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《優(yōu)選生精湯中淫羊藿苷的提取工藝論文：響應(yīng)面分析法優(yōu)選生精湯中淫羊藿苷的提取工藝研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、優(yōu)選生精湯中淫羊藿苷的提取工藝論文：響應(yīng)面分析法優(yōu)選生精湯中淫羊藿苷的提取工藝研究【摘要】?目的優(yōu)選生精湯中淫羊藿苷提取的工藝條件。方法采用響應(yīng)面分析法，以提取物淫羊藿苷含量為指標(biāo)進行實驗，考察料液比、乙醇濃度、提取時間等因素對提取工藝的影響。結(jié)果優(yōu)選出醇提淫羊藿苷的最佳工藝為：加30倍量70％乙醇，回流提取1.75h，提取兩次。生精湯中淫羊藿苷的含量為1.36μg/g。結(jié)論該方法簡便易行，穩(wěn)定性好，適于工業(yè)化生產(chǎn)中應(yīng)用?！娟P(guān)鍵詞】?響應(yīng)面分析法；淫羊藿苷；提取工藝；Box-Benhnken中心
2、組合實驗生精湯由菟絲子、淫羊藿、熟地、補骨脂、女貞子等11味中藥組成。經(jīng)動物實驗［1］證明生精湯能顯著降低模型大鼠血清雄激素含量，增加血清雌、孕激素含量促排卵。經(jīng)多年臨床應(yīng)用［2］證實的生精湯為中醫(yī)藥補腎活血法治療女性多囊卵巢綜合征的有效組方。淫羊藿為處方中的君藥，淫羊藿苷類黃酮化合物為其主要有效成分，此外含有生物堿、木脂素、多糖和微量元素等?，F(xiàn)代藥理實驗研究表明［3，4］，淫羊藿總黃酮具有性激素樣作用，可以使雌性小鼠子宮增重、E2含量升高、雄性小鼠血清T含量升高。淫羊藿苷能延緩卵巢卵母細胞巢破
3、裂，抑制原始卵泡的發(fā)育啟動，減少卵泡的消耗，使處于靜止期的原始卵泡數(shù)增多［5］。淫羊藿總黃酮為生精湯治療女性多囊卵巢綜合征的主要有效成分之一。響應(yīng)面分析法［6］以回歸方法作為函數(shù)估算的工具，將多因子試驗中因子與試驗結(jié)果的相互關(guān)系函數(shù)化，可研究因子與響應(yīng)值之間、因子與因子之間的相互關(guān)系，并可進行優(yōu)化。本文采用響應(yīng)面分析法，以提取物淫羊藿苷含量為指標(biāo)進行實驗，考察藥材的料液比、乙醇濃度、提取時間等因素對提取工藝的影響，優(yōu)選淫羊藿苷的最佳提取工藝，以便提出更多的有效成分，提高治療效果?！ ??儀器與試
4、藥1.1?儀器LC-10AD高效液相色譜儀（日本島津公司），CLASS-VP色譜工作站，GL-CQ-250S超聲波清洗機（上海杰理科技有限公司），AE-240電子天平(上海梅特勒一托利多儀器有限公司)。W一201B數(shù)顯恒溫水浴鍋(上海申騰生物技術(shù)有限公司)，R-201旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海申勝生物技術(shù)有限公司)。1.2材料與試劑生精湯中各藥材（菟絲子、淫羊藿、熟地、補骨脂、女貞子、山藥、雞血藤、劉寄奴、王不留行、制香附、生麥芽）購自浙江中醫(yī)藥大學(xué)飲片廠，并經(jīng)浙江中醫(yī)藥大學(xué)姚振生教授鑒定。?????
5、淫羊藿苷對照品購自中國藥品生物制品檢定所，批號：110737-200312，乙腈、甲醇(供高效液相色譜測定用)為色譜純，超純水，其余為分析純。2??方法與結(jié)果2.1?淫羊藿苷的含量測定［7］2.1.1?色譜條件 色譜柱為phenomenex-Genmini-C18(4.6mm×150mm)；流動相為甲醇－水（52－48）；流速1.0ml·min-1；檢測波長270nm；柱溫30℃；檢測靈敏度0.02AUFS；進樣量20μl?！ ?.1.2?對照品溶液的制備 精密稱取淫羊藿苷對照品2mg，置1
6、0ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成每毫升含有0.24mg淫羊藿苷的溶液，作為對照品溶液?！ ?.1.3?供試品溶液的制備 按處方取生精湯各味藥材，精密稱定，回流提取兩次，合并提取液，混勻，濃縮至100ml，取1ml用0.45μm微孔濾膜過濾，作為供試品溶液?！ ?.1.4?標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密吸取對照品溶液，倍半稀釋后，分別注入液相色譜儀，記錄淫羊藿苷峰的峰面積。以進樣濃度C(μg/g)為橫坐標(biāo)，峰面積A為縱坐標(biāo)進行線性回歸，回歸方程為：A=2×106C+109929，r=
7、0.9999。表明淫羊藿苷在4.8～0.15μg范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好?！ ?.1.5精密度實驗精密吸取濃度為0.2μg/μl的對照品溶液，重復(fù)進樣5次，每次20μl，測定峰面積，計算RSD=0.28%，表明儀器精密度良好。2.1.6??加樣回收實驗取已知含量的生精膠囊樣品0.25g，共5份，分別加入0.2μg/μl的淫羊藿苷對照品10μl，其余同“2.1.3”供試品溶液的制備方法制備，按“2.1.1”色譜條件進樣20μl，測定峰面積，并計算回收率，結(jié)果平均回收率為100.4%，RSD=2.5%，
8、表明本方法具有較好的加樣回收率。2.2?淫羊藿苷提取工藝研究2.2.1響應(yīng)面分析法因素的選取及方案分析按照處方分別稱取生精湯各藥材，共20.4g，根據(jù)Box-Benhnken中心組合實驗設(shè)計原理［6］，綜合單因素試驗的結(jié)果，選取料液比、提取時間、乙醇濃度3個因素，每個自變量的低、中、高水平分別以-1，0，1編碼，以淫羊藿苷得率作為響應(yīng)值（Y）。采用SAS9.1.3對實驗結(jié)果進行回歸分析。試驗因素與水平見表1，實驗方案及結(jié)果見表2。表2?實驗因素與水平（略）表2?響應(yīng)面實驗安排及結(jié)果（略） 2.
