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1、影響唾液淀粉酶活性的研究摘要:討論了不同條件下唾液淀粉酶的活性差異,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,影響唾液淀粉酶活性的因素很多,必須在適宜的條件下,才能發(fā)揮最佳催化作用;淀粉酶具有高度專一性,其活性受溫度、pH值、激活劑及抑制劑、酶濃度以及作用時(shí)間等多種因素的影響;每個(gè)人產(chǎn)生唾液淀粉酶的量不同,活性強(qiáng)弱也有差異。關(guān)鍵詞:淀粉酶;活性;溫度;抑制劑;激活劑;專一性2影響唾液淀粉酶的活性的因素(一)實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察淀粉在水解過程中遇碘后溶液顏色的變化。觀察溫度、pH、激活劑與抑制劑對唾液淀粉酶活性的影響。(二)實(shí)驗(yàn)原理人唾液中淀粉酶為α-淀粉酶,在唾液腺細(xì)胞中合成。在唾液淀粉酶的作用下,淀粉水解
2、,經(jīng)過一系列被稱為糊精的中間產(chǎn)物,最后生成麥芽糖和葡萄糖。變化過程如下:淀粉→紫色糊精→紅色糊精→麥芽糖、葡萄糖淀粉、紫色糊精、紅色糊精遇碘后分別呈藍(lán)色、紫色與紅色、麥芽糖和葡萄糖遇碘不變色。淀粉與糊精無還原性,或還原性很弱,對班氏試劑呈陰性反應(yīng)。麥芽糖與葡萄糖是還原性糖,與班氏試劑共熱后生成紅棕色氧化亞銅的沉淀。唾液淀粉酶的最適溫度為37-40°C,最適pH為6.8.偏離此最適環(huán)境時(shí),酶的活性減弱。低濃度的Cl-離子能增加淀粉酶的活性,是它的激活劑。Cu2+等金屬離子能降低該酶的活性,是它的抑制劑。(三)器材及試劑1、器材:試管、酒精燈、燒杯、恒溫水浴鍋、量筒、冰浴、玻
3、璃棒、試管夾、白磁板、試管架、鐵三腳架、唾液淀粉酶2、試劑:1%淀粉溶液、碘液、班氏試劑、0.4%HCl溶液、0.1%的乳酸溶液、1%NaCl溶液、1%CuSO4溶液、0.1%淀粉溶液(四)操作步驟1、淀粉酶活性的檢測:取一只試管,注入1%淀粉溶液5mL與稀釋的唾液0.5-2mL。混勻后插入1支玻璃棒,將試管連同玻璃棒置于37°C水浴中。不是的用玻璃棒從試管中取出1滴溶液,滴加在白磁板上,隨即滴加1滴碘液,觀察溶液呈現(xiàn)的顏色。此實(shí)驗(yàn)延續(xù)至溶液僅表現(xiàn)碘被稀釋后的微黃色為止。記錄淀粉在水解過程中,遇碘后溶液顏色的變化。向上面的剩余溶液中加2mL班氏試劑,放入沸水中加熱10分鐘
4、左右,觀察現(xiàn)象2、pH對酶活性的影響:取4支試管,分別加入0.4%鹽酸、0.1%乳酸、蒸餾水與1%碳酸鈉各2mL,再向以上四支試管中各加2mL1%淀粉溶液及2mL淀粉酶試劑,在沸水浴中加熱,根據(jù)生成紅棕色沉淀的多少,說明淀粉水解的強(qiáng)弱。3、溫度對酶活性的影響:取3支試管,各加3mL1%淀粉溶液;另取3支試管,各加1mL淀粉酶液。將此6支試管分為3組,每組中盛淀粉溶液與淀粉酶液的試管各1支,三組試管分別置于0°C、37°C與70°C的水浴中。5分鐘后,將各組中的淀粉溶液倒入淀粉酶液中,繼續(xù)維持原溫度條件5min后,立即加2滴碘液,觀察溶液顏色的變化。根據(jù)觀察結(jié)果說明溫度對酶
5、活性的影響。4、激活劑與抑制劑對酶活性的影響:取3支試管,按下表加入各種試劑?;靹蚝?,置于37°C水浴中的保溫。從1號試管中用玻璃棒取出1滴溶液,置于白磁板上用碘液檢查淀粉的水解程度。待1號試管內(nèi)的溶液遇碘不再變色后,立即取出所有的試管,各加碘液2滴,觀察溶液顏色的變化,并解釋之。管號1231%NaCl(mL)1——1%CuSO4(mL)—1—蒸餾水(mL)——1淀粉酶液(mL)1110.1%淀粉溶液(mL)333(五)、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論1.加入班氏試劑后2.PH值對酶活性影響:1號深紅色,2號為紅棕色,3號為磚紅色,4號為偏藍(lán)。因?yàn)镻H=1時(shí),超出了淀粉酶有效PH范圍,使
6、得酶完全失活,淀粉沒有被分解。2號是因?yàn)镻H=5時(shí),不是淀粉酶的最適范圍。3號是因?yàn)镻H=7時(shí),為淀粉酶分解的最適PH,淀粉被酶迅速分解生成麥芽糖和葡萄糖。而4號則是因?yàn)镻H=9超出了淀粉酶的適宜PH,活性受到或者是部分失活,使淀粉分解較慢。3.溫度對酶的影響:1號顯紫紅色,2號為淡黃色,3號為深藍(lán)色。當(dāng)溫度為0度時(shí),蛋白質(zhì)分子的熱運(yùn)動(dòng)減慢,即酶分子的活性受到了抑制,使酶的活性降低了,淀粉分解減慢,生成紫紅色的糊精;2號處于37度,接近人體溫度,酶的活化性能較高,淀粉被分解成麥芽糖和葡萄糖就越快,所以是淡黃色,而當(dāng)溫度為70度時(shí),由于酶是蛋白質(zhì),遇到高溫時(shí)會(huì)失活,所以淀粉
7、沒有被分解。4.激活劑和抑制劑對酶的影響:3號作為對照實(shí)驗(yàn)組,顯紅棕色,1號顯淺黃色,2號顯深藍(lán)色。因?yàn)樵?號溶液中,NaCl對酶的活性在增加作用,激活了淀粉酶,淀粉酶迅速把淀粉分解成麥芽糖和葡萄糖,滴加碘液時(shí),溶液顯淺黃色,而對照組顯示紅棕色,表明淀粉被分解成了糊精,在1號中,溶液中的淀粉沒有被分解遇碘變藍(lán),通過對比1和3號,2和3號,由顏色的變化,判斷淀粉水解程度為1<3<2,說明了NaCl具有激活作用,CuSO4具有抑制作用。結(jié)論:酶催化特定化學(xué)反應(yīng)的蛋白質(zhì)、RNA或其復(fù)合體。是生物催化劑,能通過降低化學(xué)反應(yīng)的活化能加快