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《馬檳榔dna提取及其rapd反應(yīng)體系的優(yōu)化》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、馬檳榔DNA提取及其RAPD反應(yīng)體系的優(yōu)化基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué),2011年,第30卷,第1期,第117—121頁GenomicsandAppliedBiology,2011,Vo1.30,No.1,117—12l技術(shù)改進(jìn)UpgratedTechnology馬檳榔DNA提取及其RAPD反應(yīng)體系的優(yōu)化于旭東張超顧文亮胡新文2郭建春1中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶生物技術(shù)研究所,海口,571101;2海南大學(xué)農(nóng)學(xué)院,?？?570228;3海南大學(xué)園藝園林學(xué)院,儋州,571737通訊作者,jianchunguoh@163.6om
2、摘要馬檳榔是我國特有的僅分布在熱帶,亞熱帶地區(qū)的珍稀瀕危野生果樹,馬檳榔種子中所富含的植物甜蛋白馬賓靈(Mabinlin)在食品甜味劑領(lǐng)域有著廣闊的應(yīng)用前景.為了對(duì)我國馬檳榔野生種質(zhì)資源進(jìn)行遺傳多樣性分析,本研究建立并優(yōu)化了馬檳榔基因組DNA的RAPD技術(shù)最優(yōu)反應(yīng)體系.結(jié)果表明,采用SDS-CTAB方法提取的馬檳榔基因組DNA滿足RAPD試驗(yàn)要求;RAPD最優(yōu)反應(yīng)體系(25L)為:引物的終濃度為1.0ixmol/L,dNTPs的終濃度為0.2mmol/L,模板DNA的終濃度為l600ng/L,DNA聚合酶用量為4
3、0U/L.本研究通過對(duì)馬檳榔DNA的提取及RAPD反應(yīng)體系的優(yōu)化,旨在為下一步對(duì)我國馬檳榔野生種質(zhì)資源進(jìn)行遺傳多樣性分析提供基礎(chǔ).關(guān)鍵詞馬檳榔,RAPD,反應(yīng)體系,種質(zhì)ExtrationofGenomicDNAofCapparismasaikaiL6v1andOptimizationoftheRAPDReactionSystemYuXudongZhangChaoGuWenliangHuXinwenGuoJianchun1InstituteofTropicalBioscienceandBiotechnology,C
4、hineseAcademyofTropicalAgriculturalSciences,Haikou,571101;2CollegeofAgricultureHainanUniversity,Haikou,570228;3CollegeofHorticultureandLandscapeArchitecture,HainanUniversity,Danzhou,571737Correspondingauthor,jianchunguoh@163.coinDOI:10.3969/gab.030.000117Abst
5、ractCapparismasaikaiL6vlisanrareandendangeredspecieofwildfruittreewhichonlydistributesintropicalandsubtropicalregionsofChina.TheplantsweetproteinMabinlinwhichisrichintheseedsofCapparismasaikaiL6vlhasabroadapplicationprospectsinthefoodsweetenersindustry.Inorde
6、rtoanalysisthegeneticdi-versityofthewildCapparismasaikaiL6v1germplasm,thisresearchaimedtoscreenoutoptimumRAPDreactionsystemforgenomicDNAofCapparismasaikaiL6v1.TheresultsshowedthattheimprovedSDS-CTABDNAex—tractionmethodwasusedtoextractedthegenomicDNAoftheleave
7、sofCapparismasaikaiL6v1.ThesinglefactorexperimentwasadoptedtoselecttheoptimizationthedNTPsconcentration,templateDNAconcentration,Mconcentration,raqenzymeconcentrationandtheprimerconcentration.Theresultsshowsthattheoptimumreactionsystem(25IxL)forRAPDamplificat
8、ionoftheCapparismasaikaiL6vlDNAwaslistedasfollows:1.0p~mol/Lprimer,0.2mmol/LdNTPs,1600ng/LDNAand40U/Lenzyme.Alltheresultsofthisinvestigationcouldbeusedforfurtheranalysisofthespeciesdivers
