凝血酶原時(shí)間(pt)測(cè)定

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1、操作規(guī)程出凝血2.1凝血酶原時(shí)間(PT)測(cè)定(第四版)出凝血2.2原理:待測(cè)血漿加入過量的含鈣組織凝血活酶,使凝血酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槟?,后者使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白,測(cè)定凝固所需時(shí)間,即為待測(cè)血漿凝血酶原時(shí)間。是外源性凝血系統(tǒng)較理想和常用的篩選試驗(yàn)。出凝血2.3標(biāo)本處理:患者處于休息狀態(tài)下,采空腹靜脈血(急診病人除外)。采血者應(yīng)技術(shù)熟練,“一針見血”,以防止組織損傷,使外源性凝血因子進(jìn)入標(biāo)本。最好不與其它實(shí)驗(yàn)一起采集而使血液停留在針管的時(shí)間延長(zhǎng)。采完血后,將血液沿管壁緩緩注入試管,避免產(chǎn)生氣泡;然后迅速將血

2、液和抗凝劑輕輕顛倒混勻,避免用力震蕩。全血要在1小時(shí)內(nèi)分離血漿。分離乏血小板血漿時(shí),要在室溫下3000rpm離心10分鐘,室溫下可存放4小時(shí)。全部試驗(yàn)不能在4小時(shí)內(nèi)完成,應(yīng)將乏血小板血漿分裝在0.5~1.0ml的小試管中快速冷凍,儲(chǔ)存于-20℃冰箱中。冷凍過的標(biāo)本不能再次冷凍,否則結(jié)果會(huì)不準(zhǔn)確。冷凍血漿融化時(shí),應(yīng)將盛冷凍血漿的容器置于37℃水浴中,并輕輕搖動(dòng),使其迅速融化。出凝血2.4試劑:PT試劑購(gòu)于天津威士達(dá)公司:德靈ThromborelS試劑,試劑盒代號(hào)OUHP29。試劑包括人腦凝血活酶凍干粉;氯化

3、鈣和穩(wěn)定劑。每瓶試劑用蒸餾水4ml復(fù)溶。室溫平衡15min后上機(jī)分析。出凝血2.5儀器:使用Sysmex公司的CA-7000型全自動(dòng)血液凝固儀。3操作規(guī)程出凝血2.6操作:按儀器操作步驟執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)操作。出凝血2.6.1開機(jī):按下機(jī)器側(cè)面的POWER按鈕。開機(jī)后機(jī)器進(jìn)行自檢,當(dāng)屏幕上邊顯示“Ready:”時(shí)可以進(jìn)行試驗(yàn)。出凝血2.6.2檢查消耗品:1、準(zhǔn)備反應(yīng)杯:打開儀器上蓋裝反應(yīng)杯的蓋子查看反應(yīng)杯是否夠量,不足時(shí),需及時(shí)添加。(一次性最多可放1000個(gè)杯子)2、準(zhǔn)備試劑:按照儀器對(duì)試劑的要求,把試劑準(zhǔn)備好,

4、放到儀器內(nèi)相應(yīng)位置,注意查看試劑的量和有效期。如還不熟悉試劑位置時(shí),可在主屏幕上選ReagentSetting,按屏幕顯示放置試劑。3、查看儀器的洗液瓶和廢液瓶出凝血2.6.3準(zhǔn)備標(biāo)本:將樣本放入樣本架,再將樣本架放到儀器進(jìn)樣器上。出凝血2.6.4輸入檢測(cè)項(xiàng)目:主菜單上按下WorkList鍵,進(jìn)入工作菜單,輸入PT項(xiàng)目。出凝血2.6.5輸入樣本號(hào):按屏幕下菜單的IDNo.鍵,按順序輸入樣本的序號(hào)。出凝血2.6.6開始檢測(cè):錄入完所有測(cè)試信息,按下屏幕右上角START鍵,開始檢測(cè)。出凝血2.7質(zhì)量控制:使用

5、德靈公司的leve11質(zhì)控品做質(zhì)量控制。每批質(zhì)控品的值不超過2SD。(詳見出凝血1質(zhì)量控制)出凝血2.8計(jì)算:儀器自動(dòng)計(jì)算出結(jié)果。出凝血2.9參考值:PT:10s~14s;INR:0.85~1.153操作規(guī)程出凝血2.10臨床意義:PT是外源性凝血系統(tǒng)的篩選實(shí)驗(yàn)。PT延長(zhǎng)見于先天性凝血因子II、V、VII、X缺乏癥,低(無)纖維蛋白原血癥,DIC,原發(fā)性纖溶癥,VitK缺乏,肝病,口服抗凝劑、肝素和FDP等。PT縮短見于先天性凝血因子V增多,口服避孕藥,高凝狀態(tài),血栓性疾病等。出凝血2.11參考文獻(xiàn):1)

6、主編王鴻利.止血與血栓檢驗(yàn)技術(shù).(第一版1992.6)上??茖W(xué)技術(shù)出版社.2)主編李家增王鴻利韓忠朝.血液實(shí)驗(yàn)學(xué).(第一版1997.10)上海科學(xué)技術(shù)出版社.3)主編鄧家棟楊崇禮楊天楹.臨床血液學(xué).(第一版1985)上??茖W(xué)技術(shù)出版社.4)主編鄧家棟楊天楹楊崇禮.血液學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷.(第一版1985)天津出版社.5)中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部醫(yī)政司編.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程(第一版1991).東南大學(xué)出版社.3

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