資源描述：
《凋亡抑制蛋白survivin在骨肉瘤中的表達及其與pten、cyclind1蛋白表達的關(guān)系論文》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、凋亡抑制蛋白Survivin在骨肉瘤中的表達及其與PTEN、cyclinD1蛋白表達的關(guān)系論文【摘要】［目的］探討Survivin基因的表達在骨肉瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用及其與PTEN、cyclinD1蛋白表達的相互關(guān)系。［方法］應(yīng)用免疫組化（SP）法檢測40例骨肉瘤組織、20例骨軟骨瘤組織中Survivin、PTEN、cyclinD1蛋白的表達情況以及Survivin與PTEN、cyclinD1蛋白兩者之間的相關(guān)性。［結(jié)果］Survivin在骨肉瘤中的陽性率為62.5%（25／40），明顯高于對照組骨軟骨瘤10.0%（2／20）的陽
2、性率（P＜0.01）。PTEN蛋白在骨肉瘤中的陽性表達率為52.5%（21／40），而在骨軟骨瘤中為95.0%（19／20），兩者相比有顯著差異（P＜0.01）。cyclinD1蛋白在骨肉瘤中的陽性率為80.0%（32／40），高于在骨軟骨瘤中的45.0%（9／20），有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。Survivin和PTEN兩者表達強度之間呈顯著負相關(guān)（P＜0.01），而Survivin與cyclinD1表達呈正相關(guān)（P＜0.01）。［結(jié)論］Survivin在骨肉瘤組織中過表達與骨肉瘤的發(fā)生有關(guān)；PTEN在骨肉瘤組織中失表達，它可
3、能下調(diào)Survivin表達.freelanosteosaraanditscorrelationmonohistochemicalmethod（SPmethod）atissues.［Result］TheexpressionrateofSurvivina（10.0%）（P＜0.01）.TheexpressionofPTENa（95.0%）thanthatinosteosara（52.5%）（P＜0.01）.ThepositiveexpressionrateofcyclinD1a（45.0%）.ThereaandPTENcandoayp
4、layanpromotingroleandPTENmayplayanprotectiveroleinthedevelopmentofosteosara.SurvivinamdcyclinD1mightplaysynergetierolesintheprocessofosteosara.Keymunohistochemistry骨肉瘤是最常見的骨原發(fā)性惡性腫瘤，好發(fā)于青少年，對化療和放療敏感性較低，預(yù)后差，易復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，5年生存率低。目前，在骨肉瘤的診斷和治療方面尚缺乏有效的指標及方法。Survivin是近年來發(fā)現(xiàn)的一種細胞凋亡抑制
5、蛋白家族成員，除具有較強的抑制細胞凋亡作用外，還有調(diào)節(jié)細胞周期和腫瘤血管保護等多種生物學特性。它選擇性表達于多種常見的惡性腫瘤，而在癌旁正常組織和成人分化組織中不表達。PTEN是人類發(fā)現(xiàn)的第1個具有酪氨酸磷酸酶作用的抑癌基因，在調(diào)控細胞生長以及凋亡過程中也發(fā)揮著重要的作用。本文利用免疫組化技術(shù)檢測Survivin、PTEN和cyclinD1蛋白在骨肉瘤中的表達，初步探討Survivin在骨肉瘤發(fā)病機理中的作用以及其與PTEN、cyclinD1相互間的關(guān)系。1材料與方法1.1標本來源所以病例均為收集青島大學醫(yī)學院附屬醫(yī)院骨科2001
6、年1月～2005年6月手術(shù)切除標本。其中骨肉瘤標本40例，術(shù)前均未行放療及化療。男28例，女12例;平均年齡19.6歲（9～60歲），所有標本均經(jīng)病理證實。根據(jù)Enneking外科分期，Ⅰ級8例，Ⅱ級21例，Ⅲ級11例；組織學分型中骨母細胞型16例，纖維母細胞型13例，軟骨母細胞型7例，其他類型（血管擴張型、混合型）4例。每例骨肉瘤病例均經(jīng)臨床、影像學和病理三者結(jié)合確診。選取同期骨軟骨瘤標本20例作為對照。所有組織標本均來自本院病理科存檔石蠟塊，經(jīng)10%甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，3μm厚連續(xù)切片。1.2試劑與方法采用免疫組織化學染色
7、法（SP法）。一抗Survivin兔抗人單克隆抗體、PTEN鼠抗人單克隆抗體及cyclinD1鼠抗人單克隆抗體以及SP試劑盒均為北京中杉金橋生物技術(shù)公司產(chǎn)品；一抗工作濃度均為1∶50。實驗步驟嚴格按試劑盒說明書進行。石蠟切片脫蠟至水，3%過氧化氫室溫孵育10min〔1〕，以微波枸櫞酸鹽進行抗原修復(fù)，正常羊血清封閉20min，DAB顯色，蘇木精復(fù)染，脫水，透明封片，中性樹膠封固。用已知陽性切片作為陽性對照，用PBS代替一抗，作為陰性對照。1.3結(jié)果判定標準參照Fromoan等級相關(guān)進行統(tǒng)計學分析。2結(jié)果2.1Survivin、PTE
8、N和cyclinD1在骨肉瘤、骨軟骨瘤中的表達Survivin、PTEN和cyclinD1的陽性染色均為棕黃色顆粒，前兩者表達部位在細部漿，后者表達于細胞核（圖1～3）。三者在骨肉瘤組織中的表達率顯著高于其在骨軟骨瘤組織中的表達，差異有顯著性（P＜
