外周血單核細(xì)胞hla-dr表達(dá)與膿毒癥的關(guān)系

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1、外周血單核細(xì)胞HLA-DR表達(dá)與膿毒癥的關(guān)系作者：王兆豐黃俊軍陳松勁【關(guān)鍵詞】細(xì)胞　　膿毒癥（sepsis）是指由感染引發(fā)的全身炎癥反應(yīng)綜合征。可能并不像以往的“過度炎癥反應(yīng)”，更多的是由于“過度抑制”參與其中；有學(xué)者［１］認(rèn)為在初期炎癥反應(yīng)之后會導(dǎo)致單核細(xì)胞失活所致的免疫功能不全，稱之為免疫麻痹?！　?資料與方法　　1.1一般資料2006年1至6月健康體檢人群為對照組20例。ICU病房患者（包括創(chuàng)傷燒傷、大手術(shù)和胰腺炎等）67例，男39例，女28例。將其分為A組（非膿毒癥）、B組（符合膿毒癥但未達(dá)到嚴(yán)重膿毒癥

2、診斷標(biāo)準(zhǔn)）、C組（符合嚴(yán)重膿毒癥診斷標(biāo)準(zhǔn)）。診斷標(biāo)準(zhǔn)：膿毒癥、嚴(yán)重膿毒癥、MODS的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考美國胸科醫(yī)師協(xié)會（ACCP）和美國危重病醫(yī)學(xué)會聯(lián)席會議制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)［２］。5　　1.2試劑儀器流式細(xì)胞儀采用美國COULTER-EPICS-XL型四式熒光流式細(xì)胞儀。試劑：法國產(chǎn)，CD14-FITC，HLA-DR-PE，同型對照：IgG1-FITC、IgG1-PE?！　?.3標(biāo)本采集所有待測標(biāo)本均為當(dāng)天新鮮采集，含EDTA-K2的真空采血管采集靜脈血抗凝全血?！　?.4檢測方法對照管加入10μlIgG1-FITCI

3、、IgG1-PE10μl，測定管加入10μlCD14-FITC和10ulHLA-DR-PE，分別加入100μl的EDTA抗凝新鮮全血，室溫避光孵育20min，用CoulterQ-PREP溶血儀溶血后上機(jī)單核細(xì)胞HLA-DR表達(dá)百分率［HLA-DR（+）/CD14（+）］及其平均熒光強(qiáng)度［HLA-DR（+）/CD14（+）MFI］。　　1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理計(jì)量資料均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，兩樣本均數(shù)間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)?！　?結(jié)果　　各組基本資料見表1；ICU病房患者與健康體檢人群外周血比較見表2。A、B、C組

4、外周血比較見表3。5　　表1各組基本資料（略）　　與對照組比較*P<0.01，C組與B組比較#P>0.05　　表2健康體檢人群與ICU病房患者比較（略）　　與健康體檢人群比較*P<0.01　　表3A、B、C組外周血比較（略）　　B、C組與A組比*P<0.01；**P<0.05，C與B組比#P<0.01；##P>0.05　　3討論　　ICU病房患者多為創(chuàng)傷、燒傷、大手術(shù)等，死亡的主要原因是細(xì)菌感染和MODS，其原因可能與免疫系統(tǒng)受損引起的細(xì)菌易感性增加有關(guān),作者選擇健康人

5、群對照組與研究組年齡、性別、吸煙史無差異，但研究組IL-6和WBC、CRP水平較對照組均有明顯升高（P<0.01）,表明ICU病房患者在疾病發(fā)生發(fā)展過程中細(xì)胞因子有過多釋放，機(jī)體存在著過度的炎癥反應(yīng)；但C組和B組IL-6和WBC、CRP水平比較并無差異，研究組HLA-DR(+)/CD14(+)、HLA-DR(+)/CD14(+)MFI5較健康人群對照組有明顯下降（P<0.01），且C組與B組比較顯著降低（P<0.01），提示HLA-DR(+)/CD14(+)、HLA-DR(+)/CD14(+)

6、MFI是比IL-6和WBC、CRP更早期的、敏感的、可預(yù)見的指標(biāo)。　　單核細(xì)胞在抗細(xì)菌感染的免疫應(yīng)答中起關(guān)鍵作用，他不僅可以釋放趨化因子、細(xì)胞因子、還可表達(dá)MHC-II類抗原，單核細(xì)胞誘導(dǎo)抗原特異性淋巴細(xì)胞活化的能力下降將削弱集體清除外來抗原的能力。HLA-DR抗原在人類單核細(xì)胞是最常見的表達(dá)區(qū)域［３］。HLA-DR與單核巨噬細(xì)胞處理抗原后向淋巴細(xì)胞提呈抗原的能力有直接關(guān)系。能夠作為定量的診斷免疫抑制檢查，目前可能首推CD14(+)單核細(xì)胞的HLA-DR［４］。本研究表明ICU病房患者與正常體檢人群比較外周血H

7、LA-DR(+)/CD14(+)、HLA-DR(+)/CD14(+)MFI顯著降低（P<0.01）。其中52例患者（占78％）入住ICU時的外周血單核細(xì)胞HLA-DR表達(dá)率低于70%，表明ICU患者多有不同程度的免疫麻痹或免疫紊亂。提示ICU病房患者有必要常規(guī)檢測外周血HLA-DR(+)/CD14(+)、HLA-DR(+)/CD14(+)MFI作為監(jiān)測免疫抑制的定量指標(biāo)。2１例患者（占31％）入住ICU時的外周血HLA-DR(+)/CD14(+)＜30%，其病死率達(dá)71％。提示HLA-DR(+)/CD14

8、(+)嚴(yán)重低下患者處于免疫麻痹狀態(tài)，病情重、預(yù)后差。作者認(rèn)為采用流式細(xì)胞術(shù)檢測HLA-DR(+)/CD14(+)、HLA-DR(+)/CD14(+)MFI，具有準(zhǔn)確、簡便、快速等優(yōu)點(diǎn)。此方法還能夠定量的診斷免疫抑制，HLA-DR(+)/CD14(+)＜70%提示患者存在一定免疫麻痹，HLA-DR(+)/CD14(+)＜30%作為嚴(yán)重膿毒癥的診斷參考指標(biāo)。5【參考文獻(xiàn)】　　1RichaR