活細(xì)胞工作站 及應(yīng)用案例簡(jiǎn)介

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1、知識(shí)是浩瀚的海洋發(fā)奮識(shí)遍天下字，立志讀盡人間書活細(xì)胞工作站及應(yīng)用案例介紹關(guān)鍵詞：活細(xì)胞工作站,CV1000,6D活細(xì)胞成像,3D成像,激光共聚焦顯微鏡,四轉(zhuǎn)盤掃描,雙轉(zhuǎn)盤掃描,YOKOGAWA,最長(zhǎng)掃描時(shí)間活細(xì)胞工作站可實(shí)現(xiàn)在細(xì)胞水平上的定性和定量分析、活細(xì)胞圖像處理、活細(xì)胞動(dòng)態(tài)示蹤。在分子水平上，可做到基因定位定量表達(dá)的動(dòng)態(tài)分析、蛋白質(zhì)合成講解運(yùn)輸和相互作用的動(dòng)態(tài)研究、細(xì)胞骨架的代謝動(dòng)力學(xué)測(cè)定和細(xì)胞周期各時(shí)相的動(dòng)態(tài)觀察等?，F(xiàn)在市場(chǎng)上有眾多的活細(xì)胞工作站、激光共聚焦觀察系統(tǒng)等，下面以Yokogawa

2、的CV1000為例介紹此類型的活細(xì)胞工作站。CV1000活細(xì)胞動(dòng)態(tài)成像系統(tǒng)是定位于長(zhǎng)時(shí)間、多時(shí)相、6D活細(xì)胞成像的一體化共聚焦系統(tǒng)，它整合了顯微鏡，共聚焦光路系統(tǒng)，以及活細(xì)胞工作站等諸多模塊于一體，不需暗室操作并且集成了溫度、濕度控制等繁瑣過程。整套安裝簡(jiǎn)易，操作簡(jiǎn)單，使用方便，并且廠家攜代理商提供完善的售后服務(wù)。CV1000使用的四轉(zhuǎn)盤共聚焦掃描頭，最大限度地降低了光毒性和光漂白。CV1000是目前唯一的能長(zhǎng)時(shí)間對(duì)胚胎做3D成像，然后被觀察的胚胎細(xì)胞能順利發(fā)育為健康成體小鼠的系統(tǒng)。該系統(tǒng)的精確的溫

3、度控制系統(tǒng)（精確度可達(dá)0.1℃），使得干細(xì)胞，胚胎，以及其他細(xì)胞可在穩(wěn)定的溫度環(huán)境中生長(zhǎng)，精確地完成您的實(shí)驗(yàn)操作。四轉(zhuǎn)盤共聚焦掃描系統(tǒng)，以及獨(dú)一無二的為轉(zhuǎn)盤共聚焦優(yōu)化的雙針孔設(shè)計(jì)，為活細(xì)胞的觀察在技術(shù)水平上提供了雙保險(xiǎn)，使得CV1000更適合于非常適合于精確度要求極高的生命過程的觀察，如癌癥，發(fā)育生物學(xué)，干細(xì)胞研究等領(lǐng)域的長(zhǎng)時(shí)高速6D成像，尤其適合于腫瘤細(xì)胞的增殖和遷移，干細(xì)胞增殖和分化，iPS細(xì)胞成像，胚胎發(fā)育，轉(zhuǎn)基因細(xì)胞，細(xì)胞周期觀察等領(lǐng)域。此外，在活細(xì)胞觀察中至關(guān)重要的溫度控制，不僅可以影響活

4、細(xì)胞在觀察過程中的生長(zhǎng)狀態(tài)，還會(huì)引起Z軸漂移。YOKOGAWA在CV1000嚴(yán)格控制了機(jī)箱內(nèi)的溫度，結(jié)合其一體化的設(shè)計(jì)使得溫度控制可精確到0.1℃，并在檢測(cè)的14天范圍內(nèi)保持恒定。其X-Y軸的回復(fù)度也達(dá)到了業(yè)內(nèi)的頂端水平，可實(shí)際操作步徑精確到0.1微米，顯示步徑精確到8nm。一、主要技術(shù)優(yōu)勢(shì)?極低的光毒性：高速轉(zhuǎn)盤式掃描（CSU四轉(zhuǎn)盤掃描系統(tǒng)），將光毒性降至最低；?高品質(zhì)成像：極高靈敏度的EMCCD，保證圖像質(zhì)量；?可靠的環(huán)境控制：高精確度的溫度，濕度，CO2控制；?界面友好：人性化的操作軟件，易于

5、上手；?一體化的設(shè)計(jì)：無需暗室，防止污染，條件可控；?可調(diào)節(jié)針孔尺寸：25μm和50μm兩種選擇，保證在任何放大倍數(shù)下都能獲得清晰的成像質(zhì)量（10X-40X推薦用25μm針孔，63X-100X推薦用50μm針孔）。------精品word文檔值得下載--------------------------------------------------------------------------------------知識(shí)是浩瀚的海洋發(fā)奮識(shí)遍天下字，立志讀盡人間書轉(zhuǎn)盤式掃描與傳統(tǒng)單點(diǎn)掃描的區(qū)別：1、

6、單點(diǎn)掃描，單點(diǎn)激光掃描頭逐點(diǎn)逐行的掃描樣品，以PMT采集信號(hào)，就是常見的點(diǎn)掃描共聚焦--即傳統(tǒng)激光共聚焦系統(tǒng)。2、轉(zhuǎn)盤式是多點(diǎn)同步掃描，以Yokogawa的轉(zhuǎn)盤掃描頭為例，轉(zhuǎn)盤上分布有20000個(gè)螺旋排列的針孔，而激光光源覆蓋約2000個(gè)針孔的范圍（即掃描區(qū)域），借助轉(zhuǎn)盤的轉(zhuǎn)動(dòng)（針孔位置隨之改變），實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品的完整掃描。相當(dāng)于2000個(gè)激光點(diǎn)同步照射樣品，同步激發(fā)，CCD上同步采集，所以掃描速度非常的快。3、微透鏡增強(qiáng)型的雙轉(zhuǎn)盤式是目前活細(xì)胞共聚焦最先進(jìn)的技術(shù)，它大大提高了激光的利用率，掃描速度快，

7、靈敏度高，光漂白和光毒性水平低，最適合活細(xì)胞、快速、6D掃描研究。------精品word文檔值得下載--------------------------------------------------------------------------------------知識(shí)是浩瀚的海洋發(fā)奮識(shí)遍天下字，立志讀盡人間書應(yīng)用領(lǐng)域一、細(xì)胞生物學(xué)：細(xì)胞分裂，細(xì)胞周期，微絲微管動(dòng)態(tài)分布，懸浮細(xì)胞培養(yǎng)觀察；1.成肌細(xì)胞的分裂：小鼠成肌細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)和分裂，在拍攝20分鐘后，培養(yǎng)基中加入壓力誘導(dǎo)因子?？偟呐臄z時(shí)間為

8、25小時(shí)（250秒的時(shí)間間隔）。Zstroke：20um（1umspacing,21slicesintotal）MIPimagesareshown.Total25hoursat250secinterval.Objective:60XoilNumberofField:25(5x5)2.細(xì)胞周期小鼠乳腺癌細(xì)胞用GFP（綠色）或者mCherry（紅色）標(biāo)記細(xì)胞組蛋白，兩種細(xì)胞呈現(xiàn)出不同分化趨勢(shì)，GFP標(biāo)記的細(xì)胞分化成為腫瘤塊，mCherry標(biāo)記的細(xì)胞沒有分化。總的拍攝時(shí)間為