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1、華蓋散傳統(tǒng)湯劑與顆粒湯劑中苦杏仁苷的含量比較論文趙楊,靳鳳云,賀祝英,廖薇,梁光義【摘要】目的測(cè)定華蓋散傳統(tǒng)湯劑與顆粒湯劑中苦杏仁苷的含量。方法采用高效液相色譜(HPLC)法。選用AgilentXDB-C18柱,流動(dòng)相為以甲醇-水(23∶77),檢測(cè)波長(zhǎng)為215nm波長(zhǎng)。結(jié)果苦杏仁苷的含量在傳統(tǒng)湯劑與顆粒湯劑中有顯著性差異,顆粒湯劑中平均含量大于傳統(tǒng)湯劑中平均含量。結(jié)論該測(cè)定方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確.freelinetheLaetrileinthetraditionaldecoctionandkerneldecoctionofHuagaiSan.MethodsHPLCnob
2、ilephaseethanol-.ResultsThecontentofLaetrileintraditionaldecoctionandkerneldecoctionhadobviousdiscrepancies,theaveragecontentinkerneldecoctionorethanthatintraditionaldecoction.ConclusionThemethodissimple,convenient,exactandreproducible,theotheringredientsdonothaveinterferencesforthede
3、termination.Keym×150mm,5μm);流動(dòng)相為甲醇-水(23∶77);流速0.8ml/min;柱溫25℃;檢測(cè)波長(zhǎng)215nm。色譜圖見(jiàn)圖1~5。2.2對(duì)照品溶液的制備精密稱取苦杏仁苷對(duì)照品適量,按《中國(guó)藥典》2005版[2],制成濃度為0.16mg/ml的苦杏仁苷對(duì)照品溶液。2.3供試品溶液的制備2.3.1傳統(tǒng)湯劑供試液的制備稱取藥材粉末(粗粉),其中麻黃9.0g,杏仁9.0g,炙甘草6.0g,桑白皮9.0g,紫蘇子9.0g,陳皮9.0g,茯苓9.0g,浸泡20min,加水至藥面上4cm,沸后30min,濾過(guò),濾渣加水至藥面上4cm,沸后20mi
4、n,濾過(guò),合并兩次濾液,濃縮,干燥。精密稱取干浸膏粉約0.2g,置于具塞三角錐形瓶中,精密加入甲醇25ml,稱重,超聲提取30min,取出,放冷,補(bǔ)至原重,濾過(guò),續(xù)濾液過(guò)0.45μm微孔濾膜,得苦杏仁苷供試品溶液。2.3.2顆粒湯劑供試液的制備稱取杏仁藥粉,加8倍量水煎煮兩次,60min/次,合并兩次煎液,制成杏仁煎液,干燥。精密稱取干浸膏粉適量,同供試品的制備方法制得顆粒湯劑供試品溶液。2.4線性關(guān)系精密吸取苦杏仁苷對(duì)照品溶液適量5份,分別置于10ml容量瓶中,稀釋至刻度,制成不同濃度的苦杏仁苷對(duì)照品溶液。精密吸取相應(yīng)量注入色譜柱,測(cè)定峰面積,以峰面積(A)對(duì)進(jìn)
5、樣量(C)作線性回歸,回歸方程為A=1143.85C-3.81485,r=0.9997,苦杏仁苷在0.16~0.80μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。2.5精密度實(shí)驗(yàn)精密吸取同一苦杏仁苷對(duì)照品溶液,連續(xù)進(jìn)樣5次,測(cè)定峰面積,RSD為0.18%,表明精密度良好。2.6穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取供試品溶液,按照“2.1”項(xiàng)色譜條件,分別于0,2,4,6,8h進(jìn)樣,測(cè)定峰面積,傳統(tǒng)湯劑和顆粒湯劑中苦杏仁苷峰面積的RSD分別為2.48%,2.22%。說(shuō)明供試品溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定。2.7重復(fù)性實(shí)驗(yàn)按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液5份,按照“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定,傳統(tǒng)湯劑和顆粒湯劑中苦杏仁苷
6、峰面積的RSD分別為0.93%,2.07%,說(shuō)明重復(fù)性良好。2.8加樣回收率實(shí)驗(yàn)精密稱取已知含量的顆粒湯劑干浸膏粉9份,按苦杏仁苷含量的80%,100%,120%加入苦杏仁苷對(duì)照品溶液,按照“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液,測(cè)定峰面積,計(jì)算回收率。結(jié)果見(jiàn)表1。表1加樣回收率實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果(略)2.9樣品測(cè)定精密吸取傳統(tǒng)湯劑和顆粒湯劑供試品溶液,分別進(jìn)樣,測(cè)定峰面積,用外標(biāo)法計(jì)算傳統(tǒng)湯劑和顆粒湯劑中苦杏仁苷的含量。結(jié)果見(jiàn)表2。表2苦杏仁苷的含量(略)采用無(wú)重復(fù)雙因素方差分析比較顆粒湯劑與傳統(tǒng)湯劑間苦杏仁苷含量的差異。結(jié)果見(jiàn)表3。表3苦杏仁苷無(wú)重復(fù)雙因素方差分析(略)由
7、表3可知,華蓋散傳統(tǒng)湯劑與顆粒湯劑之間,苦杏仁苷的含量有顯著性差異。不同處理方法對(duì)苦杏仁苷的含量有一定的影響,采用傳統(tǒng)煎煮方法得到的傳統(tǒng)湯劑其平均含量低于顆粒湯劑的平均含量。3討論本實(shí)驗(yàn)采用HPLC法測(cè)定華蓋散中有效成分苦杏仁苷的含量,在文獻(xiàn)報(bào)道[3,4]的基礎(chǔ)上結(jié)合《中國(guó)藥典》(2005版)的記載,選定適合的流動(dòng)相測(cè)定該成分,其與雜質(zhì)峰均能達(dá)到基線分離,方法簡(jiǎn)單可行,重復(fù)性好。華蓋散顆粒湯劑中苦杏仁苷的含量高于傳統(tǒng)湯劑中的含量,采用現(xiàn)代統(tǒng)計(jì)方法分析其所得數(shù)據(jù),得出兩種湯劑之間其含量存在著顯著性差異,可能是傳統(tǒng)湯劑在煎煮過(guò)程中藥材中的化學(xué)成分相互作用,從而影響了有
8、效成分的溶