香蕉穿孔線蟲(chóng)監(jiān)測(cè)方法

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1、香蕉穿孔線蟲(chóng)監(jiān)測(cè)方法（試行）為規(guī)范香蕉穿孔線蟲(chóng)監(jiān)測(cè)工作，及時(shí)發(fā)現(xiàn)新疫情，準(zhǔn)確掌握疫情擴(kuò)散、分布及發(fā)生動(dòng)態(tài)，特制定本監(jiān)測(cè)方法。本方法，適用于全省各地開(kāi)展香蕉穿孔線蟲(chóng)監(jiān)測(cè)。1監(jiān)測(cè)準(zhǔn)備收集當(dāng)?shù)靥炷闲强?、鳳梨科、芭蕉科、香蕉、甘蔗等觀賞植物和農(nóng)作物的種植情況，以及香蕉穿孔線蟲(chóng)的發(fā)生歷史和現(xiàn)狀等有關(guān)資料，制定監(jiān)測(cè)計(jì)劃。2監(jiān)測(cè)區(qū)域2.1未發(fā)生區(qū)重點(diǎn)監(jiān)測(cè)高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)域，包括曾發(fā)生過(guò)疫情的花卉生產(chǎn)、銷(xiāo)售基地，境外引進(jìn)天南星科、竹芋科、鳳梨科、棕櫚科和芭蕉科等觀賞植物的集中銷(xiāo)售場(chǎng)所和種植地區(qū)。主要監(jiān)測(cè)是否傳入香蕉穿孔線蟲(chóng)。2.2發(fā)生區(qū)重點(diǎn)

2、監(jiān)測(cè)發(fā)生疫情的花卉生產(chǎn)和銷(xiāo)售基地。主要監(jiān)測(cè)香蕉穿孔線蟲(chóng)的發(fā)生動(dòng)態(tài)和擴(kuò)散趨勢(shì)。3監(jiān)測(cè)范圍重點(diǎn)監(jiān)測(cè)天南星科、竹芋科、鳳梨科、棕櫚科和芭蕉科等觀賞植物種植區(qū)和銷(xiāo)售場(chǎng)所。4監(jiān)測(cè)時(shí)期寄主植物的生長(zhǎng)期，一般全年都可進(jìn)行監(jiān)測(cè)。45監(jiān)測(cè)工具工具：鏟、枝剪、砍刀、聚乙烯塑料袋、油性筆、標(biāo)簽、記錄本等。6監(jiān)測(cè)方法6.1未發(fā)生區(qū)監(jiān)測(cè)方法6.1.1訪問(wèn)調(diào)查向花卉生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)者、鄉(xiāng)鎮(zhèn)農(nóng)技人員等詢問(wèn)調(diào)查當(dāng)?shù)靥炷闲强频然ɑ苤参锏姆N植和病蟲(chóng)害發(fā)生情況，特別是苗木來(lái)源和是否有香蕉穿孔線蟲(chóng)發(fā)生的癥狀，做好訪問(wèn)調(diào)查記錄，分析是否存在香蕉穿孔線蟲(chóng)可疑發(fā)生區(qū)。對(duì)

3、詢問(wèn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)的香蕉穿孔線蟲(chóng)可疑發(fā)生地區(qū)進(jìn)行深入重點(diǎn)調(diào)查。6.1.2踏查對(duì)訪問(wèn)調(diào)查過(guò)程中發(fā)現(xiàn)的香蕉穿孔線蟲(chóng)可疑發(fā)生區(qū)和其他有代表性的花卉種植和銷(xiāo)售地區(qū)進(jìn)行踏查（目測(cè)觀察）。在花卉生長(zhǎng)期進(jìn)行2-3次踏查，踏查數(shù)量一般應(yīng)不少于種植面積（株數(shù)）的50%。如果發(fā)現(xiàn)癥狀，詳細(xì)記錄所發(fā)現(xiàn)的可疑癥狀（附表1），發(fā)病程度，出現(xiàn)的地點(diǎn)，表現(xiàn)癥狀的面積（株數(shù)），確定疑似發(fā)生區(qū)。6.1.3定點(diǎn)調(diào)查對(duì)踏查過(guò)程中發(fā)現(xiàn)的疑似發(fā)生區(qū)和其他高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)域進(jìn)行定點(diǎn)調(diào)查。用GPS確定需定點(diǎn)調(diào)查區(qū)域的地理位置，從苗期開(kāi)始，在植物生長(zhǎng)期采用5點(diǎn)取樣法或隨機(jī)取樣

