不同經(jīng)穴針刺對(duì)腦卒中偏癱痙攣大鼠h反射的影響研究

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1、不同經(jīng)穴針刺對(duì)腦卒中偏癱痙攣大鼠H反射的影響研宄趙佳輝桑鵬王順黑龍江省中醫(yī)研究院黑龍江哈爾濱150036目的：觀察針刺不同經(jīng)穴對(duì)腦卒中偏癱痙攣狀態(tài)大鼠H反射的影響。方法：采用線栓法制備大鼠模型，造模成功后第3天開(kāi)始治療，連續(xù)治療14天，每日一次；釆用神經(jīng)電生理H反射評(píng)價(jià)模型和治療效果；結(jié)果：陽(yáng)經(jīng)針刺組顯著抑制大鼠H反射的出現(xiàn)，和陰經(jīng)針刺組、陰陽(yáng)經(jīng)針刺組、巴氯芬組、MCPG組比較均有顯著性差異(P<0.01)。結(jié)論：陽(yáng)經(jīng)針刺對(duì)腦卒中偏癱痙攣狀態(tài)的效果較好。關(guān)鍵詞：腦卒中；痙攣；H反射腦卒中后約有70-80%的病人遺留有不同程度的功能障礙，其中痙攣發(fā)牛

2、.率最高，是影響患者生存質(zhì)量的主要原因。在腦卒中恢復(fù)過(guò)程中，痙攣可出現(xiàn)在痙攣期和聯(lián)帶運(yùn)動(dòng)期，是腦卒中治療中需要解決的重要問(wèn)題。針刺治療腦卒中后痙攣狀態(tài)療效顯著，但療效未見(jiàn)客觀指標(biāo)評(píng)價(jià)，木研宄從不同經(jīng)穴針刺對(duì)腦卒中痙攣大鼠H反射的影響進(jìn)行研宄和探討，以探求不同針刺方法對(duì)痙攣的作用療效。1.實(shí)驗(yàn)材料與方法1.1.1主要試劑及儀器Trizol試劑武漢德生物工程有限公司；華佗牌針灸針蘇州暖療用品廠；德國(guó)Eppendorf移液器；上海維迪Keypoint4多功能肌電誘發(fā)電位儀；上海華誼儀器制造廠G6805-2Α型電針治療儀；DGB/20-00臺(tái)式干燥機(jī)

3、上海天慶實(shí)驗(yàn)設(shè)備廠廈門(mén)麥克奧；高速冷凍離心機(jī)美國(guó)Beckman公司；PCR儀美國(guó)PE公司；梯度PCR儀德國(guó)Biometro公司；臺(tái)式離心機(jī)5417C德國(guó)Eppendorf公司；巴氯芬武漢遠(yuǎn)程科技發(fā)展有限公司；MCPG武漢遠(yuǎn)程科技發(fā)展有限公司。1.1.2動(dòng)物健康Wistar大鼠200只，雄性，體重250-300g，長(zhǎng)春高新實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物許可證號(hào):SCXK-(吉)2003-0004o1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組將動(dòng)物隨機(jī)分為8組，每組20只，分別為：空白組、模型組、假手術(shù)組、陽(yáng)經(jīng)針刺組、陰經(jīng)針刺組、陰陽(yáng)經(jīng)針刺組、GABAB激動(dòng)劑組（巴氯芬組）和mGluRl桔抗

