真菌的分離培養(yǎng)和鑒定論文

真菌的分離培養(yǎng)和鑒定論文

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1、內(nèi)蒙古廣播電視大學(xué)“一村一名大學(xué)生計(jì)劃”畢業(yè)作業(yè)作業(yè)題目真菌的分離培養(yǎng)和鑒定___教學(xué)點(diǎn)名稱:包頭廣播電視大學(xué)_學(xué)員姓名:張瑞光__________學(xué)號(hào):1015004452077___專業(yè):畜牧獸醫(yī)??芲___入學(xué)時(shí)間:2010秋_________指導(dǎo)教師:楊瑞芳_________真菌的分離培養(yǎng)和鑒定【摘要】:從發(fā)霉的紅薯上和酸敗腐爛的蘋果上挑取霉變物用沙堡瓊脂培養(yǎng)基28℃培養(yǎng)2-3天,分離出幾個(gè)真菌菌株。將分離株重新進(jìn)行平板劃線分離,挑取單菌落表面的少許孢子用馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行載片小

2、培養(yǎng),經(jīng)28℃培養(yǎng)2—3天于低倍鏡下觀察,通過(guò)菌絲和孢子對(duì)分離株進(jìn)行鑒定。觀察到簇生在分生孢子梗的頂端的呈帚狀分枝的分生孢子和有隔菌絲,可鑒定為青霉類菌;觀察到分生孢子梗上呈輪狀著生、具有3個(gè)分隔、彎曲的孢子,可鑒定為彎孢霉類菌;觀察到單細(xì)胞的芽殖孢子,并通過(guò)進(jìn)一步的酵母菌生理生化測(cè)定,可鑒定為酵母菌。?【關(guān)鍵詞】:真菌;菌落;菌絲;孢子1前言??真菌一詞來(lái)源于拉丁文的“蘑菇”,現(xiàn)在真菌這一名詞的概念不僅包括蘑菇,而是代表著一個(gè)相當(dāng)龐大的生物類群。什么是真菌呢?從生物學(xué)的觀點(diǎn)來(lái)看,它們是一大類真

3、核微生物,無(wú)根莖葉,不含葉綠素,不能利用無(wú)機(jī)物來(lái)制造食物,靠寄生或腐生生活,僅少數(shù)為單細(xì)胞,其余為多細(xì)胞,大多數(shù)真菌有分枝或不分枝的絲狀體,能進(jìn)行有性生殖和無(wú)性生殖。從形態(tài)上分為酵母菌、霉菌、擔(dān)子菌。???其實(shí),真菌并不像其看起來(lái)的這般抽象,在我們的日常生活中幾乎到處都有它們的存在,我們每個(gè)人都有過(guò)接觸和不同程度的感性認(rèn)識(shí)。例如釀酒、制饅頭用的酵母;酒曲的曲種(曲霉和根霉);做豆腐乳的毛霉和紅曲霉;發(fā)酵飼料的黑曲霉;味美可口的蘑菇、木耳、銀耳、猴頭;作為中藥的神曲、麥角、蟲草、茯苓、靈芝;此外還

4、有食品、衣物、用具等因潮濕而發(fā)生的霉;引起農(nóng)作物病害的小麥銹病等等都是真菌。???真菌與細(xì)菌的大小、形態(tài)、結(jié)構(gòu)及化學(xué)組成差異很大,單細(xì)胞個(gè)體比細(xì)菌大幾倍至幾十倍,具有細(xì)胞壁,但不含細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖。有些真菌因環(huán)境條件的改變而改變形態(tài),稱之為真菌的兩相性,如假皮疽組織胞漿菌在動(dòng)物機(jī)體呈酵母菌樣。而在人工培養(yǎng)基上呈絲狀。???真菌不僅種類多,數(shù)量大,而且分布極為廣泛,與人類生產(chǎn)與生活有著極密切的利害關(guān)系。有些菌絲可引起人與畜禽疾病,有些霉菌還產(chǎn)生毒素,直接或間接的危害人類健康。因此,了解真菌的培養(yǎng)

