原理根據(jù)稻粒黑粉病菌孢子的形態(tài)特征和對(duì)寄生造成的癥狀特征為判斷稻粒黑粉病菌的依據(jù)。4儀器4．1生物顯微鏡。4．2體視顯微鏡。4．3往復(fù)式振蕩器。4．4低速離心機(jī)。5試劑5．1吐溫一20(Tween-20)。5．2席爾氏浮載劑(參見(jiàn)附錄B)。6檢測(cè)6．1肉眼觀察將水稻稻粒、大米或夾雜在其他貨物中的水稻稻粒置于滅菌的白色瓷盤中，根據(jù)下列特征檢查菌癭I標(biāo)準(zhǔn)分享網(wǎng)www.bzfxw.com免費(fèi)下載cB／v2807
5、9--2011和病粒：病粒外表污綠色或污黃色，有時(shí)似健粒，飽滿或略秕，松軟，隱約可見(jiàn)內(nèi)部的黑色物，破裂后即可散出；有時(shí)病粒開裂，散出黑粉；有的病粒呈暗綠色或焦黃色；也有的病粒局部隱暗，米粒部分破壞，胚完好。對(duì)疑似病粒，挑取黑粉制片。6．2洗滌檢驗(yàn)稱取50g樣品，倒人250mL滅菌的三角瓶?jī)?nèi)，加滅菌水100mL、吐溫一201滴～2滴，鋁箔紙封口，將三角瓶在振蕩器上振蕩洗滌5min。將洗滌懸浮液注入10mL～20mL滅菌的刻度離心管內(nèi)，1000r／min離心3min，倒掉上清液，再加剩余洗滌懸浮液，重復(fù)離心，直至所有洗滌
6、懸浮液離心完畢，留沉淀物。在沉淀物中加入席爾氏浮載劑，視沉淀物的量，定容至1mL～3mL，吸取5pL～20pL沉淀物懸浮液制片。7鑒定在油鏡(100×)下隨機(jī)觀察測(cè)量30個(gè)成熟的黑粉菌冬孢子，記錄冬孢子大小、表面突起形狀、突起高度。同樣條件下觀察不孕細(xì)胞形態(tài)特征，測(cè)量相關(guān)特征數(shù)值。8稻粒黑粉病菌形態(tài)特征8．1冬孢子冬孢子球形或近球形，淺褐色至深褐色，直徑17pm～36／zm，平均24Pm～28pm。冬孢子側(cè)面觀表面有疣突，頂彎曲、尖銳，成熟的孢子頂端平截或鈍，被透明的膠質(zhì)鞘包圍，高1．5pm～4．0pm；正面觀疣突均
7、勻分布，排列緊密，呈多角型。8．2不孕細(xì)胞不孕細(xì)胞球形，近球形，透明，孢壁光滑，大d、(22tzm--36pm)×(14}tm--24／zm)，壁厚1．5pm～5．0“m。8．3水稻稻粒黑粉病菌與近似種的比較見(jiàn)附錄c和參見(jiàn)附錄D。9結(jié)果判定如樣本的形態(tài)特征與第8章描述吻合，可判定為水稻稻粒黑粉病菌TilletiahorridaTak．。否則不視為水稻稻粒黑粉病菌。10樣品保存檢疫鑒定后保存樣品，以備復(fù)驗(yàn)、談判和仲裁。由鑒定人標(biāo)識(shí)確認(rèn)、樣品管理員登記，置于干燥、防蟲、防鼠處保存，保存期為一年，有特殊需求保存期可適當(dāng)延長(zhǎng)
8、。保存期滿，需經(jīng)滅菌后方可處理。標(biāo)準(zhǔn)分享網(wǎng)www.bzfxw.com免費(fèi)下載A．1寄主范圍附錄A(資料性附錄)水稻稻粒黑粉病菌其他信息GB／T28079--20”主要寄主水稻(Oryzasativa)，次要寄主有臂形草屬(BrachiariaGriseb．)、馬唐屬(DigitariaHaller)、黍?qū)?PanicumL．)和狼尾草(Penn
