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1、紅景天多糖對老年小鼠免疫功能的影響論文羅文哲王建杰阮陽商宇【摘要】目的探討中藥紅景天多糖在免疫功能調(diào)節(jié)方面的作用機(jī)制。方法應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)、放射免疫和ELISA方法檢測老年小鼠免疫功能T淋巴細(xì)胞亞群,外周血白介素2(IL2)含量及免疫球蛋白G(IgG)的含量。結(jié)果紅景天多糖對老年小鼠T淋巴細(xì)胞亞群、外周血IL2含量及抗體形成均有增強(qiáng)作用(P0.05)。結(jié)論紅景天多糖能夠提高老年小鼠的免疫功能,是一種良好的免疫調(diào)節(jié)劑?!娟P(guān)鍵詞】紅景天多糖;TLC亞群;IL2;IgG紅景天含有多種生物活性成分,有良好的抗疲勞、抗衰老、抗缺氧、抗氧化作用〔1〕
2、。大量研究證實(shí)紅景天中所含的多糖成分具有特殊而明確的生理活性和藥理作用。本實(shí)驗(yàn)通過檢測老年小鼠T淋巴細(xì)胞亞群的數(shù)目和比值,白介素2(IL2)的活性及IgG含量,探討紅景天多糖對老年小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用。1材料與方法1.1主要試劑與藥品抗小鼠CD3、CD4、CD8單克隆抗體:北京醫(yī)科大學(xué)免疫系;IL2試劑盒:解放軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心放免所;IgG酶聯(lián)免疫試劑盒:北京邦定生物試劑公司;紅景天:佳木斯藥材公司。超聲波法提取紅景天多糖〔2〕。1.2實(shí)驗(yàn)方法昆明系小鼠30只、清潔級,雌雄各半,青年組2月齡10只,體重(20±2)g,老年組12月齡2
3、0只,體重(50±5)g.freell灌胃;老年小鼠模型組:生理鹽水0.5ml灌胃;紅景天多糖組:紅景天多糖75mg/kg灌胃(正常服藥組)。各組連續(xù)10d。于第11天取樣檢測各項(xiàng)免疫指標(biāo)。1.3指標(biāo)檢測1.3.1T淋巴細(xì)胞亞群測定處死小鼠.取脾研磨,制成脾細(xì)胞懸液,調(diào)整細(xì)胞數(shù)為1×106/ml。將細(xì)胞懸液分別加入2個(gè)試管內(nèi),1ml/管。第一管加入FITC標(biāo)記的抗小鼠CD+3McAb40μl、第二管同時(shí)加入PE標(biāo)記的抗小鼠CD+4McAb和FITC標(biāo)記的抗小鼠CD+8McAb各20μl,作用30min后,加入1ml熒光洗液,2200r/min離心
4、5min,去上清。加入1ml熒光保存液,流式細(xì)胞儀檢測各細(xì)胞亞群的比例。1.3.2血清IL2的檢測采用放射免疫法測定法,按試劑盒說明書操作。1.3.3IgG檢測ELISA法,按試劑盒說明書操作。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理各項(xiàng)指標(biāo)以x±s表示,通過SPSS10.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,組間進(jìn)行方差分析、q檢驗(yàn)。2結(jié)果2.1紅景天多糖對小鼠T淋巴細(xì)胞亞群的影響見表1。老年模型組與青年對照組比較,CD+4亞群的比例及CD+4/CD+8的比值降低(P<0.05);紅景天多糖能提高老年模型組小鼠的CD+4亞群的比例,提高CD4+4/CD+8的比值(P<0.05),與
5、青年組水平無明顯差異(P>0.05)。2.2紅景天多糖對小鼠血清IL2和血清IgG的影響見表2。老年模型組與青年對照組比較,IL2、IgG水平明顯降低(均P<0.05);紅景天多糖能提高老年模型組小鼠的IL2及IgG水平(均P<0.05),與青年對照組水平無明顯差異(P>0.05)。表1對小鼠T淋巴細(xì)胞亞群的影響與老年模型組比較:1)P0.05;下表同表2對小鼠血清IL2和血液IgG的影響3討論T細(xì)胞在機(jī)體的免疫防御、免疫調(diào)節(jié)、免疫監(jiān)視及免疫修復(fù)中有極為重要的作用,對于機(jī)體的自身穩(wěn)定和免疫平衡至關(guān)重要。T細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞免疫,并對體液免疫起到
6、輔助和調(diào)節(jié)作用。T細(xì)胞具有高度的異質(zhì)性,細(xì)胞表面存在著許多特異性分子,如CD+3、CD+4、CD+8等,在識別抗原過程中發(fā)揮著重要的作用。其中Th細(xì)胞(CD+4)和Ts細(xì)胞(CD+8)的相互協(xié)調(diào)是調(diào)控的重要環(huán)節(jié)之一。CD+4/CD+8的比值是反映機(jī)體免疫內(nèi)環(huán)境是否穩(wěn)定的一個(gè)重要指標(biāo),兩者平衡決定了免疫反應(yīng)的總效應(yīng),若比值偏離正常值,說明機(jī)體免疫功能失調(diào)。本實(shí)驗(yàn)表明:老年模型小鼠Th(CD+4)細(xì)胞明顯降低,CD+4/CD+8比值偏離青年對照組水平,提示老年模型小鼠T細(xì)胞亞群的分布發(fā)生了變化,導(dǎo)致小鼠T淋巴細(xì)胞免疫功能異常及免疫調(diào)節(jié)功能紊亂,造成小
7、鼠細(xì)胞免疫功能低下。本實(shí)驗(yàn)證明紅景天多糖可改善老年小鼠CD+4亞群比例及CD+4/CD+8比值,說明它對老年細(xì)胞免疫功能低下有較好的改善作用〔3〕。IL2在免疫應(yīng)答、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤免疫中具有重要作用。輔助性T細(xì)胞(CD+4)是IL2的主要來源,主要促進(jìn)CTL和NK細(xì)胞增殖;促進(jìn)B細(xì)胞分化和增殖。B淋巴細(xì)胞經(jīng)過細(xì)胞增殖、抗原選擇、免疫球蛋白類型轉(zhuǎn)換和細(xì)胞表面某些標(biāo)志的改變以及體細(xì)胞突變,最終分化為漿細(xì)胞,即抗體形成細(xì)胞,它產(chǎn)生高親和力抗體,主要介導(dǎo)體液免疫,中和細(xì)菌的毒素與游離的病毒、免疫調(diào)理及細(xì)胞溶解。因此,抗體檢測是衡量個(gè)體體液免疫的重要
8、指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)表明:老年模型小鼠,其血清IL2水平較青年對照組顯著減少,IgG較青年對照組顯著減少,說明老年個(gè)體存在著細(xì)胞免疫功能與體液