abo血型和mn血型鑒定

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1、血樣本血樣本血標(biāo)本紅細(xì)胞懸液制備抗凝或不抗凝的血標(biāo)本→洗滌→壓積紅細(xì)胞→配制紅細(xì)胞懸液2-3%的紅細(xì)胞懸液試管法血型鑒定、效價(jià)滴定5%的紅細(xì)胞懸液玻片法血型鑒定、間接抗人球蛋白試驗(yàn)10%的紅細(xì)胞懸液抗體親和力測(cè)定血清標(biāo)本抗凝或不抗凝血標(biāo)本→37℃水浴箱→竹簽使血塊與試管壁分離→離心→將血清吸至干凈試管待用ABO血型鑒定原理：根據(jù)ABO血型的分型原則及其獨(dú)特的性質(zhì)，利用凝集試驗(yàn)技術(shù)通過正定型（紅細(xì)胞定型）和反定型（血清定型）兩組試驗(yàn)可準(zhǔn)確鑒定ABO血型。試劑：抗A、抗B試劑血清A型、B型和O型試劑紅細(xì)胞懸液2-3%受

2、檢者紅細(xì)胞懸液和血清或全血ABO血型鑒定方法：玻片法不適于血清抗體鑒定試管法正定型、反定型結(jié)果解釋凝集為陽(yáng)性即被檢紅細(xì)胞膜上有與該試劑血清抗體相對(duì)應(yīng)的抗原；或被檢血清中有與該試劑紅細(xì)胞抗原相對(duì)應(yīng)的抗體。不凝集為陰性加試劑抗體血清加被檢紅細(xì)胞懸液離心相對(duì)應(yīng)的抗原抗體反應(yīng)觀察結(jié)果ABO血型判斷血正定型反定型型抗-A抗-BACBCOCA+——+—B—++——O——++—AB++———思考題ABO血型的分類原則是什么？ABO血型的分類原則是根據(jù)紅細(xì)胞膜上所存在的抗原，血清中所存在的抗體來進(jìn)行分類的。通常使用抗-A和抗B兩種

3、血清及A型、B型和O型三種試劑紅細(xì)胞來鑒別。如受檢者紅細(xì)胞被抗血清凝集，說明紅細(xì)胞膜上存在相應(yīng)的抗原；如不發(fā)生凝集說明不存在相應(yīng)抗原；如受檢者血清與試劑紅細(xì)胞發(fā)生凝集，說明血清中存在相應(yīng)的抗體；如不發(fā)生凝集，說明不存在相應(yīng)抗體。為什么ABO血型鑒定應(yīng)采用“正反定型”兩種方法？因?yàn)锳BO血型鑒定,主要依據(jù)受檢者紅細(xì)胞與抗A、抗B試劑血清反應(yīng)結(jié)果確定,此法稱正定型法；也可通過受檢者的血清與A型、B型和O型試劑紅細(xì)胞反應(yīng)結(jié)果確定,此法稱反定型法，同時(shí)采用正反定型法,并互相核對(duì)其結(jié)果是否一致是一個(gè)可靠的血型鑒定法。為什么在

4、反定型中使用O型紅細(xì)胞？因?yàn)橛行┦苎呋蚬┭哐逯写嬖谝蛎庖摺D女妊娠或不當(dāng)輸血而引起的抗A或抗B以外的抗體，這些抗體不是自然所期望存在的。血清反定型時(shí)，使用O型紅細(xì)胞可在ABO血型鑒定試驗(yàn)過程中檢測(cè)出受檢血清中是否有“不規(guī)則”抗體的存在。為什么紅細(xì)胞懸液過濃或過淡均可出現(xiàn)假陰性反應(yīng)結(jié)果？因?yàn)榭乖⒖贵w在適當(dāng)?shù)谋壤?，反?yīng)最強(qiáng)。若紅細(xì)胞懸液過濃，則抗原過剩，抗體不足，每個(gè)紅細(xì)胞均只能吸收少量抗體，不足以形成凝集。若紅細(xì)胞懸液過淡，則紅細(xì)胞間距離較大，不易集聚在一起，不形成凝集。在實(shí)際血型鑒定時(shí)，玻片法用5%紅細(xì)胞

5、懸液敏感性較強(qiáng)，并應(yīng)在鑒定過程中不斷搖動(dòng)玻片以促使其相互接觸。試管法用2%濃度的紅細(xì)胞懸液敏感性較好，容易觀察凝集。為什么玻片法血型鑒定要嚴(yán)格規(guī)定觀察結(jié)果的時(shí)間？凝集反應(yīng)出現(xiàn)的快慢與強(qiáng)弱是由抗原抗體的性質(zhì)決定的,如果抗原的抗原性強(qiáng)，抗體效價(jià)高，凝集反應(yīng)的第一，第二階段可以在數(shù)秒內(nèi)完成；如抗原的抗原性弱，抗體效價(jià)也低，則凝集反應(yīng)不明顯，反應(yīng)需要一段時(shí)間才能完成。因?yàn)檠逶诳罩斜┞稌r(shí)間過長(zhǎng)，發(fā)生濃縮，從而使紅細(xì)胞聚集，造成假陽(yáng)性結(jié)果；如果不等反應(yīng)完成便判定反應(yīng)結(jié)果，可使陽(yáng)性結(jié)果誤報(bào)成陰性結(jié)果，造成假陰性。所以玻片法血型

6、鑒定要嚴(yán)格規(guī)定觀察結(jié)果的時(shí)間凝膠試驗(yàn)使用的試劑和器材凝膠技術(shù)凝膠法鑒定ABO血型優(yōu)點(diǎn)：敏感：在凝膠試驗(yàn)中常能發(fā)現(xiàn)其它試驗(yàn)不易發(fā)現(xiàn)的問題。結(jié)果可保存：凝膠試驗(yàn)的結(jié)果可在冰箱中保存數(shù)日，并且較容易被拍成照片。操作技術(shù)要求較低：凝膠試驗(yàn)的操作主要是簡(jiǎn)單的加樣和判讀，孵育、離心過程都有專門的設(shè)備。其中能被人為改變的因素較少。無需洗滌的抗球蛋白試驗(yàn)：缺點(diǎn)不能做反定型凝膠試驗(yàn)方法成本較高，需要特殊設(shè)備。高度敏感有時(shí)也會(huì)造成不便。MN血型鑒定試劑抗M、抗N試劑血清M型、N型、MN型紅細(xì)胞受檢者紅細(xì)胞懸液方法玻片法試管法結(jié)果判讀M

7、N血型結(jié)果判定抗M抗N血型被檢紅細(xì)胞1+—M被檢紅細(xì)胞2—+N被檢紅細(xì)胞3++MNM+N+紅細(xì)胞+M-N+紅細(xì)胞—M+N+紅細(xì)胞+M+N-紅細(xì)胞—