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1、黑果枸杞、寧夏枸杞、枸杞的生藥學(xué)研究枸杞是茄科枸杞屬落葉灌木,是我國重要的藥用植物資源。全世界枸杞約有80種,我國有7個(gè)品種和3個(gè)變種,多分布在西北和華北。分布于我國東北、河北、山西、陜西、甘肅南部以及西北、西南、華中、華南和華東各省區(qū);朝鮮,日本,歐洲有栽培或逸為野生。常生于山坡、荒地、丘陵地、鹽堿地、路旁及村邊宅旁。在我國除普遍野生外,各地也有作藥用或綠化栽培。其中寧夏所產(chǎn)枸杞最為道地。枸杞子以植物干燥成熟果實(shí)入藥味甘;性平養(yǎng)肝;滋腎;潤肺枸杞葉以植物的嫩莖葉入藥味苦;甘;性涼補(bǔ)虛益精;清熱明目地骨皮以植物干燥的
2、根皮入藥味甘;性寒涼血除蒸,清肺降火。隨著構(gòu)祀藥理研究的深入進(jìn)行,新的藥理作用不斷被發(fā)現(xiàn).現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證明:構(gòu)祀有免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗衰老、抗腫瘤、抗疲勞、降血糖、降血壓、補(bǔ)腎、保肝、明目、抗輻射損傷等功效。黑果枸杞(LyciumruthenicumMurr)系茄科(Solanaceae)枸杞屬(LyciumL.)植物,是我國西北荒漠地區(qū)一種特有的野生植物資源,其漿果球形,成熟后為紫黑色,無毒,有甜味,是一種亟待開發(fā)的野生植物資源。楊曉日曾做過地骨皮及4種易混品的鑒別比較(文章編號:1009-5276(2006)10
3、-1933-01),姚霞等人曾研究過不同枸杞子中枸杞多糖的含量分析([文章編號]1004-0781(2011)04-0426-03),但為游人做過關(guān)于黑果枸杞、寧夏枸杞與枸杞三者的生藥學(xué)研究,基于這方面的空白,我們做了黑果枸杞、寧夏枸杞、枸杞的生藥學(xué)研究1、材料來源植物拉丁名采集地點(diǎn)采集時(shí)間采集者經(jīng)緯度海拔寧夏枸杞LyciumbarbarumL.枸杞黑果枸杞2、用儀器設(shè)備和試劑儀器設(shè)備和試劑制造商紫外可見分光光度計(jì)水分測定儀電子天平超聲波清洗儀電熱恒溫箱顯微鏡葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品甲醇(分析純)氯仿(分析純)苯酚3、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容3
4、.1、原植物比較植物拉丁名種子莖葉花果實(shí)寧夏枸杞LyciumbarbarumL.種子多數(shù),近圓腎形而扁平,棕黃色主莖數(shù)條,粗壯;小枝有縱棱紋,有不生葉的短刺和生葉、花的長刺;果枝細(xì)長,通常先端下垂,外皮淡灰黃色,無毛葉互生或數(shù)片簇生于短枝上;葉柄短;葉片披針形或長圓狀披針形,長2-8cm,寬0.5-3cm,先端尖,基部楔形或狹楔形而下延成葉柄,全緣,上面深綠色,背面淡綠色,無毛花腋生,常單1或2-6朵簇生在短枝上;花梗細(xì);花萼種狀,長4-5mm,先端2-3深裂,裂片寬卵狀或卵狀三角形;花冠漏斗狀,管部長約8mm,先端
5、5裂,裂片卵形枸杞黑果枸杞3.2、藥材形狀比較根皮果實(shí)葉子寧夏枸杞枸杞黑果枸杞3.3、顯微鑒別分別取三者的果實(shí)、根皮、葉子,制成粉末。先觀察三者粉末的顏色,再將三者的粉末用水合氯醛透化,用甘油進(jìn)行封片,然后進(jìn)行鏡下觀察,比較三者的顯微結(jié)構(gòu)的不同點(diǎn)。根皮果實(shí)葉子木栓層纖維晶體顏色纖維晶體石細(xì)胞纖維晶體寧夏枸杞枸杞黑果枸杞3.4、理化鑒別3.4.1、水分取供試品5g,平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中,厚度不超過5mm,精密稱定,打開瓶蓋在100~105℃干燥5小時(shí),將瓶蓋蓋好,移置干燥器中,冷卻30分鐘,精密稱定,再在上述
6、溫度干燥1小時(shí),冷卻,稱重,至連續(xù)兩側(cè)稱重的差異不超過5mg為止。根據(jù)減失的重量和取樣量,計(jì)算供試品中含水量(%)。3.4.2、灰分及酸不溶性灰分【總灰分測定法】先將測定用的藥材粉碎,使能通過二號篩,混合均勻后,取藥材3~5g,置熾灼至恒重的坩堝中,稱定重量(準(zhǔn)確至0.01g),緩緩熾熱,注意避免燃燒,至完全炭化時(shí),逐漸升高溫度至500~600℃,使完全灰化并至恒重。根據(jù)殘?jiān)亓浚?jì)算供試品中含總灰分的百分?jǐn)?shù)?!舅岵蝗苄曰曳譁y定法】取上項(xiàng)所得的灰分,在坩堝中小心加入稀鹽酸約10ml,用表面皿覆蓋坩堝,置水浴上加熱10
7、min,表面皿用熱水5ml沖洗,洗液并入坩堝中,用無灰濾紙濾過,坩堝內(nèi)的殘?jiān)盟从跒V紙上,并洗滌至洗液不顯氯化物反應(yīng)為止,濾渣連同濾紙移至同一坩堝中,干燥,熾灼至恒重。根據(jù)殘?jiān)亓?,?jì)算供試品中酸不溶性灰分的含量(%)。3.4.3、浸出物3.4.4、多糖稱取一定量的粉碎的枸杞,溶劑采用蒸餾水,固液質(zhì)量比1:10,提取溫度為90°采用微波輔助提取方法,提取三次。合并濾液,真空濃縮提取液,在經(jīng)過醇沉脫蛋白、離心分離、二次醇沉純化分離干燥后得到拘杞多糖;利用紫外光譜分析構(gòu)杞總多糖含量。醇沉:在構(gòu)杞多糖濃縮液中加入4倍體積
8、的80%的乙醇,同時(shí)加入2ml的5%氯化鈉水溶液利于沉淀。脫蛋白:取一定量的粗多糖,加蒸餾水完全溶解,使其濃度為100mg/ml,按拘杞多糖水溶液體積的20%加入三氯甲烷,再加入三氯甲烷體積的20%的正丁醇,劇烈振搖20min,使其充分混勻,1O00r/min離心,傾出上清夜,除去中間變性蛋白和下層三氯甲烷。重復(fù)以上操作,直至中間層無變性蛋白,