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1、【GB/T4789.10—1994】金黃色葡萄球菌檢驗1 主題內(nèi)容與適用范圍中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中金黃色葡萄球菌的檢驗方法。中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品和食物中毒樣品中金黃色葡萄球菌的檢驗。中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 2 引用標(biāo)準(zhǔn)中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com GB?4789.28 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗染色法、培養(yǎng)基和試劑中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 3 設(shè)備和材料中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 3.1 顯
2、微鏡。中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 3.2 溫箱：36±1℃。中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 3.3 離心機(jī)。中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 3.4 滅菌吸管：1mL、10mL。中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 3.5 滅菌試管。中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 3.6 滅菌平皿。中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 3.7 均質(zhì)器。中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 3.8 載玻片。中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 3.9 L型涂布
3、棒。中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 3.10 酒精燈。中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 3.11 接種環(huán)。中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 4 培養(yǎng)基和試劑中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 4.1 胰酪陳大豆肉湯：按GB?4789.28中4.59規(guī)定。中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 4.2 7.5%氯化鈉肉湯：按GB?4789.28中4.61規(guī)定。中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 4.3 血瓊脂平板：按GB?4789.28中4.6規(guī)定。中國藥品保健食品網(wǎng)www.chn
4、drug.com 4.4 Baird－Prker瓊脂平板：按GB?4789.28中4.60規(guī)定。中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 4.5 肉浸液肉湯：按GB?4789.28中4.1規(guī)定。中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 4.6 滅菌鹽水。中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 4.7 兔血漿：按GB?4789.28中4.63規(guī)定。中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 5 檢驗程序中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 金黃色葡萄球菌檢驗程序如下：中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com （圖略
5、）中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 6 操作步驟中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 6.1 增菌培養(yǎng)法中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 6.1.1 檢樣處理中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 稱取25g固體樣品；吸取25mL液體樣品，加入225mL滅菌生理鹽水，固體樣品研磨或置均質(zhì)器中制成混懸液。中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 6.1.2 增菌及分離培養(yǎng)中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 吸取5mL上述混懸液，接種于7.5%氯化鈉肉湯或胰酪陳大豆肉湯50mL培養(yǎng)基內(nèi)，置36±
6、1℃溫箱培養(yǎng)24h，轉(zhuǎn)種血平板和Baird－Parker平板，36±1℃培養(yǎng)24h，挑取金黃色葡萄球菌菌落進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢及血漿凝固酶試驗。中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 6.1.3 形態(tài)中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 本菌為革蘭氏陽性球菌，排列是葡萄球狀，無芽胞，無莢膜，致病性葡萄球菌菌體較小，直徑約為0.5～1μm。中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 6.1.4 在肉湯中呈混濁生長，在胰酪陳大豆肉湯內(nèi)有時液體澄清，菌量多時呈混濁生長，血平板上菌落呈金黃色，也有時為白色，大而突起、圓形、不透明、表面光滑，周圍有溶血圈。
7、在Baird－Parker平板上為圓形、光滑凸起、濕潤、直徑為2～3mm，顏色呈灰色到黑色，邊緣為淡色，周圍為一混濁帶，在其外層有一透明圈。用接種針接觸菌落似有奶油樹膠的硬度，偶然會遇到非脂肪溶解的類似菌落；但無混濁帶及透明圈。長期保存的冷凍或干燥食品中所分離的菌落比典型菌落所產(chǎn)生的黑色較淡些，外觀可能粗糙并干燥。中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 6.1.5 血漿凝固酶試驗中國藥品保健食品網(wǎng)www.chndrug.com 吸取1∶4新鮮兔血漿0.5mL，放入小試管中，再加
