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1、廣藿香內生真菌類群分析及其抗菌活性研究關鍵字:廣藿香內生真菌類群分析及其抗菌活性研究本文為Word文檔,感謝你的關注! [摘要]從廣藿香的根、莖、葉中共分離得到72株內生真菌,根據ITS序列分析鑒定為25屬40個種,其中擬莖點霉屬Phomopsis、刺盤孢屬Colletotrichum、鐮刀菌屬Fusarium為優(yōu)勢種群;廣藿香內生真菌的分布存在明顯的組織特異性,以莖中內生真菌的分布最多,占分離菌株總數的78%;活性測試結果顯示共有15個屬34株內生真菌至少對1種供試菌具有抗菌活性。結果表明廣藿香內生真菌多樣性豐富,部分菌株具有明顯的抑菌活性,值得進一步深入研究?! 關鍵詞]內生真
2、菌;多樣性;廣藿香;抗菌活性 [Abstract]Seventy-twostrainsofendophyticfungiwereisolatedfromroots,stemsandleavesofPogostemoncablinandidentifiedas40speciesof25generabasedonITSsequencesanalysis.Amongthem,Phomopsis,ColletotrichumandFusariumweredominantgenera.DistributionofendophyticfungiinP.cablinshowedobvioustis
3、sue-specificity,andmorestrainswereisolatedfromstemswithanisolationrateof78%.Thebioassayresultsindicatedthat34strainsof15generadisplayedantimicrobialactivitiesagainstatleastoneoftestbacteriaorplantpathogenicfungi.TheresultsobtainedinthisstudyshowedthatendophyticfungiinP.cablinwererichinspeciesdiv
4、ersity,andsomestrainsexhibitedstrongantimicrobialactivities,whichdeservefurtherresearch. [Keywords]endophyticfungi;diversity;Pogostemoncablin;antimicrobialactivity 植物內生真菌是指生長在植物體的根、莖、葉及果實等組織和器官內的一類真菌,是植物微生態(tài)系統中的重要組成成分,在進化過程中與宿主植物形成了互惠共生的關系[1]。內生真菌不但能產生結構豐富多樣的次生代謝產物,已從中分離出多種生物活性物質,包括抗菌、抗腫瘤、抗氧化等天
5、然化合物[2-3],而且對植物的生長發(fā)育、活性成分的積累及植物抗逆性具有重要影響[4]。藥用植物中同樣存在著大量的內生真菌[5],中藥成分的形成、種植、抗病性及道地性可能都與內生菌有密切的關系[6],因此,研究藥用植物內生真菌資源的多樣性不僅可以豐富真菌資源寶庫,而且對于中藥資源的保護和可持續(xù)利用具有重要的意義?! V藿香Pogostemoncablin(Blanco)Benth.為唇形科Lamiaceae刺蕊草屬PogostemonDesf.植物,是十大廣藥之一,其入藥最早記載于唐代《新修本草》和《千金翼方》中,自宋、金、元以來已廣泛應用于臨床。它具有芳香化濁、和中止嘔以及發(fā)表解暑的
6、功能,用于胸悶不舒、寒濕閉暑、腹痛吐瀉、鼻淵頭痛的治療[7]。現代藥理學研究表明,廣藿香具有抗菌、抗腫瘤、抗氧化、殺蟲等作用[8-11]。目前,對廣藿香內生真菌的研究鮮有報道,為了探討廣藿香內生真菌的多樣性、群落組成及其分布特征,本研究對其內生真菌進行了系統的分離和鑒定,并對分離得到的菌株發(fā)酵粗提物進行抗菌活性研究,旨在篩選出具有良好抗菌活性的菌株,為廣藿香內生真菌的資源保護和開發(fā)利用提供基礎資料和科學依據?! ?材料 1.1儀器與試劑RE-2000型旋轉蒸發(fā)儀,上海亞榮生化儀器廠;超凈工作臺,上海恒益科技有限公司;YXQ-WY21-600電熱高壓蒸汽滅菌鍋,廣州市華南醫(yī)療器械有限公
7、司;THZ-C-1搖床,廣州市正一科技有限公司;Mastercyclergradient5331PCR儀,Eppendof公司;EPS3501電泳儀,AmershamPharmaciaBiotech公司。氨芐青霉素、硫酸卡那霉素、二甲基亞砜(DMSO),均購自Sigma公司;Taq酶、DNA提取試劑盒,均購自大連寶生物工程有限公司;乙酸乙酯,廣州化學試劑廠?! ?.2植物與內生真菌廣藿香植物于2012年10月采自廣東陽春市馬水鎮(zhèn),由廣東藥科大學