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1、花椒論文：花椒種質(zhì)資源遺傳多樣性研究【中文摘要】花椒(ZanthoxylumL.),屬于蕓香科(Rutaceae)?；ń穼僦参餅閱棠尽⑿棠净蚰举|(zhì)藤本,常綠或落葉,約有250種左右(Stevens,2001),廣泛分布于亞洲、大洋洲、北美的熱帶亞熱帶地區(qū)。中國花椒屬有39個(gè)種14個(gè)變種(曹明,2008),分布范圍很廣,北至遼東半島,南至海南島,臺灣,西藏地區(qū)也有分布,生物多樣性豐富。花椒是一種具有較高經(jīng)濟(jì)價(jià)值的經(jīng)濟(jì)植物,且有一定的水土保持作用。近年來隨著退耕還林工程的實(shí)施和市場需求的拉動(dòng),我國花椒種植面積迅速擴(kuò)大。但是,在
2、生產(chǎn)實(shí)踐中,由于花椒同名不同種、同種不同名現(xiàn)象的普遍存在,導(dǎo)致品種應(yīng)用混亂,限制了優(yōu)良品種的選育和推廣。本研究以花椒的DNA遺傳多樣性為理論依據(jù),以ISSR-PCR為主要方法,結(jié)合花椒的形態(tài)學(xué)多樣性,對采自中國6個(gè)省區(qū)的45份花椒樣本(品種)的遺傳多樣性和遺傳相似性進(jìn)行了分析以揭示中國栽培花椒的遺傳多樣性,不同地域不同品種之間花椒的遺傳關(guān)系,為花椒品種鑒定、新品種的選育和中國花椒資源的保護(hù)提供理論參考。主要研究結(jié)果如下:1、通過不同方法的對比分析,確定了花椒總DNA提取的改良CTAB法。改良CTAB法能有效的去除花椒樣本中
3、的多糖類和其他小分子物質(zhì),避免了提取過程中的DNA降解和褐化,延長了DNA保藏時(shí)間,且ISSR-PCR擴(kuò)增效果好,較SDS法更適用于花椒DNA的提取。2、通過引物篩選,選出了11條多態(tài)性好,擴(kuò)增條帶清晰的引物,共得到102條條帶,擴(kuò)增片段大小在150bp-2000bp之間。其中有多態(tài)性條帶86條,多態(tài)性比率達(dá)84.31%。表明中國各地花椒的多樣性很豐富。3、通過ISSR標(biāo)記,發(fā)現(xiàn)參試的45個(gè)花椒品種的相似性在0.4595-0.9189。表明在DNA遺傳層面,花椒具有較高的多樣性;對花椒的26個(gè)數(shù)量性狀進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn),各性
4、狀指標(biāo)變異較大、變異系數(shù)在14.7%-39.2%之間。樣本(品種)之間相似度在0.4459-0.8784之間,相似度變幅較大。表明中國花椒在形態(tài)學(xué)上的遺傳多樣性豐富。4、用ISSR標(biāo)記結(jié)果對45份花椒樣本(品種)進(jìn)行聚類,將參試的45份花椒樣本(品種)分為大紅袍類、獅子頭類、茍椒類、無刺花椒類、短柄花椒類、竹葉椒類等6組,其中竹葉花椒類和其他類群遺傳距離較遠(yuǎn)。大紅袍類、獅子頭類和茍椒類親緣關(guān)系較近。通過對花椒的26個(gè)數(shù)量性狀聚類,將45個(gè)花椒樣本(品種)分為3組,花椒品種并沒有按照地理分布進(jìn)行聚類,也沒有嚴(yán)格的按照品種分類
5、,和ISSR聚類結(jié)果有較大差別。說明了形態(tài)學(xué)鑒定分類有一定的局限和不足。【英文摘要】ZanthoxylumL.isaplantinthefamilyRutaceae.Theyarechieflytrees,smalltreesorwoodyvines;evergreenordeciduous.Thereareabout250specieswidelydistributedinAsia,Oceania,NorthAmerica’stropicalandsubtropicalregions.InChina,thereare39
6、speciesand14varietieswidelydistributed.ZanthoxylumL.isagroupofplantswhichhavehigheconomicvalueandabundantbiodiversityandcanbetheforestforsoilandwaterconservation.ButtheconfusedclassificationlimitedthebreedingandspreadingofZanthoxylumL..OnthetheoreticalbasisofDNAge
7、neticdiversity,thisstudyaimedatscreeningthegeneticdiversityandgeneticsimilarityof45ZanthoxylumL.samplescolletedfrom6provincesinChina,mainlybyISSR-PCRmethodtogetherwithmorphologicalcharacters.Themainresultsareasfollows:1.Togethigh-qualityDNAfromyoungleavesofZanthox
8、ylumL.,theimprovedCTABandSDSmethodwerecomparedinthispaper.Theresultsshowedthat:SDSmethodcannoteffectivelyremovethepolysaccharidesandothersmallmoleculesf
