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1、設(shè)計性實(shí)驗(yàn)----機(jī)械損傷對馬鈴薯生理性質(zhì)的影響成員：2009236105郭銀炫2009236107蘇彩婉2009236108鐘麗桃2009236116鐘玉嫻2009236117陳毓文2009236123丁丹麗（一）刀器割傷對馬鈴薯多酚氧化酶（PPO）活性測定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模赫莆諟y定多酚氧化酶活性的方法；了解多酚氧化酶的特性二、實(shí)驗(yàn)原理：多酚氧化酶是一種含銅的氧化酶，能使一元酚和二元酚氧化生成醌。醌有顏色，在525nm下有最大光吸收，通過分光光度法測定反應(yīng)體系顏色變化可測定酶活性。三、器材與試劑1、儀器：低溫離心機(jī)、分光光度計2、試劑：0.1mol
2、·L兒茶酚、pH7.2磷酸緩沖液3、材料：馬鈴薯四、實(shí)驗(yàn)步驟：1．稱取馬鈴薯0.5克，加入2.5mLpH7.2磷酸緩沖液，少許PVP，研磨勻漿，轉(zhuǎn)移到離心管，再用2.5mLpH7.2磷酸緩沖液沖洗研缽，合并提取液。4℃4000rpm離心15分鐘，上清液即為粗酶液。2．在試管中，加入2.5mLpH7.2磷酸緩沖液，1.5mL兒茶酚（鄰苯二酚）以及1mL粗酶液，空白調(diào)零以1mL磷酸緩沖液代替粗酶液。3．A值測定：加入粗酶液后迅速混勻，立刻于525nm下測定反應(yīng)體系的A值，每隔10秒記錄一次，共記錄5次。4．計算酶活力。按下式計算PPO活性＝U/min
3、gFWA值增加0.001定義為一個酶活力單位。5.刀割傷后每隔1個小時，按上述步驟重復(fù)做三次五、實(shí)驗(yàn)報告：時間（h）0123完好馬鈴薯A值0.3120.4150.5230.326損傷馬鈴薯A值0.1330.1230.1200.127六．實(shí)驗(yàn)結(jié)果：馬鈴薯機(jī)械損傷后，多酚氧化酶活性降低隨著時間的增長，多酚氧化酶的活性越來越低七．實(shí)驗(yàn)分析及討論1.完好馬鈴薯在放置三個小時后的PPO活性顯著變大答：,PPO活力可能與馬鈴薯的大小有關(guān)，馬鈴薯體積越大，酶量較多，酶活力越大2,刀割放置四個小時后，馬鈴薯PPO活力微升答：取材部位較前三次深入表皮，而PPO活力
4、與馬鈴薯的選材部位有關(guān)，靠近表皮的PPO易被氧化，所以活力比中間部位的馬鈴薯的PPO的活力小3，刀割后，促進(jìn)馬鈴薯氧化褐變，所以酶活力越來越低（二）失重率與呼吸強(qiáng)度的測定一、機(jī)械損傷對馬鈴薯失重率的影響（1）各取一個完好和刮傷的馬鈴薯用電子天平稱重，每隔6小時稱量一次，記錄數(shù)據(jù)。（2）實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)：表一：相隔時間（質(zhì)量（g）樣品0h6h12h24h完好的馬鈴薯89.0288.9688.7788.73損傷的馬鈴薯68.0367.6766.4464.22表二：相隔時間失重率樣品0h6h12h24h完好00.07%0.28%0.32%損傷00.53%2.3
5、3%5.6%圖一：機(jī)械損傷對馬鈴薯失重率的影響注：縱坐標(biāo)是失重率(3)結(jié)論：機(jī)械損傷對增強(qiáng)馬鈴薯的蒸騰失水，導(dǎo)致馬鈴薯的質(zhì)量減少，失重率比完好的大。二、機(jī)械損傷對馬鈴薯呼吸強(qiáng)度的影響（1）本實(shí)驗(yàn)以完好的馬鈴薯和刮傷的馬鈴薯做對比試驗(yàn)，采用靜置法測定它們呼吸強(qiáng)度的變化，每隔6小時測定一次，記下數(shù)據(jù)，分析機(jī)械損傷對呼吸強(qiáng)度的影響。（2）實(shí)驗(yàn)材料與試劑0.4mol/L氫氧化鈉、0.2mol/L草酸、飽和氯化鋇溶液、1%酚酞指示劑、凡士林。干燥器（直徑≥25cm）、滴定管架、25mL酸式滴定管、150ml三角瓶、φ10cm培養(yǎng)皿、10ml移液管、洗耳球、
6、天平。（3）實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)與結(jié)果：表三：記錄數(shù)據(jù)相隔時間體積（ml）試樣0h6h12h18h24h完好的馬鈴薯8.248.278.288.318.30刮傷的馬鈴薯8.278.198.248.298.29空白試驗(yàn)8.398.408.398.418.40表四：馬鈴薯呼吸強(qiáng)度的變化相隔時間呼吸強(qiáng)度（mg/kg.h）樣品0h6h12h18h24h完好的馬鈴薯15.0512.8510.889.919.91刮傷的馬鈴薯15.0527.1619.5015.6114.31圖二：完好和刮傷的馬鈴薯呼吸強(qiáng)度的變化注：縱坐標(biāo)是呼吸強(qiáng)度，單位是mg/(kg.h)（4）結(jié)論：馬
7、鈴薯是非躍變型果蔬，其呼吸強(qiáng)度在成熟期間隨時間的增長而不斷下降，而受到機(jī)械損傷的馬鈴薯剛開始呼吸強(qiáng)度不正常的增加，到達(dá)一定的高峰之后，隨著時間的增長，其呼吸強(qiáng)度也逐漸降低，到達(dá)一定的程度后，變化幅度小，幾乎不變。所以在果蔬貯運(yùn)期間要盡量避免機(jī)械損傷，果蔬受到機(jī)械損傷，呼吸強(qiáng)度增強(qiáng)，體內(nèi)有機(jī)物質(zhì)消耗快，降低果蔬的貯藏壽命。（三）馬鈴薯總可溶性固形物含量的測定（折光儀法）一，實(shí)驗(yàn)?zāi)康臏y定完好的馬鈴薯與損傷后的馬鈴薯固形物含量變化情況。二、藥品與器材 馬鈴薯（一個完好的，一個有機(jī)械損傷的，蒸餾水；手持式折光儀、燒杯、滴管、擦鏡紙（或棉花）。三、操作步
8、驟 1、儀器的校正打開手持式折光儀蓋板，用擦鏡紙或棉花小心擦干棱鏡玻璃面。在棱鏡玻璃面上滴2滴蒸餾水，蓋上蓋板。朝向光源明亮處，于水平
