大豆粕堿性蛋白酶水解肽及ace抑制活性的研究

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1、大豆粕堿性蛋白酶水解肽及ACE抑制活性的研究作者簡介：溫雪琴（1989—），女，（漢），碩士研究生，研究方向：微生物應(yīng)用及發(fā)酵工程。通信作者：馮欣（1981—），女，（漢），實驗師，碩士研究生，微生物應(yīng)用及發(fā)酵工程。溫雪琴1，劉屾1，黃弢1，趙嘉希2，馮欣1*，孫建華1（1.天津市動植物抗性重點實驗室，天津師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，天津300387；2.天津科技大學(xué)，天津300222)摘要：豆粕是大豆經(jīng)浸提脫脂后得到的副產(chǎn)品，含有大量的大豆蛋白，其水解物對血管緊張素轉(zhuǎn)移酶（ACE）具有明顯的抑制作用和降壓效果。結(jié)果表明：以食品級豆粕為原料，經(jīng)堿性蛋白酶水解后得到的ACE抑制肽在pH8.0，溫度5

2、0℃，豆粕底物濃度40g/L的條件下，酶解3h得到的產(chǎn)物ACE抑制活性最高，為64.21％，對應(yīng)水解度14.86％；進一步對ACE抑制肽進行高效液相色譜（HPLC）以及超高壓液相色譜/四極桿-飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀(LC-MS)的分析結(jié)果顯示：活性物質(zhì)的主要組分為三肽化合物，分子量為359，分子式為C15H30N6O4，由異亮氨酸、精氨酸和丙氨酸構(gòu)成；其HPLC檢測條件為色譜柱：Zorbax300SB-C18，5μm，4.6×150mm；檢測波長：228nm，流動相：50%甲醇-超純水，各含0.1%三氟乙酸；流速：0.7mL/min；柱溫：26℃；進樣量：10μL。關(guān)鍵詞：豆粕；堿性蛋白酶；

3、ACE抑制肽；高效液相色譜法HPLC；ACEinhibitoryActivityonHydrolyticPeptidesfromSoybeanMealhydrolyzedbyAlkalineProteaseWENXue-qin1，LIUShen1，HUANGTao1，ZHAOJia-xi2，F(xiàn)ENGXin1*，SUNJian-hua1(1.TianjinKeyLaboratoryofAnimalsandPlantsResistance，CollegeofLifeSciences，TianjinNormalUniversity，Tianjin，300387，PRChina；2.TianjinU

4、niversityofScienceandTechnology，Tianjin300222，China)Abstract：Soybeanmeal,asabyproductofsoybeanoilmanufacture,containsmainlyofprotein.Peptidesderivedfromtheproteinhadbeenproventobeangiotensin-convertingenzyme(ACE)inhibitoryandantihypertensiveeffect.Food-gradesoybeanmealwashydrolyzedbyalcalaseforthep

5、reparationofACEinhibitorypeptides.TheoptimumenzymolyticconditionsforthepreparationwereatpH8.0,55℃for3handasubstrateconcentrationof40g/L.TheACEinhibitoryactivityandthedegreeofhydrolysis(DH)wereseparatelyhighupto64.21％and14.86%.Subsequentdetectionofhighperformanceliquidchromatographic(HPLC)andHighpre

6、ssureliquidchromatography/quadrupole-timeofflighttandemmassspectrometry(LC-MS)suggestedthattheactivefractionmightbetripeptidewithmolecularweightof359andthemolecularformulaofC15H30N6O4whichconstituteofIsoleucine,ArginineandAlanine.ItsHPLCconditionsweredeterminedasfollows:column,ZORBAXSB-C18(4.6mmid×

7、150mm,5um);detectionwavelength,228nm;mobilephase,methanol-ultra-purewater(50:50,v/v,bothcontaining0.1%(v/v)trifluoroaceticacid;flowrate,0.7mL/min;column;temperature,26℃;samplesize,10μl.Keywords：Soybeanmeal;