4、劑組（MCPG組）。1.3模型制作方法采用改良線栓法［1］復(fù)制人鼠人腦中動(dòng)脈梗塞模型。1.4動(dòng)物入選標(biāo)準(zhǔn)與選穴1.4.1大鼠均在再灌注3h蘇醒后進(jìn)行評(píng)分，評(píng)分按Zea-lOnga［2］報(bào)道的4分制進(jìn)行。評(píng)分在1?3分的大鼠認(rèn)為模型制作成功，納入實(shí)驗(yàn)分組。具體評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表1。1.4.2選穴按照李忠仁主編的《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》附錄三常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物針灸穴位取穴：陽(yáng)陵泉：距后三里上外側(cè)5mm。足三里：膝關(guān)節(jié)后外側(cè)，在腓骨小頭下約5mm處。太溪：內(nèi)踝與跟結(jié)節(jié)之間凹陷中。三陰交：后肢內(nèi)踝尖直上10mm。1.5治療方法陽(yáng)經(jīng)針刺組：取大鼠右側(cè)陽(yáng)陵泉、足三里。陰經(jīng)針刺組：取大鼠右

5、側(cè)太溪、三陰交。陰陽(yáng)經(jīng)針刺組：取大鼠右側(cè)陽(yáng)陵泉、足三里、太溪、三陰交?？瞻捉M、假手術(shù)組和模型組只捆綁固定，不針刺。取大鼠定穴消毒后常規(guī)針刺，接電針治療儀，調(diào)整好刺激參數(shù)（刺激頻率為100Hz的連續(xù)波，波寬0.3ms），以動(dòng)物右側(cè)下肢出現(xiàn)有節(jié)律的收縮、顫動(dòng)為度。陽(yáng)經(jīng)針刺組、陰經(jīng)針刺組、陰陽(yáng)經(jīng)針刺組每日針刺30分鐘；GABAB激動(dòng)劑組每日腹腔注射巴氯芬；mGluRl拮抗劑組每日腹腔注射MCPG。各組治療均從模型復(fù)制成功后第三天開(kāi)始，每天治療一次,連續(xù)14天。1.6觀察指標(biāo)及檢測(cè)方法1.6.1電生理檢測(cè)記錄方法按30mg/kg劑量腹腔注射10%水合氯酸作動(dòng)物麻

6、醉，麻醉后取俯臥位固定動(dòng)物。沿內(nèi)踝至大轉(zhuǎn)子連線切開(kāi)皮膚、皮下，鈍性分離臀大肌，暴露坐骨神經(jīng),以鉤狀保護(hù)電極懸吊坐骨神經(jīng)；將鉤狀保護(hù)電極連接到維迪Keypoint4多功能肌電誘發(fā)電位儀刺激輸出端；另以同心針電極插入腓腸肌內(nèi)側(cè)頭，地線置于尾部。1.6.2H反射記錄采用單次（single）電刺激誘發(fā)H波，由小到大調(diào)節(jié)電刺激強(qiáng)度（0?2mA）直至H波出現(xiàn)，再逐漸增強(qiáng)刺激使M波出現(xiàn)，H波變小，通過(guò)儀器鼠標(biāo)定格測(cè)得H波潛伏期。靈敏度0.5?1.0mV/Div，吋間Ims/Div,通頻帶0.01Hz?5kHz,刺激率1Hz，刺激脈寬0.1ms。1.6.3H反射恢復(fù)曲線

7、描記調(diào)節(jié)單次電刺激強(qiáng)度至H波與M波波幅接近，再改用成對(duì)刺激（double）誘發(fā)H波，第一次刺激為條件刺激（S1）,第二次刺激為測(cè)試刺激（S2），成對(duì)刺激間隔分別為1ms、5ms、10ms、50ms、100ms、500ms、1000ms。當(dāng)刺激間隔較短吋，S2引起的脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元興奮落在S1引起興奮后的不應(yīng)期內(nèi)，所以S2所誘發(fā)出的H波幅度較低，H波與M波的比值（H/M）較低；隨著刺激間隔延長(zhǎng)H波逐漸增大，H/M也增大。以刺激間隔吋間為橫坐標(biāo)，H/M為縱坐標(biāo)可描記出一條曲線，稱(chēng)為H反射恢復(fù)曲線。當(dāng)上運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元損害，對(duì)下運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元失抑制吋，曲線上移。靈敏0

8、.5?1.0mV/Div，分析吋間Ims/Div，通頻帶0.01Hz?5kHz，