5、方法,認(rèn)識(shí)其形態(tài)十分重要。????近年來(lái)在真菌分類方面趨向于采用Anisworth&bisby的《真菌學(xué)辭典》介紹的分類系統(tǒng)。該系統(tǒng)認(rèn)為真菌不屬于低等植物,而是屬于單獨(dú)成立的真菌界,界以下分為黏菌門和真菌門。真菌門再分為鞭毛菌亞門、接合菌亞門、擔(dān)子菌亞門和半知菌亞門。本研究從自然界分離到幾株真菌,并用真菌分類方法對(duì)其進(jìn)行了鑒定。2材料2.1病料???發(fā)了霉的紅薯、酸敗腐爛的蘋果2.2培養(yǎng)基2.2.1沙堡瓊脂培養(yǎng)基成分:蛋白胨10克、麥芽糖40克、瓊脂20克、蒸餾水1000毫升2.2.2馬鈴薯葡萄

6、糖瓊脂培養(yǎng)基成分:馬鈴薯200克、葡萄糖20克、瓊脂20克、蒸餾水1000毫升2.2.3保存瓊脂培養(yǎng)基成分:蛋白胨10克、瓊脂20克、蒸餾水1000毫升????2.3器材???無(wú)菌室、手提式高壓蒸汽滅菌鍋、電爐、天平、鐵架臺(tái)、滅菌培養(yǎng)皿、錐形瓶、漏斗、試管、燒杯、膠頭滴管、石蕊試紙、接種環(huán)、酒精燈、量筒、玻璃棒、紗布、濾紙、試管塞、報(bào)紙、扎繩、標(biāo)簽、溫箱、冰箱、蓋玻片、載玻片、顯微鏡、杜氏管3方法3.1真菌的分離培養(yǎng)3.1.1實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備???沙堡瓊脂培養(yǎng)基的制備:用天平稱取蛋白胨10克、麥芽糖4

7、0克、瓊脂20克,用量筒量取蒸餾水1000毫升置燒杯中混勻,在電爐上加熱熔化,加熱過(guò)程中不斷用玻璃棒攪拌,調(diào)整PH值至5.4,倒入錐形瓶中,115℃滅菌20分鐘,傾注平板,冷卻[1]。???無(wú)菌室、接種箱的清潔:用酒精棉球?qū)⒔臃N箱的內(nèi)部全部擦洗干凈,放入試管架、酒精燈、標(biāo)簽、接種環(huán)、筆、火柴等實(shí)驗(yàn)用具放入接種箱內(nèi),密封接種箱。依次打開接種箱與無(wú)菌室的紫外燈,紫外線滅菌20分鐘。3.1.2劃線分離培養(yǎng)在酒精燈火焰下進(jìn)行以下操作:?(1)從發(fā)霉的紅薯上和酸敗腐爛的蘋果上挑取霉變物用28℃培養(yǎng)2-3天

8、,分離出幾個(gè)真菌菌株。將分離株重新進(jìn)行平板劃線分離,挑取單菌落表面的少許孢子用馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行載片小培養(yǎng),經(jīng)28℃培養(yǎng)2—3天于低倍鏡下觀察,通過(guò)菌絲和孢子對(duì)分離株進(jìn)行鑒定。??(2)左手持皿,用左手的拇指、食指及中指將皿蓋揭開20度左右的角度(角度越小越好,以免空氣中的細(xì)菌進(jìn)入皿中將培養(yǎng)基污染)。劃線前先將接種環(huán)稍稍彎曲,這樣易和平皿內(nèi)瓊脂面平行,不致劃破培養(yǎng)基。??(3)右手持接種環(huán),將上述霉變物分區(qū)劃線接種于沙堡瓊脂培養(yǎng)基平板中,劃完前一個(gè)區(qū)域后將接種環(huán)在火焰上灼燒滅菌,冷卻后與

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