nyt402-2000 脫毒甘薯種薯(苗)病毒檢測技術(shù)規(guī)程

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1、B15N.,中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T402-2000脫毒甘薯種薯(苗)病毒檢測技術(shù)規(guī)程Rulesforvirusdetectionofvirus-freeseed(seedling)sweetpotatoes2000一09一22發(fā)布2000一12一01實(shí)施中華人民共和國農(nóng)業(yè)部發(fā)布NY/T402-2000前言為了有效地實(shí)施對脫毒甘薯種薯(苗)質(zhì)量檢驗(yàn)和管理,規(guī)范脫毒甘薯種薯(苗)市場,促進(jìn)甘薯脫毒技術(shù)推廣,實(shí)現(xiàn)脫毒甘薯種薯(苗)病毒檢測的規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化,特制定本規(guī)程。本規(guī)程在參照國內(nèi)外甘薯病毒檢測技術(shù)最

2、新研究進(jìn)展的基礎(chǔ)上,結(jié)合當(dāng)前國內(nèi)生產(chǎn)實(shí)際,力求達(dá)到快速、準(zhǔn)確、可操作性強(qiáng)的檢測要求。檢測對象主要選擇生產(chǎn)上發(fā)生分布范圍廣、危害性大的病毒。檢測方法主要采用指示植物檢測和斑點(diǎn)酶聯(lián)免疫吸附檢測方法。本規(guī)程內(nèi)容包括脫毒甘薯種薯(苗)病毒檢測的適用范圍、檢測對象、抽樣方法、檢測方法和質(zhì)量要求。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A、附錄B都是標(biāo)準(zhǔn)的附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草單位:農(nóng)業(yè)部植物脫毒種苗質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測試中心(濟(jì)南)、山東省植物保護(hù)總站。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:孫作文、商明清、李明立、劉敬東、楊勤民、任寶珍。中華

3、人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)脫毒甘薯種薯(苗)病毒檢測技術(shù)規(guī)程N(yùn)Y/T402-2000Rulesforvirusdetectionofvirus-freeseed(seedling)sweetpotatoes1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了脫毒甘薯種薯(苗)的病毒檢測方法和操作規(guī)程。本標(biāo)準(zhǔn)適用于脫毒甘薯種薯(苗)的病毒檢測。2定義本標(biāo)準(zhǔn)采用下列定義。2.1脫毒苗應(yīng)用莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)獲得的再生試管苗,經(jīng)檢測確認(rèn)不帶甘薯羽狀斑駁病毒(SPFMV)和甘落潛隱病毒(SPLV),才確認(rèn)是脫毒苗。2.2脫毒種薯(苗)從繁殖脫毒苗開始,經(jīng)逐代繁

4、殖增加種薯(苗)數(shù)量的種薯(苗)生產(chǎn)體系生產(chǎn)出來的。分原原種、原種、生產(chǎn)用種三個(gè)級別。2.2.1原原種pre-elite用脫毒苗在防蟲網(wǎng)室、溫室條件下生產(chǎn)的符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的種薯(苗)。2.2.2原種elite用原原種作種薯,在良好隔離條件下生產(chǎn)出的符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的種薯(苗)。2.2.3生產(chǎn)用種certifiedseedorseedling用原種作種薯,在隔離條件下生產(chǎn)出的符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的種薯(苗)。2.3病毒病株允許率指各級甘薯種薯(苗)繁殖田中病毒病株的允許比率。3檢測對象甘薯羽狀斑駁病毒(Sweetpotatof

5、eatherymottlevirus,SPFMV)=甘薯潛隱病毒(Sweetpotatolatentvirus,SPLV),4抽樣41組培苗抽樣4.1.1脫毒核心材料:每株必須檢測。4.1.2擴(kuò)繁苗:隨機(jī)抽取l0o-2%的擴(kuò)繁苗檢測。4.2田間抽樣4.2.1原原種和原種抽樣:定植后30天、60天、收獲前2周,在目測全田的基礎(chǔ)上,采用五點(diǎn)取樣法,中華人民共和國農(nóng)業(yè)部200。一09.一22批準(zhǔn)2000-12一01實(shí)施tNY/T402-2000抽樣數(shù)量為。.1hm'以下200株;o.11一1hm2500株;超出1hm

6、'面積,劃出另一檢驗(yàn)區(qū),按本規(guī)程規(guī)定的面積取樣。每株取上、中、下部葉片1-5g,低溫保濕存放,24h內(nèi)檢測。4.2.2生產(chǎn)用種抽樣:定植后30天、收獲前兩周,在目測的基礎(chǔ)上,采用隨機(jī)取樣法,0.1hm2以下檢驗(yàn)2點(diǎn),每點(diǎn)100株;0.11^-1hm,檢驗(yàn)五點(diǎn),每點(diǎn)100株;1.1^-5hm,檢驗(yàn)10點(diǎn),每點(diǎn)100株;超出5hm,面積,劃出另一檢驗(yàn)區(qū),按本規(guī)程規(guī)定的面積取樣。取樣方法及樣品保存同4.2.1,4.3商品種薯(苗)抽樣沒有經(jīng)過田間檢驗(yàn)的種薯(苗)必須進(jìn)行塊根或種苗檢驗(yàn)。4.3.1根據(jù)甘薯種薯(苗)不同

7、存放方式,采用分層設(shè)點(diǎn)取樣或隨機(jī)取樣,抽樣數(shù)量見表1,表1抽樣數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)表種類種薯(苗)總量抽樣百分率,%抽樣最低數(shù)量c10000株6--10100株薯苗>10000株3.5簇1ooookg6-10lookg種薯>10000kg3-5注不足抽樣最低數(shù)量的全部作為混合樣品。2將第一次抽取的樣品混合后,進(jìn)行二次抽樣,隨機(jī)抽取10%的混合樣品檢測。5檢測方法5.1X點(diǎn)酶聯(lián)免疫吸附(Dot-ELISA)檢測法用于檢測甘薯羽狀斑駁病毒和甘薯潛隱病毒,檢測方法見附錄A,5.2指示植物檢測法用于輔助檢測甘薯羽狀斑駁病毒和甘薯潛

8、隱病毒,檢測方法見附錄B,檢測甘薯病毒的指示植物及癥狀見表2,表2檢測甘薯病毒的指示植物及癥狀病毒種類}指示植物}癥狀SPFMV巴西牽牛羽狀斑駁SPLV巴西牽牛葉脈變黃6質(zhì)t要求凡斑點(diǎn)酶聯(lián)免疫吸附檢測或指示植物檢測呈陽性者為帶毒薯(苗)。原原種:病毒病株允許率是。。原種:病毒病株允許率<-2.。%。生產(chǎn)用種:病毒病株允許率(10000NY/T402-2000附錄A(標(biāo)準(zhǔn)的附錄)斑點(diǎn)酶聯(lián)

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