4、法進(jìn)行2次以上調(diào)查，統(tǒng)計(jì)疑似發(fā)病株率。結(jié)果記入附表1，同時(shí)，對(duì)疑似病株按照附錄2方法取樣，進(jìn)行室內(nèi)檢測(cè)鑒定。6.1.4經(jīng)鑒定一旦發(fā)現(xiàn)確認(rèn)新疫情，相應(yīng)區(qū)域按發(fā)生區(qū)進(jìn)行監(jiān)測(cè)。46.2發(fā)生區(qū)監(jiān)測(cè)方法6.2.1發(fā)生區(qū)范圍監(jiān)測(cè)參照6.1各方法采取訪問(wèn)調(diào)查、踏查和定點(diǎn)調(diào)查。6.2.2發(fā)生區(qū)發(fā)生動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)對(duì)發(fā)生區(qū)及其邊界區(qū)域，每月調(diào)查一次，監(jiān)測(cè)香蕉穿孔線蟲(chóng)的發(fā)生動(dòng)態(tài)。6.3調(diào)查取樣對(duì)調(diào)查過(guò)程中發(fā)現(xiàn)的疑似病株和無(wú)明顯癥狀的植物按照附錄1的方法取樣，填寫(xiě)附表1，并附上田間癥狀照片。7疫情診斷7.1現(xiàn)場(chǎng)診斷在種植、銷(xiāo)售場(chǎng)地，對(duì)香蕉穿孔線蟲(chóng)

5、的寄主植物進(jìn)行調(diào)查，觀察其生長(zhǎng)狀況，對(duì)地上部分表現(xiàn)疑似癥狀的植株，采集其根部和根際介質(zhì)（土壤）；若地上部無(wú)明顯癥狀表現(xiàn)的，則隨機(jī)抽取部分植株，觀察其根部生長(zhǎng)狀況并采集根和根際介質(zhì)（土壤），并根據(jù)附錄2的方法進(jìn)行抽樣送實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，將現(xiàn)場(chǎng)檢驗(yàn)抽樣結(jié)果填入附表1。7.2樣品保存采集的植物材料和生長(zhǎng)介質(zhì)樣品放入聚乙烯塑料袋中，帶回實(shí)驗(yàn)室分離，樣品若不能及時(shí)分離，可將樣品放在20℃～25℃的室內(nèi)，將袋口打開(kāi)透氣，并注意保濕和避免陽(yáng)光照射，樣品保存時(shí)間不要超過(guò)1個(gè)月。7.3室內(nèi)鑒定4按附錄3的方法分離樣品中的線蟲(chóng)，采用形態(tài)學(xué)鑒定

6、或分子生物學(xué)方法進(jìn)行鑒定。鑒定有困難的，送省級(jí)植物檢疫機(jī)構(gòu)或其委托的科研教學(xué)單位鑒定，并詳細(xì)填寫(xiě)附表2。8監(jiān)測(cè)記錄各監(jiān)測(cè)點(diǎn)詳細(xì)記錄調(diào)查監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)并填寫(xiě)附表1，將原始調(diào)查記錄表連同相關(guān)照片、影像等資料妥善保存于縣級(jí)植物檢疫機(jī)構(gòu)備查。9監(jiān)測(cè)報(bào)告縣級(jí)植物檢疫機(jī)構(gòu)對(duì)轄區(qū)各監(jiān)測(cè)點(diǎn)的監(jiān)測(cè)結(jié)果進(jìn)行整理匯總按要求上報(bào)。經(jīng)鑒定確認(rèn)發(fā)生新疫情時(shí)，應(yīng)立即上報(bào)。4雌蟲(chóng)：雄蟲(chóng)：幼蟲(chóng)：A——整體B——整體M——側(cè)區(qū)C,D——頭部E,F——頭部G——頭部頂面觀H——頭部頂面觀I~K——尾部L——尾部N——側(cè)區(qū)雌蟲(chóng)：雄蟲(chóng)：A—頭部，C—尾部B—頭部，

7、DE—尾部13附錄1：香蕉穿孔線蟲(chóng)形態(tài)、生物學(xué)特性及防治措施等1病原特征香蕉穿孔線蟲(chóng)隸屬于線蟲(chóng)門(mén)(Nematoda)、側(cè)尾腺綱(Secernentea)、墊刃目(Tylenchida)、短體科(Pratylenchidae)、穿孔屬(RadopholusThorne,1949)，學(xué)名Radopholussimiles。雌蟲(chóng)：蟲(chóng)體呈線形，從蟲(chóng)體中部向兩端略漸變細(xì)；熱殺死后，蟲(chóng)體直或稍向腹面彎。體環(huán)紋清楚；側(cè)區(qū)有4條深淺、粗細(xì)均勻的側(cè)線，部分有網(wǎng)格，側(cè)區(qū)中帶與外帶基本等寬；頭部低，前端平圓，不縊縮或略縊縮，頭環(huán)3～4個(gè)，

8、頭架骨化強(qiáng)；口針和基部球發(fā)達(dá)，食道發(fā)育正常，中食道球卵圓形、有顯著的中食道球瓣，后食道腺長(zhǎng)葉狀從背面或背側(cè)面覆蓋腸；陰門(mén)顯著，雙生殖腺、對(duì)伸，受精囊球形、有桿狀的精子；尾通常呈長(zhǎng)圓錐形，偶爾呈近圓柱形，尾的平均長(zhǎng)度通常超過(guò)52mm，尾后部透明區(qū)平均長(zhǎng)度通常超過(guò)9mm，透明區(qū)的環(huán)紋不規(guī)則，尾端部形態(tài)變化多樣，多數(shù)呈規(guī)則或不規(guī)則錐圓形，末端鈍，少數(shù)