何首烏對老齡大鼠免疫功能的影響論文

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1、何首烏對老齡大鼠免疫功能的影響論文熊平源王強郭凱文唐朝暉白惠卿【摘要】目的：了解何首烏對老齡大鼠免疫功能的影響。方法：采用溶血素測定法檢測何首烏對老齡大鼠溶血素抗體產(chǎn)生的影響；參照LDH法檢測何首烏對老齡大鼠NK細胞活性的影響；采用3HTdR摻入法檢測何首烏對老齡大鼠淋巴細胞增殖活性的影響；采用姬姆薩染色法檢測老齡大鼠腹腔巨噬細胞的吞噬功能。結(jié)果：藥物實驗組與老齡對照組比較，溶血素抗體產(chǎn)生水平明顯增加(P0.01)；NK細胞的細胞毒活性明顯增強(P0.01)；T、B淋巴細胞的轉(zhuǎn)化增殖活性增強（P0.05；P0.01）；腹腔巨噬細胞吞噬功能也明顯

2、增強。結(jié)論：何首烏能增強老齡大鼠的免疫功能?！娟P(guān)鍵詞】何首烏；溶血素抗體；NK細胞；淋巴細胞；腹腔巨噬細胞現(xiàn)代醫(yī)學認為，何首烏（TuberFleecefloan公司產(chǎn)品；DG3022型酶聯(lián)免疫測定儀，華東電子管廠產(chǎn)品；CO2培養(yǎng)箱，美國NaPCo.產(chǎn)品；DYQIII型微量多頭細胞收集器，紹興醫(yī)療器械廠產(chǎn)品。2方法與結(jié)果21何首烏對老齡大鼠體液免疫功能的影響采用溶血素測定法［3］。取2×108個/mL綿羊紅細胞，按每只鼠0.5mL腹腔注射,免疫4d后,將小鼠處死,摘除小鼠眼球,將每只小鼠血分別滴至小試管內(nèi),室溫放置1h,使血清充分滲出后離心,上

3、層血清用生理鹽水稀釋后取1mL,再加入0.5mL綿羊紅細胞，置冰浴中冷卻，加入1mL補體,離心，取上清液1mL及3mL都氏度劑,震蕩均勻，放置10min，于540nm波長下比色，測定樣品及綿羊紅細胞半數(shù)溶血時的OD540值。結(jié)果見圖1。圖1何首烏對老齡大鼠溶血素抗體的影響（略）圖1結(jié)果顯示，老年對照（OM）組與青年對照(YC)組比較，抗體產(chǎn)生水平明顯低下(P0.05)；而藥物實驗組與老齡對照組比較,則抗體產(chǎn)生水平明顯增加(P0.01)。22NK細胞活性測定參照LDH法，取脾細胞懸液（2×107/mL）0.25mL作為效應細胞,.freelL）0

4、.05mL于96孔培養(yǎng)板中，,使效靶比為50∶1。同時設效應細胞和靶細胞對照,每份樣品設3個復孔,置37℃5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6h。加入3HTdR0.5μCi/孔，培養(yǎng)6h后收獲，置于液體閃爍儀中測cpm值［4，5］。結(jié)果見圖2。圖2何首烏對老齡大鼠NK細胞活性的影響（略）圖2結(jié)果顯示，老年對照（OM）組與青年對照(YC)組比較，NK細胞活性明顯低下(P0.05)；而藥物實驗組與老齡對照組比較,則NK細胞活性明顯增強(P0.01)。23何首烏對老齡大鼠脾細胞增殖的影響無菌取大鼠脾細胞,洗滌兩次,用含10%小牛血清的IMDM培養(yǎng)液調(diào)細胞濃度至

5、5×106/mL,加入96孔培養(yǎng)板每孔100μL。然后分別加入ConA和LPS100μL（每份樣品設3個復孔），置CO2孵箱培養(yǎng)68h，培養(yǎng)結(jié)束前8h摻入3HTdR2.85μBq/孔,收獲細胞,測定閃爍值［6］。圖3何首烏對老齡大鼠脾細胞增殖活性的影響（略）圖3結(jié)果顯示,何首烏能增加老齡大鼠脾細胞對ConA和LPS的增殖活性,說明何首烏對老年大鼠T淋巴細胞和B淋巴細胞的轉(zhuǎn)化增殖有促進作用。其中藥物實驗組對ConA的增殖活性，與老年對照組比較P0.01；而藥物實驗組對LPS的增殖活性，與老年對照組比較P0.05。24何首烏對老齡大鼠腹腔巨噬細胞

6、吞噬功能的影響實驗前3天，腹腔注射2%糖原2mL作為巨噬細胞誘導劑。測時脫頸椎處死小鼠，用pH6.5~pH6.7的無鈣鎂Hank′s液2mL洗出全部腹腔巨噬細胞，取1mL腹腔洗液置于5mL離心管中，加入10%雞紅細胞0.2mL，插入5×20mm2蓋玻片條，經(jīng)37℃30min后取出，洗滌，固定，姬姆薩染色，油鏡下計數(shù)巨噬細胞吞噬百分率，并計算其吞噬指數(shù)［7］。結(jié)果見表1。表1何首烏對老齡大鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響（略）注：*與青年對照組比較，P0.001；**與老年對照組比較，P0.01。表1結(jié)果顯示，與青年對照組比較，老年對照組腹腔巨噬細胞吞

7、噬功能明顯低下(P0.001)；與老年對照組比較，藥物實驗組腹腔巨噬細胞吞噬功能明顯增強(P0.01)。3討論免疫衰老狀態(tài)下的機體，脾淋巴細胞過度凋亡，其免疫應答功能下降、細胞因子水平低下、免疫監(jiān)視功能減退。有報道提示，隨著衰老，每一種細胞因子不同分泌量的變化都對免疫衰老進程有不同影響，如Th1類細胞因子減少，Th2類細胞因子分泌增多，伴隨著這種Th1/Th2的不平衡可顯著刺激Th3呈高分泌狀態(tài)，導致機體的抗免疫衰老機制受到嚴重干擾［2］。衰老狀態(tài)下，B細胞的成熟過程明顯減慢，成熟周期延長，其各亞型的活力不同程度下降，產(chǎn)生抗體的能力及免疫應答反應

8、亦隨增齡而降低；老年機體胸腺細胞數(shù)減少，T細胞增殖力也低下，在T細胞亞群中，胸腺細胞毒型T細胞（CTL）的免疫殺傷活性明顯下降，對同種細