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1、兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療心肌梗死的實(shí)驗(yàn)研究作者：姜敏輝，王衛(wèi)彪，曹京燕【摘要】 目的:探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymalstemcells,MSCs)移植對兔心肌梗死（myoeardialinfarction，MI）的治療作用。方法:大耳白兔38只，2只用于提供MSCs，余36只隨機(jī)分為對照組、MI組和MSCs移植組。采用結(jié)扎左冠狀動脈前降支方法制作MI模型，在MI后1小時將DAPI標(biāo)記的MSCs移植至梗死區(qū),對照組注射等量PBS。術(shù)前、術(shù)后2周、4周分別做超聲心動圖檢查其心功能變化。術(shù)后4周處死兔，取心梗區(qū)組織
2、進(jìn)行組織學(xué)觀察。結(jié)果:心梗4周后，MSCs組心肌組織冷凍切片中可以觀察到DAPI標(biāo)記細(xì)胞存在。MSCs組心功能和毛細(xì)血管密度與MI組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05)。結(jié)論:經(jīng)5-aza誘導(dǎo)的MSCs同種異體移植入兔MI模型的受損心肌后能存活并改善宿主的心功能?！娟P(guān)鍵詞】心肌梗死骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植兔 [Abstract]Objective:Toinvestigatetheeffectsofmesenchymalstemcells(MSCs)transplantationonthetherapyofmyocardi
3、alinfarction(MI)inrabbits.Methods:36rabbitswererandomlydividedintothreegroups:thecontrolgroup,theMI10group,theMSCsgroup.MIwasinducedbyligationofleftanteriordescendingbranchofthecoronaryartery.TheMSCslabeledbyDAPIweretransplantedafterMI1h.Echocardiographywasperformed
4、toevaluatethecardiacfunctionbeforeoperationand2weeksand4weeksafterMI.Afterfourweeks,specimenswereharvestedfromthetransplantedareasandobservedhistologically.Results:FourweeksafterAMI,thelabeledcellswereviableintherecipientheart.IncontrastwiththeMIgroup,theheartfuncti
5、onandvasculardensityoftheMSCsgrouphadsignificantdifference（P<0.05).Conclusion:TherabbitMSCsinducedby5-azaandlaterimplantedintotherabbitinjuredcardiacmusclecansurviveandimprovethehost'scardiacfunction. [Keywords]Myocardialinfarction；Mesenchymalstemcell；Transplant
6、ation；Rabbit10 心肌梗死后心衰的根本原因在于心肌細(xì)胞的數(shù)量減少。細(xì)胞心肌成形術(shù)是近年來發(fā)展起來的一項(xiàng)有廣泛應(yīng)用前景的治療方法，目前有許多學(xué)者致力于此方面的研究[1]。骨髓MSCs是一種多潛能分化干細(xì)胞,能分化成心肌細(xì)胞[2]，由于取材方便，來自自體，無排斥反應(yīng)、無倫理問題、擴(kuò)增能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，是目前細(xì)胞移植較理想的靶細(xì)胞。本實(shí)驗(yàn)擬探討骨髓MSCs移植治療兔MI的療效及其機(jī)制?！ ?材料與方法 1.1試劑DMEM-LG培養(yǎng)基(Gibco公司)；胎牛血清（Gibco公司）；percoll細(xì)胞分離液（密度為1.077
7、g/ml，Pharmacia公司）；5-氮胞苷(5-azacytidine，5-aza）（Sigma公司)；DAPI(Roche公司);彩色B超機(jī)SEQUIA512，超聲頻率7.0MHz；透射電子顯微鏡（日本JEOL公司，JEM-1230型）等?！ ?.2動物及分組大耳白兔38只，體重2.0～2.5kg，由南通大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供。2只用于提供MSCs，余36只隨機(jī)分為3組，每組10只；（1）對照組冠狀動脈下穿線，不結(jié)扎，心肌內(nèi)注射PBS液；（2）心肌梗死組（MI組）制成MI模型，心肌內(nèi)注射等量PBS液；（3）MSCs移植組（
8、MSCs組）制成MI模型，心肌內(nèi)注射等量含MSCs的PBS液。 1.3方法 1.3.1兔MSCs的分離及培養(yǎng)無菌條件下進(jìn)行兔髂后上棘穿刺抽取骨髓,加肝素抗凝。應(yīng)用percoll細(xì)胞分離液離心提取MSCs，用含10%胎牛血清的DMEM-LG進(jìn)行培養(yǎng)。37℃10、5%CO2條
