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1、改良銀鹽染色法在幽門螺旋桿菌（HP）臨床檢驗中的應用價值探討 摘要：目的介紹我院對傳統(tǒng)銀鹽染色法的改良方法及在幽門螺旋桿菌臨床檢驗中的應用效果與價值。方法對我院收治的417例患者采用我院改良銀鹽染色法進行幽門螺旋桿菌的檢驗，同時與快速尿素酶試驗和14C-尿素呼氣試驗兩種檢驗方法進行對比。結果我院改良銀鹽染色法對幽門螺旋桿菌的陽性檢出率、敏感度以及特異度均顯著高于其他兩種方法，比較均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結論我院改良銀鹽染色法在幽門螺旋桿菌臨床檢驗中不僅陽性檢出率、敏感度、特異度均令人滿意
2、，而且較傳統(tǒng)銀鹽染色法在操作流程方面更為合理簡便，建議在臨床進一步推廣使用?！ ￡P鍵詞：幽門螺旋桿菌；檢驗；銀鹽染色法；改良 幽門螺旋桿菌（Helicobacterpylori，Hp）為一種微需氧的革蘭陰性螺旋狀細菌，其不僅是慢性活動性胃炎與消化性潰瘍的重要致病菌，而且也是萎縮性胃炎與腸上皮化生等癌前病變的促成因子之一，故國際衛(wèi)生組織（WHO）已將其列為第一類致癌因子，并建議臨床應加強對Hp的檢驗工作[1]。但就其檢驗方法來看，銀鹽染色法（Warthin-Sharry，W-S）可謂是目前應用最為
3、普遍同時效果也最為滿意的檢驗方法之一，但基于該方法在操作方面的復雜性，以至于在不同區(qū)域不同醫(yī)療機構中的具體開展流程時常存在有不同程度的差別，且多數(shù)均又存在不盡相同的不完善之處[2]。近些年內，我院在傳統(tǒng)W-S法基礎上進行了一定改良工作并在臨床實踐中獲得了頗為滿意的效果，現(xiàn)報道如下。 1資料與方法 1.1一般資料選擇于2012年5月～2014年6月因表現(xiàn)有不同程度消化系統(tǒng)癥狀并在我院接受胃鏡檢查的417例患者作為本研究對象，其中包括男255例，女162例；年齡18～71歲，平均（40.8±15.
4、6）歲。所有患者均排除近1個月內有使用過任何抑酸藥物及抗Hp藥物者以及近1w內有出現(xiàn)急性消化道出血者?！ ?.2方法所有患者均在接受檢查前保持12h以上的空腹，準備妥當后即在電子胃鏡輔助下于距幽門3cm處取胃黏膜3塊待檢。其中2塊分別常規(guī)采用快速尿素酶試驗（RUT法）與14C-尿素呼氣試驗（14C-UBT法）進行檢驗[3]。另1塊則采用我院改良W-S法進行檢驗，具體方法為：首先對標本采用0.14mol/L的甲醛水溶液進行固定處理，石蠟包埋切片（以4um厚度為宜），接著采用二甲苯脫石蠟，之后再進行脫
5、苯處理，采用各級乙醇過度到蒸餾水的程序進行刷洗，最后再將樣本在避光條件下置于維持溫度在60℃濃度為0.06mol/L的AgNO3水溶液中進行1h的侵染處理，完成染色后再次進行雙蒸餾水刷洗，接著將樣本置于顯影液中進行顯影，若在2～4min內觀察到有出現(xiàn)組織變?yōu)樽睾稚珪r即可結束顯影，同時傾倒出顯影液，并用自來水對切片適當涮洗，最后再將切片脫水處理至透明，采用光學樹脂封固后即可供醫(yī)生閱片診斷。 1.3陽性標準RUT法中若標本在試劑中放置30min內變?yōu)榧t色即認為是陽性；14C-UBT法中最后的14C放
6、射強度測定結果若>1.67Bq則認定為陽性；改良W-S法中，若閱片時觀察到組織與細胞核分別呈金黃色與棕黑色，并在胃黏膜上皮觀察到呈短棒狀或S狀黑色影像則判定為陽性?！ ?.4統(tǒng)計學方法對本次研究所得的數(shù)據(jù)通過SPSS20.0統(tǒng)計學軟件處理，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為比較差異具有統(tǒng)計學意義。 2結果 2.1三種檢驗方法的陽性率比較改良（W-S）法、RUT法以及14C-UBT法三種檢驗方法的陽性率分別為81.8%、66.7%與67.4%，比較以改良（W-S）法顯著更高，與其他兩種方法比
7、較均有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表1?！ ?.2三種檢驗方法的敏感度與特異度比較改良（W-S）的敏感度與特異度分別達到了100.0%與96.4%，均顯著高于RUT法以與14C-UBT法（P0.05），見表2?！ ?討論 相關資料顯示，在我國，一般人群的Hp感染率已經(jīng)達到了50%以上[4]，在該種情況下，人們對Hp研究的關注愈發(fā)上升到了一個全新的高度，同時相關Hp感染的診斷學方法也成為了Hp研究領域的重要課題。這也在很大程度上促進多中檢驗方法的誕生，但基本上都尚存有某些不足之處?！ 【捅狙芯克?/p>
8、采用的3種檢驗方法來看，RUT法雖然具備廉價、操作簡便與反應快速的有點，但同時其檢測結果也很容易受到標本細菌密度與試劑靈敏度等因素的影響，以至于其陽性率與假陰性率均難以獲得很好控制，普遍認為不應將其單獨作為判定Hp感染的依據(jù)。而14C-UBT法雖然為目前比較普遍認可的非侵入性檢驗方法，但由于口咽部的尿素酶陽性細菌也很容易對尿素酶活性造成影響，故采用本法進行Hp檢驗時并不能達到非常理想的敏感度與特異度，而且在受到某些消化道雜菌或服藥與呼氣間隔時間等多種情況的影響，其檢驗結果也很容易出
