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《何首烏提取物及其含藥血清對mscs增殖的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、何首烏提取物及其含藥血清對MSCs增殖的影響【摘要】目的探討何首烏多糖、二苯乙烯苷及何首烏含藥血清對骨髓間充質干細胞(MSCs)增殖的影響。方法分離、培養(yǎng)大鼠MSCs，分別加入何首烏多糖、二苯乙烯苷及何首烏含藥血清72h后，MTT法檢測大鼠MSCs增殖情況。結果10-4mol/L二苯乙烯苷及10%何首烏含藥血清對大鼠MSCs增殖的影響，與空白組及空白血清組比較，差異有顯著性意義(P<0.05)，不同濃度的何首烏多糖對大鼠MSCs增殖影響不明顯。結論二苯乙烯苷及何首烏含藥血清可促進大鼠MSCs增殖?！娟P鍵詞】何首烏;二苯乙烯苷;含藥血清;骨髓間充質
2、干細胞;細胞增殖 Abstract：ObjectiveTodiscusstheeffectofPolygonummultiflorumpolysaccharide,tetrahydroxystilbeneglycosideandPohygonummutifilorummedicatedserumonproliferationofbonemarrow-derivedmesenchymalstemcells(MSCs).MethodsMSCswereisolatedfromratboneandculturedunderPolygonummultifloru
3、mpolysaccharide,tetrahydroxystilbeneGlycosideorpolygonummultiforummedicatedserumfor72h.Aftertheinduction,theproliferationeffectonMSCswasdetectedwithMTT.ResultsComparedwiththecontrolgroupandblankserumgroup,91×10-4mol/Ltetrahydroxystilbeneglucosideand10%Polygonummultiflorummedicat
4、edserumhadobviouseffectonratMSCs,andthedifferencewassignificant(P<0.05).ConclusionTetrahydroxystilbeneglucosideandPolygonummultiflorummedicatedserumcanpromotetheproliferationofMSCs. Keywords：Polygonummultiflorum;Tetrahydroxystilbeneglucoside;Medicatedserum;Mesenchymalstemcel
5、ls;Cellproliferation 干細胞具先天之精屬性，是先天之精在細胞層次的存在形式[1～3]。MSCs是存在于骨髓中的一類多能干細胞，是組織工程及細胞和基因治療的重要靶細胞，但骨髓中MSCs的含量極少，必須在體外培養(yǎng)擴增才能滿足要求。因此，我們的研究從補腎益精的中藥何首烏入手，探討何首烏有效成分、含藥血清對MSCs增殖的影響，也為干細胞與腎精理論提供有力的藥理學依據?！ ?材料與儀器 1.19藥物何首烏多糖購自惠州仙草公司、二苯乙烯苷購自四川曼斯特公司、何首烏購自廣州中醫(yī)藥大學附屬第一醫(yī)院中藥房，臨用時以低糖培養(yǎng)基配制?！ ?.2動物S
6、D大鼠，雄性，體質量120～150g，用于MSCs細胞的提取;SD大鼠，雌性，體質量220～250g，用于含藥血清的制備。由廣東省醫(yī)學實驗動物中心提供，合格證編號：粵監(jiān)證字2008A020?！ ?.3試劑特級胎牛血清(Gbico，美國)、青/鏈霉素雙抗、0.25%胰蛋白酶-EDTA、PBS緩沖液、DMEM低糖培養(yǎng)液(吉諾生物醫(yī)藥技術有限公司，杭州)、四甲基偶氮唑鹽MTT、二甲基亞砜DMSO(Amresco，美國)?！ ?.4儀器酶標儀(Bio-Rad，美國);二氧化碳孵育箱(ThermoForma，美國)。 2方法 2.1何首烏含藥血清的制備常法制
7、備成含生藥2g/ml的濃煎液，實驗組的用藥劑量相當于臨床等效劑量(根據“實驗動物與人按體表面積比等效計量換算比率表”[4]計算)的10倍，對照組灌服生理鹽水。各組大鼠每日2次灌胃，連續(xù)3d灌胃后，第4天1次服用全天劑量。腹主動脈取血，離心取上清。56℃，30min滅活后，經0.22μm針頭微孔濾器過濾除菌，-70℃9冰箱保存?zhèn)溆?。從而制備出含藥血清及對照血清?！ ?.2含藥培養(yǎng)基的制備稱取80mg何首烏多糖，加入8mlDMEM培養(yǎng)基，攪拌使之充分溶解后，即成10mg/ml母液。稱取二苯乙烯苷5mg，加入適量DMEM培養(yǎng)基，攪拌使之充分溶解后，即成10-
8、3mol/L母液。后續(xù)實驗中根據需要稀釋成相應的不同濃度含藥培養(yǎng)基。用0.22μm針頭濾器過濾
